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靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的第三代嵌合抗原受体的构建与表达
被引量：
5
1
作者
敖仕梅
伍玥
+2 位作者
王春荣
杨玉秀
韩双印
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期603-606,共4页
目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp...
目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp)、铰链区/穿膜区(213 bp)、共刺激分子(CD28和CD137的胞内信号区,123 bp和126 bp)和免疫受体酪氨酸活化基序(CD3ζ链,336 bp)连接成EGFRvⅢsc Fv-CD28-CD137-CD3ζ(EGFRvⅢ/3CAR),克隆入真核表达载体p CDHCMV-MCS-EF1-cop GFP的EcoRⅠ和Bam HⅠ位点,转染293T细胞48 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting检测EGFRvⅢ/3CAR的表达。结果:EGFRvⅢsc Fv和基因合成的CD28-CD137-CD3ζ表达框通过重叠延伸PCR拼接成EGFRvⅢ/3CAR,限制性内切酶片段分析和DNA测序均验证了重组载体序列完全正确,Western blotting应用抗人-CD3ζ抗体检测到EGFRvⅢ/3CAR在293T细胞中的完整表达(相对分子质量约58 k D)。结论:成功构建嵌合抗原受体EGFRvⅢ/3CAR表达载体,为嵌合抗原受体修饰T细胞靶向治疗肿瘤提供研究基础。
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关键词
嵌合抗原受体
过继免疫肿瘤治疗
表皮生长因子受体Ⅲ型突变体
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职称材料
人脑胶质瘤组织中CD133与EGFRvⅢ的：共表达及其临床意义
被引量：
1
2
作者
栗超跃
赵黎明
+1 位作者
田向阳
韩双印
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期628-631,共4页
目的:观察人脑胶质瘤组织中肿瘤干细胞标记物CD133与表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factorreceptor variantⅢ,EGFRvⅢ)的共表达情况及其临床意义。方法:取河南省人民医院自2011年1月至2011年6月手术切除的脑胶质瘤组织4...
目的:观察人脑胶质瘤组织中肿瘤干细胞标记物CD133与表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factorreceptor variantⅢ,EGFRvⅢ)的共表达情况及其临床意义。方法:取河南省人民医院自2011年1月至2011年6月手术切除的脑胶质瘤组织40例,其中Ⅱ级17例、Ⅲ级12例、Ⅳ级11例。流式细胞术检测不同级别脑胶质瘤中CD133+、EGFRvⅢ+和CD133+/EGFRvⅢ+细胞所占的比例,分析其临床意义。结果:CD133、EGFRvⅢ在人脑胶质瘤组织中的表达率及其阳性表达细胞比例均随肿瘤级别逐步升高(均P﹤0.05)。不同级别脑胶质瘤中均发现CD133和EGFRvⅢ共表达细胞,CD133+/EG-FRvⅢ+细胞共表达率在(4.75±1.26)%～(18.26±3.45)%之间,Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中CD133+/EGFRvⅢ+细胞的共表达率高于Ⅱ级(P﹤0.05)。CD133+/EGFRvⅢ+细胞比CD133+细胞、EGFRvⅢ+细胞对脑胶质瘤患者的生存期影响更大,共表达细胞患者的中位生存时间明显缩短。结论:人脑胶质瘤组织中存在CD133+/EGFRvⅢ+共表达细胞,其与胶质瘤的恶性程度及患者生存时间有关,本研究为脑胶质瘤的靶向治疗提供了潜在新的靶点。
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关键词
脑胶质瘤
肿瘤干细胞
CD133
EGFRvⅢ
流式细胞术
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职称材料
题名
靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的第三代嵌合抗原受体的构建与表达
被引量：
5
1
作者
敖仕梅
伍玥
王春荣
杨玉秀
韩双印
机构
新乡医学院研究生部
郑州大学人民医院中心实验室
郑州大学人民医院消化内科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期603-606,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81172415)
国家卫计委科研基金资助项目(No.201301010)~~
文摘
目的:构建第三代靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体表达载体,为肿瘤过继免疫治疗提供实验基础。方法:运用分子克隆方法将嵌合抗原受体的胞外抗原结合区(EGFRvⅢ单克隆抗体的轻链和重链可变区,EGFRvⅢsc Fv,726 bp)、铰链区/穿膜区(213 bp)、共刺激分子(CD28和CD137的胞内信号区,123 bp和126 bp)和免疫受体酪氨酸活化基序(CD3ζ链,336 bp)连接成EGFRvⅢsc Fv-CD28-CD137-CD3ζ(EGFRvⅢ/3CAR),克隆入真核表达载体p CDHCMV-MCS-EF1-cop GFP的EcoRⅠ和Bam HⅠ位点,转染293T细胞48 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting检测EGFRvⅢ/3CAR的表达。结果:EGFRvⅢsc Fv和基因合成的CD28-CD137-CD3ζ表达框通过重叠延伸PCR拼接成EGFRvⅢ/3CAR,限制性内切酶片段分析和DNA测序均验证了重组载体序列完全正确,Western blotting应用抗人-CD3ζ抗体检测到EGFRvⅢ/3CAR在293T细胞中的完整表达(相对分子质量约58 k D)。结论:成功构建嵌合抗原受体EGFRvⅢ/3CAR表达载体,为嵌合抗原受体修饰T细胞靶向治疗肿瘤提供研究基础。
关键词
嵌合抗原受体
过继免疫肿瘤治疗
表皮生长因子受体Ⅲ型突变体
Keywords
chimeric antigen receptor
adoptive tumor immunotherapy
EGFRvⅢ
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人脑胶质瘤组织中CD133与EGFRvⅢ的：共表达及其临床意义
被引量：
1
2
作者
栗超跃
赵黎明
田向阳
韩双印
机构
郑州大学人民医院神经外科
新乡医学院研究生部
郑州大学人民医院中心实验室
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期628-631,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81172415)~~
文摘
目的:观察人脑胶质瘤组织中肿瘤干细胞标记物CD133与表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal growth factorreceptor variantⅢ,EGFRvⅢ)的共表达情况及其临床意义。方法:取河南省人民医院自2011年1月至2011年6月手术切除的脑胶质瘤组织40例,其中Ⅱ级17例、Ⅲ级12例、Ⅳ级11例。流式细胞术检测不同级别脑胶质瘤中CD133+、EGFRvⅢ+和CD133+/EGFRvⅢ+细胞所占的比例,分析其临床意义。结果:CD133、EGFRvⅢ在人脑胶质瘤组织中的表达率及其阳性表达细胞比例均随肿瘤级别逐步升高(均P﹤0.05)。不同级别脑胶质瘤中均发现CD133和EGFRvⅢ共表达细胞,CD133+/EG-FRvⅢ+细胞共表达率在(4.75±1.26)%～(18.26±3.45)%之间,Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中CD133+/EGFRvⅢ+细胞的共表达率高于Ⅱ级(P﹤0.05)。CD133+/EGFRvⅢ+细胞比CD133+细胞、EGFRvⅢ+细胞对脑胶质瘤患者的生存期影响更大,共表达细胞患者的中位生存时间明显缩短。结论:人脑胶质瘤组织中存在CD133+/EGFRvⅢ+共表达细胞,其与胶质瘤的恶性程度及患者生存时间有关,本研究为脑胶质瘤的靶向治疗提供了潜在新的靶点。
关键词
脑胶质瘤
肿瘤干细胞
CD133
EGFRvⅢ
流式细胞术
Keywords
glioma
cancer stem cell
CD133
EGFRvⅢ
flow cytometry
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
R730.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的第三代嵌合抗原受体的构建与表达
敖仕梅
伍玥
王春荣
杨玉秀
韩双印
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人脑胶质瘤组织中CD133与EGFRvⅢ的：共表达及其临床意义
栗超跃
赵黎明
田向阳
韩双印
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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