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睾酮多克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立 被引量:2
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作者 李超英 姜金庆 +3 位作者 李凤云 杨金明 吴世秀 刘明成 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第16期3554-3556,3563,共4页
采用优化的碳化二亚胺法制备睾酮(TES)人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA标准曲线。标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.096~92.200 ng/mL,相关系数R2=0.972 2,半数抑制浓度(IC50)为2.800 ng/mL,最低检测限(L... 采用优化的碳化二亚胺法制备睾酮(TES)人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA标准曲线。标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.096~92.200 ng/mL,相关系数R2=0.972 2,半数抑制浓度(IC50)为2.800 ng/mL,最低检测限(LOD)为0.035 ng/mL;抗体与去甲睾酮的交叉反应率为22.3%,与其他检测化合物的交叉反应很小或忽略不计。羊尿20倍稀释后进行添加回收试验,其添加值与检测值的相关系数为0.985 2。因此,该免疫学方法可用于动物尿液中睾酮残留水平的定量分析。 展开更多
关键词 睾酮 人工抗原 多克隆抗体 间接竞争ELISA
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诺氟沙星单克隆抗体的制备及初步应用 被引量:3
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作者 李超英 姜金庆 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期210-213,共4页
采用优化的碳二亚胺法制备诺氟沙星(NOR)人工抗原,紫外扫描和红外光谱图表明人工抗原偶联成功。采用细胞融合技术筛选抗NOR单克隆抗体(NORmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备NORmAb,建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线。结果表明,筛... 采用优化的碳二亚胺法制备诺氟沙星(NOR)人工抗原,紫外扫描和红外光谱图表明人工抗原偶联成功。采用细胞融合技术筛选抗NOR单克隆抗体(NORmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备NORmAb,建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线。结果表明,筛选的3株杂交瘤细胞分泌的抗体为IgG1亚型,具k轻链;建立的icELISA标准曲线在PBS中的的线性检测范围为0.04~43.6ng/mL,IC50值为0.62ng/mL,检测限(LOD)为0.02ng/mL;抗体与环丙沙星(87.2%)、培氟沙星(76.9%)、依诺沙星(66.8%)、恩诺沙星(48.6%)和洛美沙星(36.6%)有较高的交叉反应率;禽肉基质中NOR添加回收率满足检测要求。 展开更多
关键词 诺氟沙星 人工抗原 氟喹诺酮 单克隆抗体 间接竞争ELISA
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睾酮单克隆杂交瘤细胞株的筛选及性能鉴定 被引量:1
3
作者 李超英 姜金庆 +3 位作者 李凤云 杨金明 刘明成 吴世秀 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第6期22-25,共4页
为建立大批量样品中睾酮残留的检测方法,采用细胞融合技术、间接ELISA和间接竞争ELISA(icELISA)等方法,对睾酮单克隆杂交瘤细胞株进行了筛选及性能鉴定。结果表明:筛选出5株(T2C3,T2D9,T3A5,T4B1、T4E8)杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG1型,... 为建立大批量样品中睾酮残留的检测方法,采用细胞融合技术、间接ELISA和间接竞争ELISA(icELISA)等方法,对睾酮单克隆杂交瘤细胞株进行了筛选及性能鉴定。结果表明:筛选出5株(T2C3,T2D9,T3A5,T4B1、T4E8)杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG1型,具k轻链,亲和常数为4.38×108~5.24×109 L/mol;腹水纯化后的抗体效价和灵敏度(IC50)分别为0.64×105~2.56×105和1.58~2.92ng/mL。以T2D9细胞株建立icELISA标准曲线,其线性范围为0.06~63.5ng/mL,检测限和IC50值分别为0.04和1.55ng/mL。 展开更多
关键词 睾酮 杂交瘤细胞株 单克隆抗体 间接竞争ELISA
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来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
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作者 鲁毅 徐萍 +6 位作者 李任峰 李超英 李学斌 王三虎 陈明艳 刘卫 邓佳霖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期750-754,共5页
目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然... 目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 来航鸡 FOXL2 单克隆抗体 表位
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家畜肢体骨折固定架
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作者 刘明林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1996年第7期50-50,共1页
传统的骨折固定为绷带加竹片、木条或石膏绷带。这样固定操作及拆除都费力。并且开放性骨折又不能在中途换药,往往效果不佳,有时由于中途不能换药造成感染,以致治疗失败。此固定架取料方便,操作简单,又能随时对患处局部换药,以达到事半... 传统的骨折固定为绷带加竹片、木条或石膏绷带。这样固定操作及拆除都费力。并且开放性骨折又不能在中途换药,往往效果不佳,有时由于中途不能换药造成感染,以致治疗失败。此固定架取料方便,操作简单,又能随时对患处局部换药,以达到事半功倍之功效。 展开更多
关键词 家畜 肢体骨折固定架 骨折
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