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基于外周血单个核细胞转录组测序结果的硅沉着病发病机制研究
1
作者 李海斌 张林 +8 位作者 关毅 赵英政 李宁 刘楠 王永恒 周强 常美玉 吴卫东 姚三巧 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2024年第6期782-787,共6页
目的:筛选硅沉着病患者外周血单个核细胞中的差异表达基因,并分析其相关调控通路,探索硅沉着病的发病机制。方法:采集3例硅沉着病患者和3名健康对照空腹静脉血,分离外周血单个核细胞,采用高通量测序技术和生物信息学分析技术分析差异表... 目的:筛选硅沉着病患者外周血单个核细胞中的差异表达基因,并分析其相关调控通路,探索硅沉着病的发病机制。方法:采集3例硅沉着病患者和3名健康对照空腹静脉血,分离外周血单个核细胞,采用高通量测序技术和生物信息学分析技术分析差异表达基因和可能信号通路,采用蛋白质-蛋白质互作网络筛选中枢基因。选取常规体检的117名工人作为验证人群,分为健康对照组、接尘对照组和硅沉着病组,采用RT-qPCR技术检测3组研究对象外周血单个核细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、整合素β1(ITGβ1)和整合素连接激酶(ILK)mRNA表达水平。结果:转录组数据分析检测到80813个mRNA;limma测试共获得1915个差异表达基因,其中987个表达上调,928个表达下调。蛋白质-蛋白质互作网络分析提示差异表达基因聚焦到3个中枢基因:PI3K、ITGβ1和ILK。基因集富集分析证实,PI3K、ITGβ1和ILK可能通过Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)信号通路、Wnt信号通路和细胞黏附分子信号通路参与硅沉着病发生发展。与健康对照组比较,接尘对照组和硅沉着病组外周血单个核细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、PI3K、ITGβ1和ILK mRNA表达水平升高,且硅沉着病组Ⅰ型胶原、PI3K、ITGβ1 mRNA表达水平更高(P<0.05)。结论:PI3K、ITGβ1和ILK基因可能通过JAK-STAT、Wnt和细胞黏附分子信号通路参与硅沉着病发生发展过程。 展开更多
关键词 硅沉着病 外周血单个核细胞 磷酸肌醇3-激酶 整合素Β1 整合素连接激酶
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煤焦沥青烟提取物对BEAS-2B细胞环氧化酶-2mRNA表达的影响
2
作者 杨维超 逯洋 +4 位作者 李娟 晋乐飞 刘文佳 燕贞 吴卫东 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第4期491-493,共3页
目的:探讨煤焦沥青烟提取物(CTPE)对人支气管上皮细胞环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法:应用RT-PCR方法测定不同质量浓度(2、4、8 mg/L)CTPE作用不同时间(2、4、8 h)对人支气管上皮BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达水平影响。使用放线菌... 目的:探讨煤焦沥青烟提取物(CTPE)对人支气管上皮细胞环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法:应用RT-PCR方法测定不同质量浓度(2、4、8 mg/L)CTPE作用不同时间(2、4、8 h)对人支气管上皮BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达水平影响。使用放线菌素(Act)D(1 mg/L)作用于BEAS-2B细胞,观察其对2 mg/L CTPE作用30 min后的BEAS-2B细胞COX-2基因转录的影响。利用ZnSO4溶液刺激BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达,去除ZnSO4后,加入1 mg/L的Act D 30 min,检测CTPE作用不同时间点(0、2、4 h)的COX-2 mRNA表达的变化。结果:2、4、8 mg/L CTPE刺激均可以使BEAS-2B细胞COX-2 mRNA表达水平升高(F组间=71.750,F时间=93.120,F交互=17.300,P<0.001),2 mg/L是最佳剂量。用Act D(1 mg/L)预处理细胞30 min,可降低CTPE对COX-2 mRNA表达的诱导作用(FAct D=174.203,FCTPE=260.312,F交互=188.521,P<0.001)。使用ZnSO4刺激,然后使用Act D终止COX-2 mRNA合成后,不同时间点,CTPE组和对照组COX-2 mRNA的表达差异有统计学意义(F组间=365.700,F时间=37.780,F交互=6.240,P<0.001)。结论:CTPE可以通过转录水平和转录后水平诱导人支气管上皮细胞COX-2 mRNA的表达。 展开更多
关键词 煤焦沥青烟提取物 人支气管上皮细胞 环氧化酶-2
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血管紧张素转化酶2参与臭氧暴露导致的小鼠肺部炎症及气道重塑 被引量：1
3
作者 王月霞 张钰 +8 位作者 张亮 李梦圆 朱培育 纪望全 梁若楠 秦露伟 吴卫东 冯斐斐 晋乐飞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期860-867,共8页
目的研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在臭氧暴露致小鼠肺部炎症及气道重塑中的作用。方法16只野生型(WT)C57BL/6J小鼠和16只ACE2敲除(KO)小鼠分别暴露于空气和臭氧(0.8 ppm)中,每天暴露3 h,连续暴露5 d。分别设置Air WT组,Air KO组,Ozone W... 目的研究血管紧张素转换酶2(ACE2)在臭氧暴露致小鼠肺部炎症及气道重塑中的作用。方法16只野生型(WT)C57BL/6J小鼠和16只ACE2敲除(KO)小鼠分别暴露于空气和臭氧(0.8 ppm)中,每天暴露3 h,连续暴露5 d。分别设置Air WT组,Air KO组,Ozone WT组和Ozone KO组。Masson染色观察小鼠肺组织胶原沉积情况,HE染色观察小鼠肺部病理学改变,并进行评分;收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),并进行细胞计数;分别采用BCA法和酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF总蛋白和细胞因子浓度;荧光定量PCR检测肺组织中气道重塑相关指标的mRNA表达;小鼠的气道阻力采用小动物呼吸机测量(乙酰甲胆碱激发)。结果臭氧暴露ACE2 KO小鼠肺组织炎症病理学变化总分显著高于臭氧暴露WT小鼠(P<0.05)。Masson染色结果显示,臭氧暴露小鼠肺组织支气管和肺泡周围有大量的胶原沉积,臭氧暴露ACE2 KO小鼠肺组织的支气管和肺泡的胶原沉积阳性区域面积为(19.62±3.16)%、(21.63±3.78)%,高于臭氧暴露WT小鼠肺组织的(6.49±1.34)%、(4.44±0.99)%,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。臭氧暴露ACE2 KO小鼠BALF中总细胞数与总蛋白含量均高于臭氧暴露WT小鼠,差异无统计学意义(P>0.05)。臭氧暴露ACE2 KO小鼠BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α、趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL1/KC)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)水平均高于臭氧暴露WT小鼠,其中IL-1β水平的变化差异具有统计学意义(P<0.05)。臭氧暴露ACE2 KO小鼠的肺组织中的基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MMP-13、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP4)、Ⅰ型胶原α1(COL1A1)、TGF-β的mRNA水平均明显高于WT组小鼠,两组的MMP-9、TIMP4、COL1A1、TGF-β的mRNA水平差异具有统计学意义(P<0.01)。两组小鼠在0、10、25、100 mg/mL的乙酰甲胆碱浓度下的气道阻力的差异无统计学意义(P>0.05)。结论ACE2参与臭氧暴露导致的小鼠肺部炎症及气道重塑。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 臭氧 炎症 气道重塑
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