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多重实时荧光PCR检测禽网状内皮组织增生症病毒方法的建立以及初步应用
被引量：
2
1
作者
缪佶
鲍衍清
+2 位作者
邵红霞
钱琨
秦爱建
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2015年第1期1-8,共8页
本文建立了一种快速、灵敏、特异性强的禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）检测方法，并对REV在鸡胚成纤维细胞（chick embryo fibroblast，CEF）上的增殖动态规律进行研究。分别针对gag、env以及LTR基因的...
本文建立了一种快速、灵敏、特异性强的禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）检测方法，并对REV在鸡胚成纤维细胞（chick embryo fibroblast，CEF）上的增殖动态规律进行研究。分别针对gag、env以及LTR基因的保守序列设计3对引物，利用重组质粒作为模板，绘制3种不同基因的标准曲线。检测结果显示，本研究建立了多重实时荧光PCR检测方法，所制备的标准品模板在108~101copies范围内与Ct值之间呈现良好的线性关系，且最低检出量为101copies。REV感染CEF后gag、env、LTR基因的拷贝数均先减少后增多。通过实时荧光PCR技术与间接免疫荧光方法检测，发现REV在CEF上复制的初始阶段呈现病毒适应过程，此后病毒大量复制，表现出明显的增长趋势。该研究不仅为REV的诊断技术提供了一种新的方法，同时也为深入研究REV的感染机制和致病机理奠定了基础。
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关键词
禽网状内皮组织增生症病毒
鸡胚成纤维细胞
实时荧光PCR
复制
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职称材料
题名
多重实时荧光PCR检测禽网状内皮组织增生症病毒方法的建立以及初步应用
被引量：
2
1
作者
缪佶
鲍衍清
邵红霞
钱琨
秦爱建
机构
教育部禽类预防医学省部共建重点实验室
扬州大学江苏
省
动物
预防
医学
重点
实验室
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2015年第1期1-8,共8页
基金
江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
江苏高校优势学科建设工程资助项目
国家科技基础性工作专项(2013FY113300-4)
文摘
本文建立了一种快速、灵敏、特异性强的禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）检测方法，并对REV在鸡胚成纤维细胞（chick embryo fibroblast，CEF）上的增殖动态规律进行研究。分别针对gag、env以及LTR基因的保守序列设计3对引物，利用重组质粒作为模板，绘制3种不同基因的标准曲线。检测结果显示，本研究建立了多重实时荧光PCR检测方法，所制备的标准品模板在108~101copies范围内与Ct值之间呈现良好的线性关系，且最低检出量为101copies。REV感染CEF后gag、env、LTR基因的拷贝数均先减少后增多。通过实时荧光PCR技术与间接免疫荧光方法检测，发现REV在CEF上复制的初始阶段呈现病毒适应过程，此后病毒大量复制，表现出明显的增长趋势。该研究不仅为REV的诊断技术提供了一种新的方法，同时也为深入研究REV的感染机制和致病机理奠定了基础。
关键词
禽网状内皮组织增生症病毒
鸡胚成纤维细胞
实时荧光PCR
复制
Keywords
Reticuloendotheliosis virus （REV）
chicken embryo fibroblasts （CEF）
real-time PCR
replication
分类号
S852.659.3 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多重实时荧光PCR检测禽网状内皮组织增生症病毒方法的建立以及初步应用
缪佶
鲍衍清
邵红霞
钱琨
秦爱建
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2015
2
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