目的基质刚度作为软骨微环境的重要力学特征在骨关节炎(OA)发病进程中至关重要。研究显示,细胞响应力刺激时会发生表观遗传学改变,并引起基因表达和功能异常,进而调控疾病的发生发展。然而,目前仍不清楚基质刚度是否通过组蛋白乳酰化修...目的基质刚度作为软骨微环境的重要力学特征在骨关节炎(OA)发病进程中至关重要。研究显示,细胞响应力刺激时会发生表观遗传学改变,并引起基因表达和功能异常,进而调控疾病的发生发展。然而,目前仍不清楚基质刚度是否通过组蛋白乳酰化修饰这一新的表观遗传学机制驱动OA病变。鉴此,本文拟构建基质刚度力学微环境模型,探究软骨细胞感知与响应基质硬度变化,调控组蛋白乳酰化修饰参与OA病变的力生物学机制。方法(1)采用乳酰化抗体分析基质刚度是否介导软骨细胞的乳酰化修饰参与OA病变;(2)采用乳酰化抗体检测不同基质刚度上的软骨细胞的乳酰化修饰水平;(3)IP免疫荧光分析(In-Cell Western)探究在300 k Pa诱导状态下的5种组蛋白H1、H2A、H2B、H3和H4的乳酰化修饰水平;(4)采用免疫荧光染色分析不同基质刚度下细胞核形变程度同H3乳酰化修饰水平的相关性。结果(1)基质刚度通过乳酰化修饰调控OA病变;(2)基质刚度通过乳酰化修饰(lactylation,La)介导OA病变;(3)OA病变的乳酰化修饰发生在H3组蛋白上;(4)基质刚度通过影响细胞核形变调控H3组蛋白乳酰化修饰参与OA病变。结论基质刚度通过影响细胞核形变调控H3组蛋白乳酰化修饰参与OA病变。展开更多
目的肝癌干细胞(Liver cancer stem cells,LCSCs)是导致恶性肿瘤侵袭、转移和耐药的关键因素之一。LCSCs调控肝癌发生发展涉及多因素的参与,其中力学因素在肝癌发生发展过程中发挥关键作用。研究显示,肿瘤细胞响应力学刺激时会发生表观...目的肝癌干细胞(Liver cancer stem cells,LCSCs)是导致恶性肿瘤侵袭、转移和耐药的关键因素之一。LCSCs调控肝癌发生发展涉及多因素的参与,其中力学因素在肝癌发生发展过程中发挥关键作用。研究显示,肿瘤细胞响应力学刺激时会发生表观遗传修饰改变,并影响基因转录和蛋白质功能,进而参与关键细胞过程。乳酸化修饰是糖酵解和乳酸水平的指标,在多种疾病中发挥重要功能。然而,关于力学因素是否通过乳酸化修饰调控LCSCs目前仍不清楚。因此,本文探讨力学应力刺激调控LCSCs的组蛋白乳酸化修饰位点及下游分子机制。方法(1)利用微流控技术构建挤压应力加载模型;(2)采用GC-MS代谢组学等方法检测挤压应力刺激对LCSCs糖酵解水平和乳酸生成的影响;(3)采用蛋白免疫印迹等方法检测挤压应力刺激对LCSCs组蛋白乳酸化修饰水平的影响;(4)采用qPCR和蛋白免疫印迹等方法检测挤压应力刺激对LCSCs恶性生物学行为的影响。结果(1)挤压应力刺激导致LCSCs糖酵解水平和乳酸生成水平显著升高;(2)挤压应力刺激导致LCSCs组蛋白H3K14和H3K56位点乳酸化修饰水平显著上升;(3)挤压应力刺激通过组蛋白乳酸化修饰促进LCSCs的增殖、迁移和耐药性。结论挤压应力通过组蛋白乳酸化修饰调控LCSCs的恶性生物学行为。展开更多
文摘目的基质刚度作为软骨微环境的重要力学特征在骨关节炎(OA)发病进程中至关重要。研究显示,细胞响应力刺激时会发生表观遗传学改变,并引起基因表达和功能异常,进而调控疾病的发生发展。然而,目前仍不清楚基质刚度是否通过组蛋白乳酰化修饰这一新的表观遗传学机制驱动OA病变。鉴此,本文拟构建基质刚度力学微环境模型,探究软骨细胞感知与响应基质硬度变化,调控组蛋白乳酰化修饰参与OA病变的力生物学机制。方法(1)采用乳酰化抗体分析基质刚度是否介导软骨细胞的乳酰化修饰参与OA病变;(2)采用乳酰化抗体检测不同基质刚度上的软骨细胞的乳酰化修饰水平;(3)IP免疫荧光分析(In-Cell Western)探究在300 k Pa诱导状态下的5种组蛋白H1、H2A、H2B、H3和H4的乳酰化修饰水平;(4)采用免疫荧光染色分析不同基质刚度下细胞核形变程度同H3乳酰化修饰水平的相关性。结果(1)基质刚度通过乳酰化修饰调控OA病变;(2)基质刚度通过乳酰化修饰(lactylation,La)介导OA病变;(3)OA病变的乳酰化修饰发生在H3组蛋白上;(4)基质刚度通过影响细胞核形变调控H3组蛋白乳酰化修饰参与OA病变。结论基质刚度通过影响细胞核形变调控H3组蛋白乳酰化修饰参与OA病变。
文摘目的肝癌干细胞(Liver cancer stem cells,LCSCs)是导致恶性肿瘤侵袭、转移和耐药的关键因素之一。LCSCs调控肝癌发生发展涉及多因素的参与,其中力学因素在肝癌发生发展过程中发挥关键作用。研究显示,肿瘤细胞响应力学刺激时会发生表观遗传修饰改变,并影响基因转录和蛋白质功能,进而参与关键细胞过程。乳酸化修饰是糖酵解和乳酸水平的指标,在多种疾病中发挥重要功能。然而,关于力学因素是否通过乳酸化修饰调控LCSCs目前仍不清楚。因此,本文探讨力学应力刺激调控LCSCs的组蛋白乳酸化修饰位点及下游分子机制。方法(1)利用微流控技术构建挤压应力加载模型;(2)采用GC-MS代谢组学等方法检测挤压应力刺激对LCSCs糖酵解水平和乳酸生成的影响;(3)采用蛋白免疫印迹等方法检测挤压应力刺激对LCSCs组蛋白乳酸化修饰水平的影响;(4)采用qPCR和蛋白免疫印迹等方法检测挤压应力刺激对LCSCs恶性生物学行为的影响。结果(1)挤压应力刺激导致LCSCs糖酵解水平和乳酸生成水平显著升高;(2)挤压应力刺激导致LCSCs组蛋白H3K14和H3K56位点乳酸化修饰水平显著上升;(3)挤压应力刺激通过组蛋白乳酸化修饰促进LCSCs的增殖、迁移和耐药性。结论挤压应力通过组蛋白乳酸化修饰调控LCSCs的恶性生物学行为。
