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重组人酸性成纤维生长因子对离体小鼠胸主动脉的弱缩血管作用及其机制 被引量:5
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作者 庄岚 李校堃 +4 位作者 许华 黄亚东 沈兵 刘建军 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期127-128,共2页
关键词 重组人酸性成纤维生长因子 胸主动脉 内皮细胞 平滑肌细胞 收缩
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人EGF受体胞外域cDNA克隆及其序列分析 被引量:6
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作者 徐丽慧 洪岸 何贤辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期168-173,179,共7页
目的:克隆编码人表皮生长因子受体(EGFR)胞外域的cDNA ,构建可溶性EGFR(sEGFR)的哺乳动物细胞表达载体。方法:以RT -PCR方法从人胎盘中克隆编码EGFR胞外域的cDNA ,测定其序列,构建sEGFR真核表达载体。结果:从人胎盘绒毛组织中成功克隆编... 目的:克隆编码人表皮生长因子受体(EGFR)胞外域的cDNA ,构建可溶性EGFR(sEGFR)的哺乳动物细胞表达载体。方法:以RT -PCR方法从人胎盘中克隆编码EGFR胞外域的cDNA ,测定其序列,构建sEGFR真核表达载体。结果:从人胎盘绒毛组织中成功克隆编码EGFR胞外域的cNDA ,通过PCR方法在起始位点前加入Kozak序列并添加终止密码,构建了sEGFR的真核表达载体。该基因编码的蛋白质包含信号肽以及L1、S1、L2和S2等4个结构域。序列分析表明该基因有3个碱基与以往报道的基因不同,即15 6 2G→A、16 2 0G→C、1887T→A ,前两个改变导致氨基酸Arg4 97Lys和Lys5 16Asn的改变,后一个为同义突变Thr6 0 5。结论:成功克隆编码EGFR胞外域的cD NA 。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 可溶性EGFR 单核苷酸多态性
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碱性成纤维细胞生长因子生物活性的ELISA检测 被引量:4
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作者 安全 李校 +2 位作者 赵文 项琪 孟娟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期457-460,共4页
目的:寻找一种简便、经济、灵敏度高而不需使用放射性同位素或MTT的生物活性检测方法,对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行活性检测。方法:运用多克隆抗体ELISA、单克隆抗体ELISA和MTT法分别对bFGF进行生物活性检测,并对结果和重现性进... 目的:寻找一种简便、经济、灵敏度高而不需使用放射性同位素或MTT的生物活性检测方法,对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行活性检测。方法:运用多克隆抗体ELISA、单克隆抗体ELISA和MTT法分别对bFGF进行生物活性检测,并对结果和重现性进行比较。结果:ELISA测得结果与MTT法相比无显著差异,且其精密度明显优于MTT法。结论:用ELISA检测bFGF生物活性,简便准确,值得推广应用。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) ELISA MTF 生物活性检测
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Runx2通过抑制细胞巨自噬以诱导C2C12细胞向成骨细胞分化 被引量:4
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作者 余守和 洪岸 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期481-487,共7页
目的:探讨细胞巨自噬与Runx2诱导C2C12细胞成骨分化的关系。方法:在强力霉素(doxycyc-line,Dox)诱导Runx2表达的细胞系C2C12/Runx2Dox中进行研究。Dox(10 mg/L)处理0 d、1 d、3 d及6 d后,real-time qPCR检测LC3b、Beclin-1、p62和LAMP-... 目的:探讨细胞巨自噬与Runx2诱导C2C12细胞成骨分化的关系。方法:在强力霉素(doxycyc-line,Dox)诱导Runx2表达的细胞系C2C12/Runx2Dox中进行研究。Dox(10 mg/L)处理0 d、1 d、3 d及6 d后,real-time qPCR检测LC3b、Beclin-1、p62和LAMP-2表达情况,Western blotting分析LC3-I/LC3-Ⅱ比值。设置不同的3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)或雷帕霉素(rapamycin,Rap)浓度,Dox处理14 d后分析碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性。用3-MA(5 mmol/L)或Rap(10μmol/L)与Dox共同处理1 d、3 d及6 d后检测ALP及骨钙素(osteocalcin,OC)表达情况。结果:(1)C2C12细胞向成骨分化时,LC3b与Beclin-1显著下调,p62与LAMP-2无明显变化;(2)LC3-I向LC3-Ⅱ转换的过程被抑制;(3)3-MA(5 mmol/L)可增强ALP活性,而Rap(10μmol/L)则抑制其活性;(4)3-MA可上调ALP及OC表达,Rap则下调二者表达。结论:Runx2通过下调LC3和Beclin-1、抑制LC3-I向LC3-Ⅱ转换的方式阻碍自噬体形成,以诱导C2C12细胞分化为成骨细胞。 展开更多
关键词 RUNX2 C2C12细胞 成骨分化 巨自噬
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