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猪丹毒杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
1
作者
宋前进
刘溪源
+5 位作者
乌吉斯古楞
陈亚飞
路乾
刘维平
张静
曹晓真
《中国动物检疫》
2025年第11期77-82,共6页
为建立猪丹毒杆菌的快速检测方法,根据GenBank数据库中猪丹毒杆菌荚膜多糖基因(cps)序列设计并合成引物及探针,通过对引物浓度、退火温度等条件进行优化,建立检测猪丹毒杆菌的TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、灵敏度和重复性进行...
为建立猪丹毒杆菌的快速检测方法,根据GenBank数据库中猪丹毒杆菌荚膜多糖基因(cps)序列设计并合成引物及探针,通过对引物浓度、退火温度等条件进行优化,建立检测猪丹毒杆菌的TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、灵敏度和重复性进行验证。结果显示:当质粒标准品拷贝数浓度为2.28×10^(8)~2.28×10^(1) copies/μL时,质粒标准品拷贝数浓度对数和Ct值呈现良好的线性关系;仅对猪丹毒杆菌核酸样品扩增后出现特异性曲线,与其他23种常见猪病病原核酸均无交叉反应;对猪丹毒杆菌的检测灵敏度比普通PCR高100倍,重复性试验组内和组间变异系数均小于2%。结果表明,本研究建立的方法具有特异性强、灵敏度高、稳定性好的优点,可用于猪丹毒杆菌感染的早期诊断。
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关键词
猪丹毒杆菌
TaqMan荧光定量PCR
检测方法
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职称材料
题名
猪丹毒杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
1
作者
宋前进
刘溪源
乌吉斯古楞
陈亚飞
路乾
刘维平
张静
曹晓真
机构
银川市畜牧技术推广服务
中心
金宇保灵生物药品有限公司
敖汉旗动物疾病预防控制中心
出处
《中国动物检疫》
2025年第11期77-82,共6页
文摘
为建立猪丹毒杆菌的快速检测方法,根据GenBank数据库中猪丹毒杆菌荚膜多糖基因(cps)序列设计并合成引物及探针,通过对引物浓度、退火温度等条件进行优化,建立检测猪丹毒杆菌的TaqMan荧光定量PCR方法,并对其特异性、灵敏度和重复性进行验证。结果显示:当质粒标准品拷贝数浓度为2.28×10^(8)~2.28×10^(1) copies/μL时,质粒标准品拷贝数浓度对数和Ct值呈现良好的线性关系;仅对猪丹毒杆菌核酸样品扩增后出现特异性曲线,与其他23种常见猪病病原核酸均无交叉反应;对猪丹毒杆菌的检测灵敏度比普通PCR高100倍,重复性试验组内和组间变异系数均小于2%。结果表明,本研究建立的方法具有特异性强、灵敏度高、稳定性好的优点,可用于猪丹毒杆菌感染的早期诊断。
关键词
猪丹毒杆菌
TaqMan荧光定量PCR
检测方法
Keywords
ER
TaqMan real-time quantitative PCR
detection method
分类号
S851 [农业科学—预防兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪丹毒杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
宋前进
刘溪源
乌吉斯古楞
陈亚飞
路乾
刘维平
张静
曹晓真
《中国动物检疫》
2025
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