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破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备被引量：1: 1; 作者吴素霞柴立辉 +3 位作者王战争刘广超田文志马远方《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1374-1377,1392,共5页; 目的:为了获得真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和OCILRP2特异性抗体,用于OCILRP2生物学功能的进一步研究。方法:构建了融合人IgG Fc段的小鼠OCILRP2真核表达载体pIg-CD5-OCILRP2,将pIg-CD5-OCILRP2转染CHO细胞,G418筛选稳定表达细胞株;Pro... 展开更多; 关键词 C型凝集素相关蛋白真核表达多克隆抗体树突状细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

FILIP-1L蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1: 2; 作者都景芳顿国庆 +4 位作者张舒曼褚留杰李淑莲胡延忠马远方《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期832-837,共6页; 目的:表达、纯化GST-FILIP-1L融合蛋白,制备FILIP-1L多克隆抗体。方法:pGEX-4T3-FILIP-1L重组质粒转化E.coliBL21大肠杆菌,IPTG诱导GST-FILIP-1L融合蛋白表达,Glutathion Sepharse 4B纯化GST-FILIP-1L融合蛋白。将纯化的GST-FILIP-1L融... 展开更多; 关键词 FILIP-1L 融合蛋白多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

Foxp3对肺癌细胞增殖及成瘤的影响被引量：5: 3; 作者刘瑞敏晁玮霞 +4 位作者王少龙王明丽贾彩云白慧玲马远方《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1481-1484,共4页; 目的:研究转录因子Foxp3在肺癌细胞中的高表达对肺癌细胞增殖及成瘤的影响。方法:利用脂质体转染法建立稳定高表达Foxp3的NCIH-h Foxp3肺癌细胞株。MTT法观测NCIH-h Foxp3及对照细胞的增殖。ELISA法检测NCIHh Foxp3及对照细胞IL-8、IL-1... 展开更多; 关键词 FOXP3 高表达增殖成瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响被引量：1: 4; 作者娄强谢盼盼 +2 位作者崔秀坤马远方胡延忠《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1699-1703,共5页; 目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳... 展开更多; 关键词热休克因子4b 晶状体上皮细胞热休克蛋白点突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

免疫调节因子TIPE2慢病毒载体的构建及病毒包装: 5; 作者王耀辉娄强 +2 位作者陈九格张军马远方《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1077-1079,共3页; 目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒载体的构建及病毒包装。方法:首先构建带有3×FLAG标签的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2质粒,确认表达后再将标签连同TIPE2序列一起克隆入p... 展开更多; 关键词免疫调节因子 TIPE2 慢病毒病毒包装; 在线阅读下载PDF 职称材料

OCILRP2-Fc抑制小鼠骨髓来源的树突状细胞分化成熟: 6; 作者柴立辉李伟华 +3 位作者杨菲刘广超马远方吴素霞《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期917-921,共5页; 目的:采用OCILRP2胞外段蛋白OCILRP2-Fc阻断OCILRP2受体,探讨OCILRP2对小鼠树突状细胞发育成熟的影响及其机制。方法:分离培养小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),荧光定量RT-PCR和流式细胞术分析OCILRP2在不成熟BMDC和LPS诱导的成熟BMDC... 展开更多; 关键词破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2 树突状细胞脂多糖核因子ΚB; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备被引量：1: 1; 作者吴素霞柴立辉王战争刘广超田文志马远方; 机构抗体药物河南省工程实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1374-1377,1392,共5页; 基金国家自然科学基金面上项目(No.30972687)资助; 文摘目的:为了获得真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和OCILRP2特异性抗体,用于OCILRP2生物学功能的进一步研究。方法:构建了融合人IgG Fc段的小鼠OCILRP2真核表达载体pIg-CD5-OCILRP2,将pIg-CD5-OCILRP2转染CHO细胞,G418筛选稳定表达细胞株;Protein A亲和层析从CHO细胞培养上清中纯化重组蛋白OCILRP2-Fc并免疫家兔制备OCILRP2多克隆抗体。ELISA检测抗血清和多克隆抗体的效价,Western blot验证多克隆抗体的特异性,并应用该抗体检测OCILRP2在树突状细胞(Dendritic cells,DC)中的表达。结果:ELISA结果表明OCILRP2-Fc稳定表达细胞株经过多次传代培养后仍然具有较高的蛋白表达水平;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示纯化后的蛋白只有单一条带出现,且该条带可以被抗人IgG检测到;重组蛋白OCILRP2-Fc免疫家兔获得的抗血清和纯化后得到的OCILRP2多克隆抗体效价分别为1∶1 280 000和1∶320 000,Western blot证明该抗体可以和免疫原OCILRP2-Fc及NIH/3T3细胞中表达的OCILRP2特异性结合。应用该抗体检测OCILRP2在DC的表达发现OCILRP2在成熟DC的表达明显高于不成熟DC。结论:获得了真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和高效价的OCILRP2特异性抗体,为进一步研究OCILRP2在免疫应答中的功能奠定了基础。; 关键词 C型凝集素相关蛋白真核表达多克隆抗体树突状细胞; Keywords C-type lectin-related protein Eukaryotic expression Polyclonal antibody Dendritic cell; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名FILIP-1L蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1: 2; 作者都景芳顿国庆张舒曼褚留杰李淑莲胡延忠马远方; 机构抗体药物河南省工程实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期832-837,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30971508); 文摘目的:表达、纯化GST-FILIP-1L融合蛋白,制备FILIP-1L多克隆抗体。方法:pGEX-4T3-FILIP-1L重组质粒转化E.coliBL21大肠杆菌,IPTG诱导GST-FILIP-1L融合蛋白表达,Glutathion Sepharse 4B纯化GST-FILIP-1L融合蛋白。将纯化的GST-FILIP-1L融合蛋白免疫新西兰大耳白兔,制备FILIP-1L多克隆抗体,用ELISA方法检测多克隆抗体效价,Western blot检测多克隆抗体与FILIP-1L蛋白、细胞转染FILIP-1L蛋白及细胞FILIP-1L蛋白的结合能力。结果:在大肠杆菌中诱导出高表达的FILIP-1L融合蛋白,经Glutathion Sepharse 4B纯化后免疫新西兰大耳白兔,获得了高效价的抗FILIP-1L多克隆抗体,亲和层析获得纯度较高的多克隆抗体,WB检测显示多克隆抗体能够与FILIP-1L蛋白、293细胞转染FILIP-1L蛋白及肝癌细胞FILIP-1L蛋白结合。结论:成功表达、纯化了GST-FILIP-1L融合蛋白,制备了高效价的抗FILIP-1L多克隆抗体,为研究FILIP-1L蛋白生物学功能提供了有用的实验工具。; 关键词 FILIP-1L 融合蛋白多克隆抗体; Keywords FILIP-1L Filamin A interacting protein 1-like Fusion protein Polyclonal antibody; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Foxp3对肺癌细胞增殖及成瘤的影响被引量：5: 3; 作者刘瑞敏晁玮霞王少龙王明丽贾彩云白慧玲马远方; 机构河南大学细胞与分子免疫学重点实验室抗体药物河南省工程实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1481-1484,共4页; 基金河南省卫生厅2010医学科技攻关计划(2010003083); 文摘目的:研究转录因子Foxp3在肺癌细胞中的高表达对肺癌细胞增殖及成瘤的影响。方法:利用脂质体转染法建立稳定高表达Foxp3的NCIH-h Foxp3肺癌细胞株。MTT法观测NCIH-h Foxp3及对照细胞的增殖。ELISA法检测NCIHh Foxp3及对照细胞IL-8、IL-10的分泌。建立移植瘤小鼠模型,观察成瘤情况。结果:成功建立高表达Foxp3的NCIH-h Foxp3肺癌细胞株;与阴性对照相比,NCIH-h Foxp3细胞增殖减慢,但成瘤能力强。NCIH-h Foxp3细胞培养上清IL-8表达量减低,IL-10表达量升高。结论:高表达Foxp3的肺癌细胞可能通过表达细胞因子改变局部生长的微环境,逃逸免疫监视,而促进肿瘤细胞的成瘤和发展。; 关键词 FOXP3 高表达增殖成瘤; Keywords Foxp3 Overexpression Proliferation Tumorgeneity; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响被引量：1: 4; 作者娄强谢盼盼崔秀坤马远方胡延忠; 机构河南大学医学院医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1699-1703,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.U1404826) 河南省教育厅项目(No.14B310015) 河南大学基本科研业务费科研专项(青年科研人才种子基金); 文摘目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b/K65R突变质粒的细胞株;Western blotting检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达;Western blotting及real-time PCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果:阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL-blast-HAHsf4b/K65R构建成功。K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达,但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。; 关键词热休克因子4b 晶状体上皮细胞热休克蛋白点突变; Keywords Heat shock factor 4b Lens epithelial cells Heat shock proteins Site-mutagenesis; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名免疫调节因子TIPE2慢病毒载体的构建及病毒包装: 5; 作者王耀辉娄强陈九格张军马远方; 机构河南大学医学院抗体药物河南省工程实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1077-1079,共3页; 基金国家自然科学基金资助(30972687); 文摘目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒载体的构建及病毒包装。方法:首先构建带有3×FLAG标签的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2质粒,确认表达后再将标签连同TIPE2序列一起克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro慢病毒表达载体,然后与pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞并收获上清,进一步用含病毒颗粒的上清感染PLC/PRF/5及HEK293T细胞,Western blot检测感染后TIPE2蛋白表达情况。结果:pCDNA3.1-3×FLAGTIPE2及pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-TIPE2质粒构建成功,并能最终产出具有感染性的病毒颗粒。结论:成功构建了TIPE2慢病毒载体并获得具有感染性的病毒颗粒,为进一步研究TIPE2功能提供了有力的支持。; 关键词免疫调节因子 TIPE2 慢病毒病毒包装; Keywords Immune regulator TIPE2 Lentivirus Virus package; 分类号 R392-3 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名OCILRP2-Fc抑制小鼠骨髓来源的树突状细胞分化成熟: 6; 作者柴立辉李伟华杨菲刘广超马远方吴素霞; 机构抗体药物河南省工程实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期917-921,共5页; 基金国家自然科学基金面上项目(No.30972687)资助; 文摘目的:采用OCILRP2胞外段蛋白OCILRP2-Fc阻断OCILRP2受体,探讨OCILRP2对小鼠树突状细胞发育成熟的影响及其机制。方法:分离培养小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),荧光定量RT-PCR和流式细胞术分析OCILRP2在不成熟BMDC和LPS诱导的成熟BMDC的表达差异;流式细胞术分析OCILRP2-Fc对BMDC细胞表面标志分子的表达以及对BMDC抗原摄取能力的影响;ELISA检测培养上清中细胞因子的浓度,分析OCILRP2-Fc对BMDC分泌炎性细胞因子的影响;Western blot检测转录因子NF-κB的活化,分析OCILRP2-Fc影响BMDC分化成熟的分子机制。结果:荧光定量RT-PCR和流式细胞术结果均表明LPS可以显著上调OCILRP2在BMDC的表达(P<0.05);与对照组相比,OCILRP2-Fc可以明显抑制MHCⅡ类分子及共刺激分子CD80在LPS诱导的成熟BMDC的表达;和成熟BMDC相比,OCILRP2-Fc组BMDC经LPS诱导24 h后仍然具有较强的抗原吞噬能力;而且,OCILRP2-Fc组BMDC培养上清中炎性细胞因子IL-6、IL-12、TNF-α的浓度明显低于对照组(P<0.05)。Western blot结果表明OCILRP2-Fc抑制了LPS诱导的I-κB降解和NF-κB p65的磷酸化。结论:OCILRP2-Fc阻断OCILRP2受体信号,通过抑制LPS诱导的NF-κB活化影响小鼠BMDC分化成熟。提示OCILRP2受体在树突状细胞的分化成熟过程中具有促进作用。; 关键词破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2 树突状细胞脂多糖核因子ΚB; Keywords Osteoclast inhibitory lectin related protein 2 Dendritic cells Lipopolysaccharide NF-κB; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备	吴素霞柴立辉王战争刘广超田文志马远方	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	FILIP-1L蛋白的原核表达及多克隆抗体制备	都景芳顿国庆张舒曼褚留杰李淑莲胡延忠马远方	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Foxp3对肺癌细胞增殖及成瘤的影响	刘瑞敏晁玮霞王少龙王明丽贾彩云白慧玲马远方	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响	娄强谢盼盼崔秀坤马远方胡延忠	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	免疫调节因子TIPE2慢病毒载体的构建及病毒包装	王耀辉娄强陈九格张军马远方	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	OCILRP2-Fc抑制小鼠骨髓来源的树突状细胞分化成熟	柴立辉李伟华杨菲刘广超马远方吴素霞	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料