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基因工程改造与中国仓鼠卵巢细胞凋亡
被引量：
1
1
作者
张存超
寇庚
王皓
《化学与生物工程》
CAS
2014年第12期1-3,8,共4页
中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是表达重组单克隆抗体常用的工程细胞。在细胞培养过程中,凋亡是限制重组蛋白产量提高的重要因素之一。对CHO细胞进行基因工程改造是抑制细胞凋亡的重要途径。主要从细胞凋亡信号途径、细胞信号通路以及microRNA...
中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是表达重组单克隆抗体常用的工程细胞。在细胞培养过程中,凋亡是限制重组蛋白产量提高的重要因素之一。对CHO细胞进行基因工程改造是抑制细胞凋亡的重要途径。主要从细胞凋亡信号途径、细胞信号通路以及microRNA等方面综述了运用基因工程手段对CHO细胞凋亡改造的进展,并探讨了潜在的基因工程靶点。
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关键词
凋亡
基因工程
MICRORNA
中国仓鼠卵巢细胞
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职称材料
重组内肽酶AspN的原核表达纯化和活性鉴定
2
作者
郑娟
郭怀祖
+5 位作者
李晶
段树燕
赵自叶
张大鹏
郭尚敬
王皓
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期186-192,共7页
蛋白内肽酶AspN是一种锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸的N端肽键,广泛应用于蛋白的多肽制备及质量肽图谱鉴定。目前内肽酶AspN来源于细菌分泌,产量低,制备困难,成本高,极大地限制了该酶的应用。将脑膜脓毒性黄杆菌分泌的蛋白内肽酶...
蛋白内肽酶AspN是一种锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸的N端肽键,广泛应用于蛋白的多肽制备及质量肽图谱鉴定。目前内肽酶AspN来源于细菌分泌,产量低,制备困难,成本高,极大地限制了该酶的应用。将脑膜脓毒性黄杆菌分泌的蛋白内肽酶Asp N所对应的基因克隆入表达载体p ET32a,导入E.coli BL21(DE3),首次运用原核表达系统进行可溶性融合表达,亲和层析对重组蛋白进行纯化。用HPLC、SDS-PAGE和荧光底物Anthranilyl-Ala-Phe-Ala-Phe-Asp-Val-Phe(NO2)-Tyr-Asp对重组酶进行酶活鉴定。结果表明重组的内肽酶Asp N具有与标准品基本一致的酶切活性,能够较好地应用于生物和制药领域。
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关键词
重组内肽酶AspN
原核表达
纯化
活性鉴定
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职称材料
题名
基因工程改造与中国仓鼠卵巢细胞凋亡
被引量：
1
1
作者
张存超
寇庚
王皓
机构
上海张江生物技术有限公司
抗体药物与靶向治疗国家重点实验室
第二军医大学肿瘤研究所
出处
《化学与生物工程》
CAS
2014年第12期1-3,8,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2014AA021004)
文摘
中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是表达重组单克隆抗体常用的工程细胞。在细胞培养过程中,凋亡是限制重组蛋白产量提高的重要因素之一。对CHO细胞进行基因工程改造是抑制细胞凋亡的重要途径。主要从细胞凋亡信号途径、细胞信号通路以及microRNA等方面综述了运用基因工程手段对CHO细胞凋亡改造的进展,并探讨了潜在的基因工程靶点。
关键词
凋亡
基因工程
MICRORNA
中国仓鼠卵巢细胞
Keywords
apoptosis
genetic engineering
microRNA
Chinese hamster ovary cells
分类号
Q813.110 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
重组内肽酶AspN的原核表达纯化和活性鉴定
2
作者
郑娟
郭怀祖
李晶
段树燕
赵自叶
张大鹏
郭尚敬
王皓
机构
聊城大学药学院
抗体药物与靶向治疗国家重点实验室
第二军医大学肿瘤研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期186-192,共7页
文摘
蛋白内肽酶AspN是一种锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸的N端肽键,广泛应用于蛋白的多肽制备及质量肽图谱鉴定。目前内肽酶AspN来源于细菌分泌,产量低,制备困难,成本高,极大地限制了该酶的应用。将脑膜脓毒性黄杆菌分泌的蛋白内肽酶Asp N所对应的基因克隆入表达载体p ET32a,导入E.coli BL21(DE3),首次运用原核表达系统进行可溶性融合表达,亲和层析对重组蛋白进行纯化。用HPLC、SDS-PAGE和荧光底物Anthranilyl-Ala-Phe-Ala-Phe-Asp-Val-Phe(NO2)-Tyr-Asp对重组酶进行酶活鉴定。结果表明重组的内肽酶Asp N具有与标准品基本一致的酶切活性,能够较好地应用于生物和制药领域。
关键词
重组内肽酶AspN
原核表达
纯化
活性鉴定
Keywords
recombinant endoproteinase AspN
prokaryotic expression
purification
activity assay
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
基因工程改造与中国仓鼠卵巢细胞凋亡
张存超
寇庚
王皓
《化学与生物工程》
CAS
2014
1
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职称材料
2
重组内肽酶AspN的原核表达纯化和活性鉴定
郑娟
郭怀祖
李晶
段树燕
赵自叶
张大鹏
郭尚敬
王皓
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
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