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基于Bcl-2/Beclin-1复合体探讨黄连素对脑缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用 被引量：14
1
作者 丁实 赵学荣 +5 位作者 李宝群 赵亮 周健 毕红东 庞冲 郭娜娜 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期651-657,共7页
目的基于B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)/Beclin-1复合体研究黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法 SPF级SD大鼠108只,按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、模型组(I/R)、黄连素低、中、高剂量组(BBR-L、BBR-M、BBR-H),... 目的基于B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)/Beclin-1复合体研究黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法 SPF级SD大鼠108只,按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、模型组(I/R)、黄连素低、中、高剂量组(BBR-L、BBR-M、BBR-H),尼莫地平预处理组(NMDP组),造模后对大鼠进行神经功能评分;TTC染色观察大鼠脑梗死面积;HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;RT-PCR法检测脑组织中Bcl-2、caspase-3、Bax mRNA的表达;Western blot检测脑皮质中Bcl-2、caspase-3、Bax、Beclin-1蛋白表达水平。结果 I/R组 6、24、48 h3个时间点的神经功能评分均显著高于Sham组,24 h的神经功能评分最高;与模型组比较,BBR处理组和NMDP组24、48 h的神经功能缺损评分显著降低( P<0.05);与Sham组比较,I/R组梗死面积百分比、细胞坏死比例显著升高,与I/R组比较,BBR治疗组和NMDP组显著减少( P<0.05);与Sham组比较,I/R组Bcl-2、caspase-3、Bax mRNA和蛋白水平均显著升高;与I/R组比较,BBR治疗组和NMDP组Bcl-2 mRNA和蛋白水平均显著升高,caspase-3、Bax mRNA和蛋白水平均显著降低;与Sham组比较,I/R组Bcl-2/Bax比值显著降低;与I/R组比较,各治疗组Bcl-2/Bax比值均显著上升,且呈剂量依赖性升高;与Sham组比较,I/R组Beclin-1蛋白水平及Bcl-2/Beclin-1比值升高( P<0.05);与I/R组比较,BBR组和NMDP组Beclin-1蛋白水平显著升高( P<0.05),Bcl-2/Beclin-1比值均降低,且BBR-M组、BBR-H组、NMDP组Bcl-2/Beclin-1无显著差异。结论黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,其可通过调节自噬蛋白与凋亡蛋白的水平,使自噬达到合适水平,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 SD大鼠 BCL-2 BECLIN-1 脑缺血再灌注
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圣草酚通过调控c-Myc/AR轴对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2
2
作者 刘汉成 李慧明 +3 位作者 张杰 孟庆来 丁实 马立辉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第6期891-896,共6页
目的 探究圣草酚(Eri)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法 采用不同浓度Eri干预MDA-MB-231细胞后,MTT法检测细胞增殖水平;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blo... 目的 探究圣草酚(Eri)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法 采用不同浓度Eri干预MDA-MB-231细胞后,MTT法检测细胞增殖水平;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blot检测细胞中活性半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞髓细胞瘤(c-Myc)、雄激素受体(AR)蛋白表达水平;MDA-MB-231细胞转染si-c-Myc,再联合50μmol/L Eri处理,MTT法检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平;qRT-PCR检测细胞中c-Myc mRNA表达水平;Western blot检测细胞中c-Myc和AR蛋白表达水平。结果 Eri可抑制MDA-MB-231细胞增殖活性,并呈现浓度和时间依赖性。不同浓度Eri处理可降低MDA-MB-231细胞克隆形成能力,促进细胞凋亡,上调Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达水平,下调Bcl-2、c-Myc、AR蛋白表达水平。c-Myc基因沉默可抑制MDA-MB-231细胞增殖活性,促进细胞凋亡,下调c-Myc和AR蛋白表达水平。50μmol/L Eri联合处理不能增强c-Myc基因沉默对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用和凋亡的促进作用。结论 Eri可抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与调控c-Myc/AR轴有关。 展开更多
关键词 圣草酚 三阴性乳腺癌 增殖 凋亡 C-MYC 雄激素受体
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新生SD大鼠原代海马组织中神经干细胞的培养和鉴定 被引量：2
3
作者 张玲娣 赵亮 +2 位作者 由涌 许倩 杨振军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期795-801,共7页
目的:观察原代海马组织中神经干细胞(NSCs)的形态表现和生长规律,为NSCs提取和培养提供依据。方法:提取新生SD大鼠海马组织中NSCs,观察海马组织中NSCs形态表现,流式细胞术检测海马组织中NSCs纯度,免疫荧光法检测NSCs中Nestin和EdU蛋白表... 目的:观察原代海马组织中神经干细胞(NSCs)的形态表现和生长规律,为NSCs提取和培养提供依据。方法:提取新生SD大鼠海马组织中NSCs,观察海马组织中NSCs形态表现,流式细胞术检测海马组织中NSCs纯度,免疫荧光法检测NSCs中Nestin和EdU蛋白表达,细胞计数法和CCK-8法检测NSCs增殖活性。结果:培养第0天海马组织中NSCs以单细胞形式悬浮于培养基中;培养第2天海马组织中NSCs开始聚集成大小不等和形态不规则的细胞团块,悬浮生长;培养第8天神经球大小不一,呈圆形或椭圆形,边界清晰,无明显突起。培养第8天NSCs纯度为76.50%~85.40%。NSCs细胞质中Nestin阳性表达呈绿色,细胞核中EdU阳性表达呈红色,神经球为Nestin与EdU共染细胞构成。培养5~11 d,NSCs处于对数生长期,细胞增殖活性较高。结论:NSCs增殖能力强,培养至第8天时纯度较高,体外培养5~11 d时细胞增殖活性较高。 展开更多
关键词 神经干细胞 海马组织 增殖活性 生长曲线 免疫荧光
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