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LAMP法检测儿童粪便中肠道腺病毒的建立 被引量:2
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作者 赵娜 刘金霞 孙殿兴 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期124-127,共4页
目的通过应用环介导等温扩增(LAMP)建立一种快速、简便的可视化检测儿童肠道腺病毒核酸的方法。方法登录GenBank网站下载腺病毒40和41基因型的六邻体序列,根据该区段的保守序列设计4条LAMP引物。将反应体系加入EP管,在恒温条件(65℃)扩... 目的通过应用环介导等温扩增(LAMP)建立一种快速、简便的可视化检测儿童肠道腺病毒核酸的方法。方法登录GenBank网站下载腺病毒40和41基因型的六邻体序列,根据该区段的保守序列设计4条LAMP引物。将反应体系加入EP管,在恒温条件(65℃)扩增60min后,再以凝胶电泳和钙黄绿素染色评价LAMP法的特异性和灵敏度,并和PCR法的结果相比较。最后,同时用LAMP和PCR法对40份可疑临床样本进行检测,应用卡方检验进行统计学分析。结果 LAMP法能准确地使腺病毒40和41型得到扩增,酶切结果也正确,显示了LAMP法较好的特异性。LAMP的灵敏度比PCR高约10倍。经过对40份临床样本的检测,LAMP与PCR均没有发生非特异扩增,LAMP法和PCR法的一致性为92.5%(P>0.05)且LAMP法没有漏检阳性样本。另外,使用钙黄绿素染色的方法更好地显示了产物检测的可视性和简便性。结论该研究初步建立了快速、简便、可视化检测肠道腺病毒的LAMP技术,在基层医疗机构有一定的实用价值。 展开更多
关键词 肠道腺病毒 环介导等温扩增(LAMP) 儿童
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慢性病晚期患者成为“失医者”的相关因素调查分析
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作者 苗光新 杨思熙 +1 位作者 高健 刘金霞 《医学与哲学》 2019年第21期71-74,共4页
慢性病晚期患者虽然医学上没有较好的治愈方法,但是仍然希望拥有各种必要的治疗和照护需求,延续生命,提高生活质量。然而,现有医疗模式和医疗制度对慢性病晚期患者没有给予足够的关注,家人、社区、单位同事也同时漠视他们的生命,成为事... 慢性病晚期患者虽然医学上没有较好的治愈方法,但是仍然希望拥有各种必要的治疗和照护需求,延续生命,提高生活质量。然而,现有医疗模式和医疗制度对慢性病晚期患者没有给予足够的关注,家人、社区、单位同事也同时漠视他们的生命,成为事实上的“失医者”。为此,分析了160例处于“失医状态”患者的基本情况、所患疾病及其并发症,提出解决策略如下,培养专业医护人员和管理人才,提高罹患慢性病晚期患者的医护水平,预防慢性病的发生和病情进展,完善养老服务措施,摆脱“失医状态”。 展开更多
关键词 慢性病 失医者 老年人
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改良的环介导等温扩增技术在羊布鲁菌病快速诊断中的应用
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作者 于广江 张可欣 +2 位作者 郭文平 刘金霞 郭亚春 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期101-107,共7页
布鲁菌病严重威胁人类健康和畜牧业生产的常见人畜共患病。建立改良的LAMP,对防控布鲁菌病的传播具有重要意义。选择羊布鲁菌标准菌株DNA保守序列,设计LAMP引物;建立并优化LAMP快速检测体系;通过倍比稀释法等完成灵敏度和特异性实验;选... 布鲁菌病严重威胁人类健康和畜牧业生产的常见人畜共患病。建立改良的LAMP,对防控布鲁菌病的传播具有重要意义。选择羊布鲁菌标准菌株DNA保守序列,设计LAMP引物;建立并优化LAMP快速检测体系;通过倍比稀释法等完成灵敏度和特异性实验;选择可疑布鲁菌感染羊血液样本200例,分别进行LAMP、PCR和RBPT检测,完成一致性检验。LAMP反应体系中MgSO_(4)为8 mmol/L,甜菜碱为0.8 mmol/L,钙黄绿素为5 mmol/L,MnCl_(2)为10 mmol/L;布鲁菌均呈现绿色,5种阴性菌株均为橙色;随着模板稀释度的逐渐增大,扩增开始时间逐渐延长,检测极限为10 copies/μL,与凝胶电泳、PCR结果一致;与PCR比较,羊血液标本LAMP阳性率基本一致,无统计学意义(P>0.05);与RBPT比较,LAMP阳性率显著升高,有统计学意义(P<0.05);PCR和LAMP检测一致性较好(Kappa=0.987,P>0.7)。因此,本研究为布鲁菌病提供了特异性好,灵敏度高检测试剂盒。 展开更多
关键词 羊布鲁菌病 环介导等温扩增技术 特异性诊断 诊断试剂盒
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