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基于DNA条形码技术的中药材木通种子鉴定研究 被引量:11
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作者 穆威杉 于娟 +5 位作者 赵晴 史萌萌 金钺 谢红波 刘金欣 石林春 《世界中医药》 CAS 2020年第9期1271-1274,共4页
目的:利用核糖体内部转录间隔区2(ITS2)及叶绿体psbA-trnH序列对中药材木通种子进行鉴定,建立其种子DNA条形码鉴定方法,保障中药材木通种子的准确性。方法:收集木通种子样品15份,通过提取DNA、聚合酶链式反应(PCR)扩增、双向测序,获取其... 目的:利用核糖体内部转录间隔区2(ITS2)及叶绿体psbA-trnH序列对中药材木通种子进行鉴定,建立其种子DNA条形码鉴定方法,保障中药材木通种子的准确性。方法:收集木通种子样品15份,通过提取DNA、聚合酶链式反应(PCR)扩增、双向测序,获取其ITS2及psbA-trnH序列。基于BLAST分析、邻接(NJ)系统发育树构建进行物种鉴定分析。结果:共获得4种类型ITS2序列,2种类型psbA-trnH序列。ITS2及psbA-trnH均可区分木通与川木通、关木通,但ITS2序列可以区分木通与三叶木通、白木通,psbA-trnH序列无法区分木通与三叶木通、白木通。结论:DNA条形码技术可用于木通种子及其易混伪品的鉴定。 展开更多
关键词 木通 种子 DNA条形码 ITS2 PSBA-TRNH 鉴定 混伪品 序列分析
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动物药材DNA提取方法优化和市售药材DNA条形码鉴定研究 被引量:5
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作者 刘旭朝 刘金欣 +3 位作者 孙伟 宋经元 石林春 孙稚颖 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第4期602-609,共8页
目的:对动物药材DNA提取方法进行优化,利用优化方法提取市售动物药材DNA并进行DNA条形码鉴定。方法:基于SDS法DNA提取原理,比较裂解液中不同EDTA浓度(0.025、0.25、0.5 mol·L^(-1))、是否含Na Cl和Triton X-100等因素对不同用药部... 目的:对动物药材DNA提取方法进行优化,利用优化方法提取市售动物药材DNA并进行DNA条形码鉴定。方法:基于SDS法DNA提取原理,比较裂解液中不同EDTA浓度(0.025、0.25、0.5 mol·L^(-1))、是否含Na Cl和Triton X-100等因素对不同用药部位动物药材DNA提取质量的影响,筛选得到最佳裂解液配方;使用优化的裂解液配方提取121份市售动物药材DNA并进行基原物种鉴定。结果:裂解液配方为1%SDS、0.03 mol·L^(-1)Tris-HCl、0.25 mol·L^(-1)EDTA、0.2 mol·L^(-1)Na Cl对不同用药部位动物药材DNA提取效果最佳,并可实现对蝉蜕等提取困难样本DNA的提取;利用优化裂解液提取的121份市售动物药材DNA满足中药材分子鉴定后续实验要求,所有市售动物药材均可准确鉴定到基原物种。结论:本研究优化的裂解液配方可用于除壳类、分泌物类、加工品外不同用药部位动物药材的DNA提取,为动物药材分子鉴定提供了技术支持。 展开更多
关键词 动物药材 DNA条形码 DNA提取 裂解液 EDTA
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山楂叶中4种黄酮提取工艺的优化 被引量:5
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作者 杜义龙 田孟尧 +3 位作者 李艳荣 洪霞 赵胜男 潘海峰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3283-3286,共4页
目的 优化山楂叶中4种黄酮提取工艺。方法 在单因素试验基础上,以料液比、甲醇体积分数、超声时间为影响因素,牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、异槲皮素总提取率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果 最佳条件... 目的 优化山楂叶中4种黄酮提取工艺。方法 在单因素试验基础上,以料液比、甲醇体积分数、超声时间为影响因素,牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、异槲皮素总提取率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果 最佳条件参数为料液比1∶50,甲醇体积分数60%,超声时间30 min,总提取率为1.130%。结论 该方法稳定可靠,可为山楂叶质量控制研究及功能成分开发提供依据。 展开更多
关键词 山楂叶 牡荆素葡萄糖苷 牡荆素鼠李糖苷 金丝桃苷 异槲皮素 提取工艺 Box-Behnken响应面法
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山楂叶标准汤剂制备工艺优化 被引量:4
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作者 杜义龙 高静云 +4 位作者 刘文通 李艳荣 高晗 沈莹 潘海峰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期3724-3728,共5页
目的优化山楂叶标准汤剂制备工艺。方法在单因素试验基础上,以浸泡时间、加水量、煎煮时间为影响因素,总黄酮、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素葡萄糖苷、异槲皮素提取率及出膏率的综合评分为评价指标,层次分析法计算权重系数,Box-Beh... 目的优化山楂叶标准汤剂制备工艺。方法在单因素试验基础上,以浸泡时间、加水量、煎煮时间为影响因素,总黄酮、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、牡荆素葡萄糖苷、异槲皮素提取率及出膏率的综合评分为评价指标,层次分析法计算权重系数,Box-Behnken响应面法优化制备工艺。结果最佳工艺为浸泡30 min后煎煮2次,一煎加16倍量水煎煮55 min,二煎加14倍量水煎煮45 min,综合评分为4.07分。结论该方法简便可靠,可为山楂叶标准汤剂临床应用及其配方颗粒开发提供理论依据。 展开更多
关键词 山楂叶 标准汤剂 制备工艺 层次分析法 Box-Behnken响应面法
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北苍术根腐病植株根际土壤真菌群落多样性分析 被引量:14
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作者 高鑫媛 赵红玲 +4 位作者 白茹玥 李哲 魏金月 赵蓝青青 赵春颖 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第4期812-821,共10页
【目的】分析根腐病北苍术植株根际土壤真菌群落的多样性,为探索北苍术根腐病的发病机理和防治工作提供参考。【方法】利用Illumina HiSeq高通量测序技术,分析北苍术根腐病植株与健康植株根际土壤真菌群落结构特征,并对植株根际土壤理... 【目的】分析根腐病北苍术植株根际土壤真菌群落的多样性,为探索北苍术根腐病的发病机理和防治工作提供参考。【方法】利用Illumina HiSeq高通量测序技术,分析北苍术根腐病植株与健康植株根际土壤真菌群落结构特征,并对植株根际土壤理化性质与酶活性进行分析。【结果】患根腐病北苍术植株根际土壤真菌较健康植株总量和多样性显著降低。患根腐病北苍术植株根际土壤中真菌菌群在门水平的丰度相对健康土壤增高的是子囊菌门(Ascomycota),减少的是担子菌门(Basidiomycota)、壶菌门(Chytridiomycota);在目水平增多的是肉座菌目(Hypocreales)、假球壳目(Pleosporales)、小丛壳目(Glomerellales)等,减少的是被孢霉目(Mortierellales)、粪壳菌目(Sordariales)、散囊菌目(Eurotiales)、刺盾炱目(Chaetothyriales)等;在属水平上增多的是镰刀菌属(Fusarium),赤霉属(Gibberella)等,减少的是被孢霉属(Mortierella)、亚隔孢壳属(Didymella)、毛壳属(Cheatomium)及木霉属(Trichoderma)等。统计学分析表明,患根腐病北苍术植株根际土壤的pH显著低于健康北苍术植株根际土壤,速效N、速效P、速效K含量显著增高。且不同处理的北苍术植株根际土壤的酶活性检测显示根腐病北苍术植株根际土壤的土壤脲酶、土壤蔗糖酶及土壤碱性磷酸酶的酶活性显著高于健康植株的根际土壤。【结论】常见生防菌毛壳属(Cheatomium)在根腐病北苍术植株根际土壤中占比较少,Schizotheciumj菌在健康北苍术植株根际土壤中占比丰度更高。致病菌镰刀菌(Fusarium)在根腐病北苍术植株根际土壤中占比多。北苍术根腐病的成因可能与其根际真菌丰度降低、土壤的理化性质及酶活显著变化有关,但差异菌群的功能多样性及与北苍术植株根腐病病原菌的互作关系尚待验证。 展开更多
关键词 北苍术 根际土壤 高通量测序 真菌 理化性质 土壤酶活
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