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成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养
被引量：
14
1
作者
李如君
龚开政
张振刚
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期67-71,共5页
目的探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法。方法采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞。波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴...
目的探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法。方法采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞。波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;倒置相差显微镜观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;CCK-8法测定细胞增殖能力、Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后细胞SMAD家族成员2/3(Smad2/3)蛋白及磷酸化水平。结果差速贴壁后在相差显微镜下可见大量球形贴壁细胞;3 d后细胞逐渐由圆形伸展为长梭形并迅速增殖,分裂象多见;5 d后细胞数量显著增多,完全汇合无空隙;细胞生长曲线近似"S"形。波形蛋白阳性率可达95%。CCK-8法显示在第3~5天细胞增殖能力最显著,给予第2代心脏成纤维细胞TGF-β1刺激显示Smad2/3蛋白磷酸化水平明显增加。结论建立了一种快速、经济、有效获取成年小鼠心脏成纤维细胞的方法。
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关键词
成年小鼠
心脏成纤维细胞
原代培养
细胞鉴定
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职称材料
去泛素化酶BRCC36功能的研究进展
被引量：
3
2
作者
李如君
龚开政
张振刚
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1713-1716,共4页
去泛素化酶是自然界中广泛存在于真核细胞内的一种生物活性酶,它与泛素化酶的作用相反,可将泛素或泛素链从底物上去除。BRCC36（BRCA1-BRCA2-containing complex subunit 36）是2003年发现的去泛素化酶家族新成员,属于JAMM（Jab1/MPN/Mo...
去泛素化酶是自然界中广泛存在于真核细胞内的一种生物活性酶,它与泛素化酶的作用相反,可将泛素或泛素链从底物上去除。BRCC36（BRCA1-BRCA2-containing complex subunit 36）是2003年发现的去泛素化酶家族新成员,属于JAMM（Jab1/MPN/Mov34 metalloenzyme）/MPN＋（Mpr1/Pad1 Nterminal）亚类,参于DNA损伤修复、细胞信号转导及细胞周期控制等多种细胞活动，在肿瘤发生、血管生成、抗心肌损伤过程中均发挥重要作用。
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关键词
BRCC36蛋白
泛素化
DNA损伤修复
肿瘤
心脏疾病
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职称材料
己酮可可碱对扩张型心肌病大鼠心室重构和心功能的影响
被引量：
1
3
作者
赵培
宋国杰
+8 位作者
龚开政
吕晓蕾
董志峰
柳建
孙红光
於小萍
丁永玲
卜平
张振刚
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期697-700,共4页
目的:探讨己酮可可碱(PTX)对扩张型心肌病(DCM)大鼠心室重构和心功能的影响。方法:制备DCM模型,随机分为PTX组(n=10)和DCM组(n=10),同时设正常对照组(n=10)。PTX组给予PTX25mg.kg-1.d-1,ip,其它2组给予生理盐水ip,共30d。用ELISA法检测...
目的:探讨己酮可可碱(PTX)对扩张型心肌病(DCM)大鼠心室重构和心功能的影响。方法:制备DCM模型,随机分为PTX组(n=10)和DCM组(n=10),同时设正常对照组(n=10)。PTX组给予PTX25mg.kg-1.d-1,ip,其它2组给予生理盐水ip,共30d。用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10的水平,Masson染色和免疫组化染色评估心肌纤维化情况,并采用彩色超声心动图评估心脏的结构和功能。结果:PTX组血浆TNF-α和IL-6的水平显著低于DCM组(P<0.01和P<0.05),但高于正常对照组(P<0.01);而IL-10高于DCM组和正常对照组(P<0.05和P<0.01)。PTX组心肌纤维化程度较DCM组明显减轻,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值降至正常对照组水平。PTX组左室舒张末期内径低于DCM组(P<0.05),而左室射血分数显著高于DCM组(P<0.01)。结论:PTX对DCM大鼠血浆中细胞因子的表达有明显作用,并可延缓心室重构,改进心功能。
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关键词
己酮可可碱
心肌病
充血性
心力衰竭
充血性
心室复建
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职称材料
题名
成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养
被引量：
14
1
作者
李如君
龚开政
张振刚
机构
扬州大学第二临床医学院心血管内科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期67-71,共5页
基金
国家自然科学基金(81270197)
文摘
目的探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法。方法采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞。波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;倒置相差显微镜观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;CCK-8法测定细胞增殖能力、Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后细胞SMAD家族成员2/3(Smad2/3)蛋白及磷酸化水平。结果差速贴壁后在相差显微镜下可见大量球形贴壁细胞;3 d后细胞逐渐由圆形伸展为长梭形并迅速增殖,分裂象多见;5 d后细胞数量显著增多,完全汇合无空隙;细胞生长曲线近似"S"形。波形蛋白阳性率可达95%。CCK-8法显示在第3~5天细胞增殖能力最显著,给予第2代心脏成纤维细胞TGF-β1刺激显示Smad2/3蛋白磷酸化水平明显增加。结论建立了一种快速、经济、有效获取成年小鼠心脏成纤维细胞的方法。
关键词
成年小鼠
心脏成纤维细胞
原代培养
细胞鉴定
Keywords
adult mice
cardiac fibroblasts
primary culture
cell assay
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
去泛素化酶BRCC36功能的研究进展
被引量：
3
2
作者
李如君
龚开政
张振刚
机构
扬州大学第二临床医学院心血管内科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1713-1716,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81270197
No.81270198)
江苏省第四期科教兴卫工程项目基金资助项目(No.RC2011045)
文摘
去泛素化酶是自然界中广泛存在于真核细胞内的一种生物活性酶,它与泛素化酶的作用相反,可将泛素或泛素链从底物上去除。BRCC36（BRCA1-BRCA2-containing complex subunit 36）是2003年发现的去泛素化酶家族新成员,属于JAMM（Jab1/MPN/Mov34 metalloenzyme）/MPN＋（Mpr1/Pad1 Nterminal）亚类,参于DNA损伤修复、细胞信号转导及细胞周期控制等多种细胞活动，在肿瘤发生、血管生成、抗心肌损伤过程中均发挥重要作用。
关键词
BRCC36蛋白
泛素化
DNA损伤修复
肿瘤
心脏疾病
Keywords
BRCC36 protein
Ubiquitination
DNA damage repair
Neoplasms
Heart diseases
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
己酮可可碱对扩张型心肌病大鼠心室重构和心功能的影响
被引量：
1
3
作者
赵培
宋国杰
龚开政
吕晓蕾
董志峰
柳建
孙红光
於小萍
丁永玲
卜平
张振刚
机构
扬州大学第二临床医学院心血管内科
扬州大学
第二
临床
医学院
中心实验室
扬州大学
第二
临床
医学院
超声科
扬州大学
第二
临床
医学院
病理科
扬州大学
医学院
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期697-700,共4页
基金
江苏省卫生厅资助项目(NoH200356)
文摘
目的:探讨己酮可可碱(PTX)对扩张型心肌病(DCM)大鼠心室重构和心功能的影响。方法:制备DCM模型,随机分为PTX组(n=10)和DCM组(n=10),同时设正常对照组(n=10)。PTX组给予PTX25mg.kg-1.d-1,ip,其它2组给予生理盐水ip,共30d。用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10的水平,Masson染色和免疫组化染色评估心肌纤维化情况,并采用彩色超声心动图评估心脏的结构和功能。结果:PTX组血浆TNF-α和IL-6的水平显著低于DCM组(P<0.01和P<0.05),但高于正常对照组(P<0.01);而IL-10高于DCM组和正常对照组(P<0.05和P<0.01)。PTX组心肌纤维化程度较DCM组明显减轻,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值降至正常对照组水平。PTX组左室舒张末期内径低于DCM组(P<0.05),而左室射血分数显著高于DCM组(P<0.01)。结论:PTX对DCM大鼠血浆中细胞因子的表达有明显作用,并可延缓心室重构,改进心功能。
关键词
己酮可可碱
心肌病
充血性
心力衰竭
充血性
心室复建
Keywords
Pentoxifylline
Cardiomyopathy, congestive
Heart failure, congestive
Ventricular remodeling
分类号
R541.61 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养
李如君
龚开政
张振刚
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
14
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
去泛素化酶BRCC36功能的研究进展
李如君
龚开政
张振刚
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
己酮可可碱对扩张型心肌病大鼠心室重构和心功能的影响
赵培
宋国杰
龚开政
吕晓蕾
董志峰
柳建
孙红光
於小萍
丁永玲
卜平
张振刚
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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