-
题名鸡IRF7原核表达及多克隆抗体制备
被引量：2
- 1
-
-
作者
朱敏
王琳
许默儒
钱琨
邵红霞
叶建强
秦爱建
-
机构
扬州大学省部共建教育部禽类预防医学重点实验室
扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室
江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
江苏省人兽共患病学重点实验室
教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室
-
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2018年第4期76-81,共6页
-
基金
国家重点研发计划项目(2016YFD0500800
2017YFD0501100)
+2 种基金
国家科技基础性工作专项(2013FY113300-4)
国家自然基金项目(31472192)
江苏高校优势学科建设工程资助项目
-
文摘
为了制备鸡干扰素调节因子7(interferon regulatory fator 7,IRF7)抗体,本研究通过分离鸡的外周血淋巴细胞,抽提RNA并反转录获得鸡淋巴细胞c DNA,利用聚合酶链式反应扩增获得鸡IRF7基因(ch IRF7),将该基因克隆入原核表达载体p COLD-TF中,构建成p COLD-TF-ch IRF7原核表达质粒。将测序正确的表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,经0.25 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导20 h。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得高效表达,大小为107 k Da。切胶免疫BALB/c小鼠,制备鼠抗鸡IRF7多克隆抗体。激光共聚焦、Western blot实验结果显示,该抗鸡IRF7多克隆抗体能与真核质粒表达的ch IRF7蛋白发生特异性反应。该抗体的成功制备为进一步研究鸡IRF7的表达调控机制奠定了基础。
-
关键词
鸡
干扰素调节因子7
多抗制备
-
Keywords
Chicken
interferon regulatory factor 7
preparation
-
分类号
S852.42
[农业科学—基础兽医学]
-
