江苏省某鸡场CAstV、CIAV和REV感染情况的调查及分析 被引量：6

1

作者 姜泊宇 褚珊珊 +3 位作者 武宗仪 程晓薇 秦爱建 钱琨 《中国家禽》 北大核心 2017年第20期78-80,共3页

为研究鸡星状病毒(Chicken-origin astrovirus,CAst V)、鸡传染性贫血病毒(Chickeninfectious anemia virus,CIAV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)在江苏某鸡场的流行和混合感染情况,采集该鸡场1日龄雏鸡... 为研究鸡星状病毒(Chicken-origin astrovirus,CAst V)、鸡传染性贫血病毒(Chickeninfectious anemia virus,CIAV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)在江苏某鸡场的流行和混合感染情况,采集该鸡场1日龄雏鸡的脏器,应用PCR和RT-PCR检测CAst V、CIAV和REV的单独感染以及混合感染情况。结果显示:1日龄雏鸡CAst V、CIAV、REV单独检出率分别为45%、37.5%和0%,其中CAst V和CIAV双重感染率为25%。表明该鸡场CAst V阳性率较高,提示养禽企业需增强对该病毒的关注。 展开更多

关键词 CAstV CIAV REV 混合感染 鸡 江苏

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I群禽腺病毒江苏分离株(FAVI-JS)的分离鉴定 被引量：31

2

作者 何秀苗 张科 +3 位作者 秦爱建 金文杰 刘岳龙 陈溥言 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期42-45,共4页

通过形态学、致细胞病变和序列比较等对一株疑为I群禽腺病毒江苏分离株FAVI_JS进行了鉴定 ,试验结果表明 :该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称 ,直径为 70nm～ 80nm ;不具有凝集鸡、鸭、鹅红细胞的能力但可以凝集大鼠红细胞。在鸡胚肾... 通过形态学、致细胞病变和序列比较等对一株疑为I群禽腺病毒江苏分离株FAVI_JS进行了鉴定 ,试验结果表明 :该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称 ,直径为 70nm～ 80nm ;不具有凝集鸡、鸭、鹅红细胞的能力但可以凝集大鼠红细胞。在鸡胚肾细胞 (CEK)上可致细胞变圆 ,折光性增强等病变 ;通过PCR方法扩增出的FAVI_JSL、R、ITR三个片段 ,经过测序分析并与GenBank上发表的属于血清I型的CELO病毒、FAV_1、FAV_A和血清 8型的禽腺病毒 (FAV_8)全基因组的相应序列比较 ,FAVI_JS与I群禽腺病毒各毒株在三个片段上同源性都很高 ,其中与血清I型的同源性高达 96 %以上 ,在根据对遗传上具有重要意义的ITR序列绘制的遗传进行树分析 ,FAVI_JS与Ⅲ群禽腺病毒EDS、Y81G4株明显属于不同的分支 ,而与群禽腺病毒 ,特别是与血清I型的禽腺病毒更接近 ,这些结果证明 。 展开更多

关键词 Ⅰ群禽腺病毒 江苏分离株 FAVI-JS 分离 鉴定 形态学 序列分析

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动物腺病毒载体的研究进展 被引量：7

3

作者 何秀苗 秦爱建 《动物医学进展》 CSCD 2004年第2期22-24,共3页

腺病毒载体已成为近年来在基因治疗和重组疫苗研究方面的热点 ,文章较详细地叙述了腺病毒载体的构建基础、腺病毒载体的构建方法和各类动物腺病毒载体的研究现状以及腺病毒载体在应用时遇到的免疫学问题。并依据现有的腺病毒活载体的研... 腺病毒载体已成为近年来在基因治疗和重组疫苗研究方面的热点 ,文章较详细地叙述了腺病毒载体的构建基础、腺病毒载体的构建方法和各类动物腺病毒载体的研究现状以及腺病毒载体在应用时遇到的免疫学问题。并依据现有的腺病毒活载体的研究现状 ,讨论了动物腺病毒载体的发展趋势 ,提出在人类腺病毒载体应用遇到的免疫学问题上 。 展开更多

关键词 动物腺病毒载体 构建方法 发展趋势 免疫反应 基因载体 基因治疗 重组疫苗 临床应用

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变异型高致病性鹅源禽呼肠孤病毒的分离和鉴定 被引量：3

4

作者 钱金涵 朱亭帆 +3 位作者 王强 马陈淑 秦爱建 金文杰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期1-8,共8页

为了探究2020年江苏省扬州市江都区某鹅场发生的1起以肝脏和脾脏出血为典型病变特征的急性传染病病因,本试验采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测病死鹅肝脏和脾脏研磨液中禽呼肠孤病毒(ARV)的感染情况,将聚合酶链反应(PCR)阳性病... 为了探究2020年江苏省扬州市江都区某鹅场发生的1起以肝脏和脾脏出血为典型病变特征的急性传染病病因,本试验采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测病死鹅肝脏和脾脏研磨液中禽呼肠孤病毒(ARV)的感染情况,将聚合酶链反应(PCR)阳性病料进一步进行病毒的分离、鉴定、血凝性和致病性测定及遗传进化分析。结果显示,鸡胚中分离的病毒为ARV,将其命名为ARV-JSJD-2020;该病毒分离株接种鸡胚24 h后即可致其死亡;能感染Vero细胞产生细胞病变;没有血凝活性;鸡胚半数致死量(ELD50)为10^(-4.166)/0.2 mL;动物回归试验中雏鹅24 h即出现死亡现象,肝脏主要病变为局灶性坏死;σC基因序列分析显示,该分离株分类上属于水禽源呼肠孤病毒分支,但与目前疫苗株的亲缘关系较远。结果表明,本试验分离得到的ARV-JSJD-2020可以为后续鹅源ARV的防控和疫苗的研发提供参考依据。 展开更多

关键词 禽呼肠孤病毒(ARV) 分离 鉴定 σC基因

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禽源糖原合成激酶蛋白单克隆抗体的制备及应用

5

作者 翁贝 崔洲昊 +2 位作者 邵红霞 秦爱建 钱琨 《中国家禽》 北大核心 2024年第10期81-88,共8页

为制备针对家禽糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的单克隆抗体以及了解不同细胞中GSK-3β蛋白的基础表达量,试验利用原核表达纯化的GSK-3β蛋白免疫BALB/c小鼠,真核表达GSK-3β蛋白间接免疫荧光筛选杂交瘤阳性细胞,并利用单克隆抗体检测不同... 为制备针对家禽糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的单克隆抗体以及了解不同细胞中GSK-3β蛋白的基础表达量,试验利用原核表达纯化的GSK-3β蛋白免疫BALB/c小鼠,真核表达GSK-3β蛋白间接免疫荧光筛选杂交瘤阳性细胞,并利用单克隆抗体检测不同禽源细胞(LMH细胞、DF-1细胞、CEF细胞)中GSK-3β蛋白表达情况。结果显示:共获得3株单克隆抗体细胞株,分别命名为4C1、5B11和8G9,其中4C1和5B11仅能结合禽源细胞中的GSK-3β,而8G9和禽源以及人源的GSK-3β都能反应;单克隆抗体4C1介导的Western bolt显示在LMH细胞中GSK-3β蛋白丰度相对最高,而RT-qPCR显示其中LMH细胞中GSK-3β基因转录水平较低。研究成功制备了禽源GSK-3β的单克隆抗体,为深入研究家禽GSK-3β的生物学功能提供良好的生物材料。 展开更多

关键词 禽 GSK-3Β 原核表达 单克隆抗体 应用

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禽致病性大肠杆菌中四种抗氨基糖苷类药物耐药基因的分子流行病学调查 被引量：25

6

作者 金文杰 秦爱建 +4 位作者 郑志明 黄训良 邵红霞 刘岳龙 张永志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期401-404,共4页

氨基糖苷类药物曾经是临床最为常用而有效的抗生素,长期应用与不合理使用使得该药物效果不尽理想。本研究参照GenBank中耐药基因相关序列,设计引物,结果从禽源大肠杆菌基因组中扩增出4种抗氨基糖苷类药物基因aadA1、strA、strB、aph(3... 氨基糖苷类药物曾经是临床最为常用而有效的抗生素,长期应用与不合理使用使得该药物效果不尽理想。本研究参照GenBank中耐药基因相关序列,设计引物,结果从禽源大肠杆菌基因组中扩增出4种抗氨基糖苷类药物基因aadA1、strA、strB、aph(3′),经pGEX-T-easy和pET32a载体克隆和序列分析,证明扩增获得的基因序列与GenBank中参考序列同源性达到97%以上。对分离保存的216株禽致病性大肠杆菌进行氨基糖苷类药物耐药基因的分子流行病学检测,结果表明:aadA1阳性率高达49.1%,strA和strB的阳性率分别为56%和65.7%,aph(3′)的阳性率为16.2%;近三分之二的被检菌株携带有2种以上氨基糖苷类药物耐药基因。药敏试验结果显示所有被检菌株对链霉素耐药率为68.9%,而对阿米卡星的耐药率为38.9%。本研究结果说明禽类细菌的耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关,临床日益严重的耐药现象与耐药基因的普遍存在有着很大的关系,提示控制禽源耐药细菌对人类健康与卫生安全有重要意义。 展开更多

关键词 氨基糖苷类药物耐药基因 禽致病性大肠杆菌 流行病学

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传染性法氏囊病病毒JS株VP2基因真核表达载体的构建及其应用 被引量：9

7

作者 刘红梅 秦爱建 +6 位作者 许小琴 李迎晓 陈鸿军 叶建强 金文杰 刘岳龙 邵红霞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期461-465,共5页

应用RT-PCR方法从鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)JS株中扩增出VP2基因,并克隆入T-easy载体。序列测定分析结果表明IBDVJS株的VP2基因与国际标准强毒株的核苷酸序列同源性达98%,氨基酸序列同源性达99%以上。随后将VP2基因克隆入真核表达载体... 应用RT-PCR方法从鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)JS株中扩增出VP2基因,并克隆入T-easy载体。序列测定分析结果表明IBDVJS株的VP2基因与国际标准强毒株的核苷酸序列同源性达98%,氨基酸序列同源性达99%以上。随后将VP2基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1/zeo(+),构建成功真核表达质粒pcD-VP2,pcD-VP2体外转染COS-1细胞,能在COS-1细胞中表达。利用pcD-VP2质粒进行动物实验,结果表明雏鸡免疫14d后在体内可检测到特异性抗体,pcD-VP2的真核表达质粒二次免疫诱导鸡产生对IBDV强毒攻击的保护率为67%,这一结果提示VP2基因具有重要开发应用价值。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 VP2 表达

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雏鸡法氏囊蛋白质组学双向电泳技术的建立及其初步分析 被引量：5

8

作者 卢占军 秦爱建 +6 位作者 陈欣虹 苏钰文 邵红霞 金文杰 钱锟 王友 朱玉峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期944-951,共8页

为了建立并优化鸡法氏囊蛋白质组学的双向电泳技术体系,以不同日龄雏鸡的法氏囊组织为研究对象,用固相pH梯度胶条进行等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳,采用不同的样品制备方法,对上样量、水化、等电聚焦、胶条平衡和凝胶染色方法等进行一系... 为了建立并优化鸡法氏囊蛋白质组学的双向电泳技术体系,以不同日龄雏鸡的法氏囊组织为研究对象,用固相pH梯度胶条进行等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳,采用不同的样品制备方法,对上样量、水化、等电聚焦、胶条平衡和凝胶染色方法等进行一系列优化,并应用PDQuest8.0.1软件对图谱进行初步分析。结果显示法氏囊组织在pH 5~8范围1、7 cm的2-DE胶上可以得到很好的分离,胶体考染后经PDQuest软件分析,在正常法氏囊组织可检测到800个以上蛋白点,不同2-DE图谱间蛋白点平均匹配率为83.5%,不同日龄雏鸡法氏囊存在有明显表达差异的蛋白质点37个,其中表达上调蛋白点17个,表达下调蛋白点11个,新增蛋白点5个,消失蛋白点4个。试验建立的鸡法氏囊组织蛋白质组双向电泳技术为法氏囊发育进化及其免疫功能的研究提供了新技术和方法。 展开更多

关键词 鸡 法氏囊 蛋白质组 双向电泳

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间接ELISA检测抗禽白血病病毒抗体方法的建立 被引量：9

9

作者 仇钰 秦爱建 +3 位作者 钱琨 金文杰 胡序明 沈海玉 《中国家禽》 北大核心 2010年第22期16-20,共5页

禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是禽白血病的病原,可引起鸡的免疫抑制和肿瘤。净化种鸡群是控制ALV的主要方法之一。本研究将ALV的p27基因克隆到表达载体pGEX-6P-1,在大肠杆菌中获得了高效表达,以纯化后的p27-GST融合蛋白为抗... 禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)是禽白血病的病原,可引起鸡的免疫抑制和肿瘤。净化种鸡群是控制ALV的主要方法之一。本研究将ALV的p27基因克隆到表达载体pGEX-6P-1,在大肠杆菌中获得了高效表达,以纯化后的p27-GST融合蛋白为抗原包被,经过条件优化,建立了检测鸡血清中抗ALV抗体的间接ELISA方法。与IFA检测结果比较,该方法比IDEXX ELISA试剂盒有更高的符合率。可用于禽白血病病毒感染根除的大规模检测,并具有低成本、易操作的特点,能同时检测到针对ALV所有亚群的抗体。 展开更多

关键词 禽白血病病毒 P27 原核表达 间接ELISA

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禽白血病病毒衣壳蛋白单克隆抗体研制及其双夹心ELISA的建立 被引量：7

10

作者 尹丽萍 秦爱建 +6 位作者 钱琨 邵红霞 金文杰 史荣华 梁有志 杭柏林 孙薇薇 《中国家禽》 北大核心 2013年第3期15-19,共5页

为制备禽白血病病毒(ALV)核衣壳蛋白p27的单克隆抗体,本研究以原核表达的融合蛋白GST-ALV p27免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,通过间接免疫荧光(IFA)和间接ELISA进行筛选,制备了5株能够稳定传代并分泌抗p27单抗的杂交瘤... 为制备禽白血病病毒(ALV)核衣壳蛋白p27的单克隆抗体,本研究以原核表达的融合蛋白GST-ALV p27免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,通过间接免疫荧光(IFA)和间接ELISA进行筛选,制备了5株能够稳定传代并分泌抗p27单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为5D3、4F12、5B10、1C5和3C6,亚类鉴定3C6为IgG2b,其余为IgG1。通过IFA、Western-blot及竞争抑制ELISA,表明该5株单抗与J亚群禽白血病病毒(ALV-J)呈阳性反应,而与其他常见禽源病毒无交叉反应。利用5D3和4F12单抗建立了双抗体夹心ELISA方法,经663份临床样本验证,该方法与商品化试剂盒的符合率达到95.17%,证明所研制的针对ALV p27蛋白的单抗及建立的双抗体ELISA方法具有较高的应用价值。 展开更多

关键词 禽白血病病毒 P27 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA

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禽白血病抗原快速检测试纸条的研制及初步应用 被引量：6

11

作者 梁有志 尹丽萍 +4 位作者 杭柏林 钱琨 金文杰 邵红霞 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2012年第14期15-19,共5页

禽白血病给养鸡业带来极大损失,目前检测该病病原的方法主要有ELISA、PCR及RT-PCR、原位杂交(ISH)、间接免疫荧光(IFA)等。本研究应用2株抗禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体5D3和4F12研制了ALV快速检测试纸条。结果证明该试纸... 禽白血病给养鸡业带来极大损失,目前检测该病病原的方法主要有ELISA、PCR及RT-PCR、原位杂交(ISH)、间接免疫荧光(IFA)等。本研究应用2株抗禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体5D3和4F12研制了ALV快速检测试纸条。结果证明该试纸条具有良好的特异性,与H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、马立克氏病病毒、小鹅瘟病毒、鸡贫血病病毒没有交叉反应;采用p27表达蛋白检测试纸条灵敏性,检测下限达到70ng/mL;应用该试纸条检测71份临床样品,与商业ELISA试剂盒检测结果比较,二者符合率达到93%。该试纸条的研制,为基层快速检测ALV提供了条件。 展开更多

关键词 禽白血病 病毒抗原 检测 试纸条

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DF-1细胞二维电泳方法的建立 被引量：3

12

作者 范忠军 胡序明 +2 位作者 郁川 秦爱建 王欢莉 《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第2期83-87,7,共5页

为了建立和优化DF-1细胞二维电泳方法,对5种细胞裂解液进行了比较;同时,还对提取的蛋白在不同的等电聚焦条件、水化条件、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度条件下的二维电泳图谱进行分析比较,并用PDQuest软件分析优化选择。建立了DF-... 为了建立和优化DF-1细胞二维电泳方法,对5种细胞裂解液进行了比较;同时,还对提取的蛋白在不同的等电聚焦条件、水化条件、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度条件下的二维电泳图谱进行分析比较,并用PDQuest软件分析优化选择。建立了DF-1细胞的二维电泳方法,获得分辨率和重复性均可满足分析要求的DF-1细胞的二维电泳图谱。 展开更多

关键词 DF-1 细胞 二维电泳 裂解液 蛋白质组学

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禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因绝对定量PCR方法的建立及应用 被引量：9

13

作者 胡海 钱琨 +5 位作者 张丹阳 石亚运 张杰 邵红霞 金文杰 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2015年第20期16-20,共5页

研究旨在建立一种检测禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p27(ALV-p27)基因实时荧光定量PCR的方法。通过设计ALV-p27特异性的荧光定量PCR引物扩增基因并制备质粒标准品,同时建立检测病毒衣壳蛋白p27基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法检测... 研究旨在建立一种检测禽白血病病毒(ALV)衣壳蛋白p27(ALV-p27)基因实时荧光定量PCR的方法。通过设计ALV-p27特异性的荧光定量PCR引物扩增基因并制备质粒标准品,同时建立检测病毒衣壳蛋白p27基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法检测6日龄胚胎感染,1日龄出壳雏鸡不同组织中p27基因的分布和表达情况。结果表明,ALV-p27基因在1日龄雏鸡脑组织中表达水平最高,而在胸腺组织中表达水平最低。研究建立的检测ALV-p27基因绝对定量PCR方法为进一步研究其生物学功能提供了一种技术手段。 展开更多

关键词 禽白血病病毒 P27基因 荧光定量PCR

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马立克氏病病毒CVI988株VP22蛋白承载异源蛋白细胞间扩散 被引量：2

14

作者 张晨飞 秦爱建 +2 位作者 陈鸿军 邓绪芳 苏钰文 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期170-174,187,共6页

马立克氏病病毒(MDV)被膜蛋白VP22被证实能在细胞间高效转导,为了进一步证明VP22能够作为蛋白转运的载体,将4种不同的异源蛋白与MDV1型(MDV-1)CVI988/Rispens株VP22蛋白融合表达,通过观察这些融合蛋白的细胞定位以及它们的细胞间扩散能... 马立克氏病病毒(MDV)被膜蛋白VP22被证实能在细胞间高效转导,为了进一步证明VP22能够作为蛋白转运的载体,将4种不同的异源蛋白与MDV1型(MDV-1)CVI988/Rispens株VP22蛋白融合表达,通过观察这些融合蛋白的细胞定位以及它们的细胞间扩散能力来研究VP22转运蛋白的情况。结果发现,禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)、牛γ干扰素(BoIFN-γ)及新城疫病毒(NDV)F蛋白能够被MDV-1VP22转运,而鸡法氏囊病病毒(IBDV)蛋白VP2不能被MDV-1VP22转运,上述结果说明MDV-1VP22蛋白能够作为蛋白转运的载体,但对所转运的蛋白具有选择性。 展开更多

关键词 马立克氏病病毒 VP22 蛋白转运 扩散

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胶体金免疫层析检测牛结核γ干扰素方法的建立 被引量：3

15

作者 钱琨 尹天燕 +3 位作者 赵士学 黄大卢 金文杰 秦爱建 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第1期45-50,共6页

牛结核病是一种重要的人畜共患病,尽管许多国家已经实施了牛群净化,但其仍然威胁人类的公共卫生健康。本研究利用抗牛γ干扰素特异性单克隆抗体,通过免疫金标记技术,建立了胶体金免疫层析试纸条检测牛γ干扰素的方法。研究结果证明,该... 牛结核病是一种重要的人畜共患病,尽管许多国家已经实施了牛群净化,但其仍然威胁人类的公共卫生健康。本研究利用抗牛γ干扰素特异性单克隆抗体,通过免疫金标记技术,建立了胶体金免疫层析试纸条检测牛γ干扰素的方法。研究结果证明,该方法对牛γ干扰素具有高度特异性,与其它动物干扰素没有交叉反应,检测牛γ干扰素的灵敏度与进口ELISA试剂盒相当。试纸条在室温保存6个月、4℃保存12个月,其特异性及灵敏度没有明显变化。对田间送检的23份全血经结核特异性刺激后进行检测,结果与进口结核ELISA试剂盒符合率为91.3%。研究表明,本研究建立的牛γ干扰素免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单快捷等特点,适合用于牛结核的快速特异检测。 展开更多

关键词 牛结核病 牛γ干扰素 单克隆抗体 胶体金免疫层析

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马冠状病毒抗体的间接ELISA检测方法的建立 被引量：2

16

作者 仇钰 孙谦 +3 位作者 秦爱建 金文杰 邵红霞 顾炳泉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期122-126,共5页

将含有马冠状病毒N蛋白(ECV-N)的重组杆状病毒rBac-ECV-N感染Sf9昆虫细胞,以表达的ECV-N蛋白作为抗原,以酶标记的鼠抗马IgG特异性单抗为二抗,建立了检测马冠状病毒抗体的ELISA方法。研究结果表明,ECV-N蛋白最佳包被浓度为10μg/mL初提... 将含有马冠状病毒N蛋白(ECV-N)的重组杆状病毒rBac-ECV-N感染Sf9昆虫细胞,以表达的ECV-N蛋白作为抗原,以酶标记的鼠抗马IgG特异性单抗为二抗,建立了检测马冠状病毒抗体的ELISA方法。研究结果表明,ECV-N蛋白最佳包被浓度为10μg/mL初提重组蛋白,马血清以1∶100稀释,酶标记的抗马IgG单克隆抗体工作浓度1∶5000可以检出抗马冠状病毒血清抗体。利用该方法对来自3个国家的1064份马血清进行了检测,检测结果表明:国内711份马血清中检测出13份阳性;澳大利亚335份马血清中检测出31份阳性;瑞典18份马血清均为阴性。该间接ELISA方法的建立,为马冠状病毒感染的预防和控制,出入境检验检疫提供了一种新的检测方法。 展开更多

关键词 马冠状病毒 抗体 ELISA 检测

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禽致病性大肠杆菌分离株中fimC和papC的检测研究 被引量：2

17

作者 金文杰 郑志明 +4 位作者 杨建泉 秦爱建 刘岳龙 邵红霞 张永志 《中国家禽》 北大核心 2007年第22期51-52,54,共3页

　　菌毛是细菌的一种重要的黏附因子,细菌借助于菌毛对宿主黏膜上皮细胞的黏附作用,得以定居,并进一步到达宿主其他部位.……

关键词 禽致病性大肠杆菌 预期目的 所得 分离株 fimC papC

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冷冻原肠浸泡解冻池水细菌多样性分析 被引量：2

18

作者 仇保丰 宋鸿雁 +4 位作者 董蓉莲 高雪梅 蒋荧梅 顾炳泉 胡顺林 《动物医学进展》 北大核心 2017年第5期43-48,共6页

为了研究冷冻原肠浸泡解冻池水的细菌多样性,采集3份水样直接提取细菌基因组总DNA,再分别用PCR技术扩增出细菌16S rDNA并构建基因文库,经PCR鉴定后从3个文库中分别随机挑取50个阳性克隆进行DNA序列测定。分别对3个文库的测序结果进行分... 为了研究冷冻原肠浸泡解冻池水的细菌多样性,采集3份水样直接提取细菌基因组总DNA,再分别用PCR技术扩增出细菌16S rDNA并构建基因文库,经PCR鉴定后从3个文库中分别随机挑取50个阳性克隆进行DNA序列测定。分别对3个文库的测序结果进行分析发现,除去24.00%~32.00%为无法鉴定的未培养细菌和未分类细菌以外,其余细菌来自于芽胞杆菌纲、γ-变形菌纲、放线菌纲和黄杆菌纲,分别占各文库克隆总数的38.00%~42.00%、20.00%~26.00%、4.00%~8.00%和0~2.00%。除去44株无法鉴定的细菌,进一步对其他106株细菌进行分析发现,其中2株放线菌目细菌和5株肠杆菌科细菌无法进一步鉴定,其余99个菌株包含了来自19个属的至少30种细菌,且肠球菌属、变形杆菌属和芽胞杆菌属为其中的优势菌属。本研究显示冷冻原肠浸泡解冻池水中细菌多样性较高,其中部分细菌为致病菌和条件致病菌。 展开更多

关键词 冷冻原肠 解冻池 细菌多样性 16SrDNA文库

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流式细胞术在营养和食品卫生评价中的研究进展 被引量：6

19

作者 李文华 胡茂志 +2 位作者 严秋香 魏文娴 崔桂友 《安徽农业科学》 CAS 2015年第11期279-281,共3页

流式细胞术作为单细胞水平上的分析技术,已逐渐被应用于食品科学研究领域,特别是在食品功能分析和食品生产与加工过程中的质量控制等方面呈现较好的应用前景。就其在食品功能成分评价与食品微生物检测等方面的应用研究进展作一综述。

关键词 流式细胞术 食品功能成分 食品微生物

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国产和进口冷冻原肠中奇异变形杆菌的监测与分析 被引量：1

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作者 仇保丰 宋鸿雁 +4 位作者 董蓉莲 蒋荧梅 高雪梅 刘文斌 胡顺林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期970-975,共6页

目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同... 目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16SrDNA鉴定,同时收集GenBank中不同地域和宿主动物的奇异变形杆菌,以及其他重要食源性致病菌的16SrDNA序列,结合本研究测定序列共同进行比对分析。结果 40份样品中有10份样品为PM检测阳性,总的PM检测阳性率为25.00%,其中,国产冷冻猪原肠的PM检测阳性率为31.25%,澳大利亚和新西兰进口冷冻羊原肠的PM检测阳性率分别为27.27%和15.38%,另外,发现不同原肠PM分离株之间的16SrDNA同源性差异较大,且同源性的高低和PM菌株的分离地域及宿主动物均未呈现明显的关联性。结论国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况比较严重,相关管理和研究应进一步加强。 展开更多

关键词 冷冻原肠 奇异变形杆菌 监测 分析

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