目的:将食物相关生活质量量表(Food-related Quality of Life,FRQoL)进行汉化,并在炎症性肠病病人中进行信效度检验。方法:在获得原量表作者授权后,遵循Brislin翻译模式对FRQoL进行汉化,并邀请5名专家组成专家小组,对量表进行文化调适,...目的:将食物相关生活质量量表(Food-related Quality of Life,FRQoL)进行汉化,并在炎症性肠病病人中进行信效度检验。方法:在获得原量表作者授权后,遵循Brislin翻译模式对FRQoL进行汉化,并邀请5名专家组成专家小组,对量表进行文化调适,经预调查后形成中文版FRQoL。选择2022年12月—2023年7月在扬州市2所三级甲等医院就诊的330例炎症性肠病病人进行调查,检验量表的信效度。结果:修订后的中文版FRQoL包括25个条目。中文版FRQoL条目水平的内容效度指数(I-CVI)为0.833~1.000,量表水平的内容效度指数(S-CVI)为0.978。探索性因子分析提取特征值>1的公因子1个,其特征值为16.833,解释总方差的67.334%,所有条目的因子载荷>0.4。验证性因子分析显示各项拟合指标均达标。总Cronbach's α系数和折半信度分别为0.986,0.967。中文版FRQoL总分和炎症性肠病生活质量问卷总分及肠道症状、全身症状、情感功能、社会功能维度得分均呈正相关(P<0.01)。结论:中文版FRQoL在我国炎症性肠病病人中具有良好的信效度,可用于测量病人与食物相关的生活质量。展开更多
目的考察B淋巴细胞内免疫复合物(IC)对Toll样受体9(TLR9)激动剂Cp G寡脱氧核苷酸(ODN)诱导的CD40和CD80高表达信号通路的抑制作用。方法给小鼠腹腔注射Cp G ODN和IC后,用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B淋巴细胞,流式细胞术检测B淋巴细胞...目的考察B淋巴细胞内免疫复合物(IC)对Toll样受体9(TLR9)激动剂Cp G寡脱氧核苷酸(ODN)诱导的CD40和CD80高表达信号通路的抑制作用。方法给小鼠腹腔注射Cp G ODN和IC后,用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B淋巴细胞,流式细胞术检测B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达。免疫磁珠法分选野生型和免疫球蛋白G Fcγ段受体Ⅱb(FcγRⅡb)缺陷小鼠脾脏B淋巴细胞,体外用Cp G ODN和(或)IC刺激后,蛋白质印迹法检测细胞内相关蛋白激酶的磷酸化水平。用JNK抑制剂(SP600125,50μmol/L)和p38抑制剂(SB203580,20 mg/L)处理后,流式细胞术检测Cp G ODN活化B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达。结果体内实验结果显示,IC抑制Cp G ODN活化B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达(P均<0.05)。IC抑制B淋巴细胞内Cp G ODN诱导的JNK和p38磷酸化水平,但不能抑制FcγRⅡb缺陷小鼠B淋巴细胞JNK和p38的磷酸化水平。SP600125和SB203580处理后,Cp G ODN活化B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达均下调(P均<0.01)。结论 B淋巴细胞内IC通过抑制JNK和p38通路抑制TLR9激动剂Cp G ODN诱导的CD40和CD80表达。展开更多
目的:运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)点突变家兔模型。方法:根据Pub Med基因蛋白数据对人和兔的PCSK9蛋白功能区进行Blast分析,发现人PCSK9基因的386S(丝氨酸)氨基酸功能区与兔PCSK9基因的485S同源。...目的:运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)点突变家兔模型。方法:根据Pub Med基因蛋白数据对人和兔的PCSK9蛋白功能区进行Blast分析,发现人PCSK9基因的386S(丝氨酸)氨基酸功能区与兔PCSK9基因的485S同源。根据家兔PCSK9基因的485S对应的碱基替换位置及序列分析结果设计3条单链向导RNA和1条单链寡核苷酸供体模板。将合成的单链向导RNA、Cas9 m RNA和单链寡核苷酸供体共同注射入家兔受精卵细胞质内并将胚胎移植入待孕母兔体内。对获得的F0代兔进行PCR、TA克隆、脱靶检测以鉴定PCSK9S386A是否突变成功。利用获得的PCSK9S386A基因点突变家兔进行繁殖,扩大群体。结果:共获得15只F0代兔,其中1只为PCSK9S386A点突变纯合子,2只为PCSK9S386A点突变杂合子,且该突变可以稳定遗传。结论:利用CRISPR/Cas9技术成功构建了PCSK9S386A点突变家兔模型,为探究PCSK9功能减弱的分子机制,开发可靠、有效的诊断和治疗措施提供了良好的动物模型。展开更多
文摘目的:将食物相关生活质量量表(Food-related Quality of Life,FRQoL)进行汉化,并在炎症性肠病病人中进行信效度检验。方法:在获得原量表作者授权后,遵循Brislin翻译模式对FRQoL进行汉化,并邀请5名专家组成专家小组,对量表进行文化调适,经预调查后形成中文版FRQoL。选择2022年12月—2023年7月在扬州市2所三级甲等医院就诊的330例炎症性肠病病人进行调查,检验量表的信效度。结果:修订后的中文版FRQoL包括25个条目。中文版FRQoL条目水平的内容效度指数(I-CVI)为0.833~1.000,量表水平的内容效度指数(S-CVI)为0.978。探索性因子分析提取特征值>1的公因子1个,其特征值为16.833,解释总方差的67.334%,所有条目的因子载荷>0.4。验证性因子分析显示各项拟合指标均达标。总Cronbach's α系数和折半信度分别为0.986,0.967。中文版FRQoL总分和炎症性肠病生活质量问卷总分及肠道症状、全身症状、情感功能、社会功能维度得分均呈正相关(P<0.01)。结论:中文版FRQoL在我国炎症性肠病病人中具有良好的信效度,可用于测量病人与食物相关的生活质量。
文摘目的考察B淋巴细胞内免疫复合物(IC)对Toll样受体9(TLR9)激动剂Cp G寡脱氧核苷酸(ODN)诱导的CD40和CD80高表达信号通路的抑制作用。方法给小鼠腹腔注射Cp G ODN和IC后,用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B淋巴细胞,流式细胞术检测B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达。免疫磁珠法分选野生型和免疫球蛋白G Fcγ段受体Ⅱb(FcγRⅡb)缺陷小鼠脾脏B淋巴细胞,体外用Cp G ODN和(或)IC刺激后,蛋白质印迹法检测细胞内相关蛋白激酶的磷酸化水平。用JNK抑制剂(SP600125,50μmol/L)和p38抑制剂(SB203580,20 mg/L)处理后,流式细胞术检测Cp G ODN活化B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达。结果体内实验结果显示,IC抑制Cp G ODN活化B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达(P均<0.05)。IC抑制B淋巴细胞内Cp G ODN诱导的JNK和p38磷酸化水平,但不能抑制FcγRⅡb缺陷小鼠B淋巴细胞JNK和p38的磷酸化水平。SP600125和SB203580处理后,Cp G ODN活化B淋巴细胞表面CD40和CD80的表达均下调(P均<0.01)。结论 B淋巴细胞内IC通过抑制JNK和p38通路抑制TLR9激动剂Cp G ODN诱导的CD40和CD80表达。
文摘目的:运用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)点突变家兔模型。方法:根据Pub Med基因蛋白数据对人和兔的PCSK9蛋白功能区进行Blast分析,发现人PCSK9基因的386S(丝氨酸)氨基酸功能区与兔PCSK9基因的485S同源。根据家兔PCSK9基因的485S对应的碱基替换位置及序列分析结果设计3条单链向导RNA和1条单链寡核苷酸供体模板。将合成的单链向导RNA、Cas9 m RNA和单链寡核苷酸供体共同注射入家兔受精卵细胞质内并将胚胎移植入待孕母兔体内。对获得的F0代兔进行PCR、TA克隆、脱靶检测以鉴定PCSK9S386A是否突变成功。利用获得的PCSK9S386A基因点突变家兔进行繁殖,扩大群体。结果:共获得15只F0代兔,其中1只为PCSK9S386A点突变纯合子,2只为PCSK9S386A点突变杂合子,且该突变可以稳定遗传。结论:利用CRISPR/Cas9技术成功构建了PCSK9S386A点突变家兔模型,为探究PCSK9功能减弱的分子机制,开发可靠、有效的诊断和治疗措施提供了良好的动物模型。
