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Rh抗原Fab抗体库的构建与筛选被引量：2: 1; 作者陈琦张嘉敏 +2 位作者张海燕朱自严李厚达《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期805-807,810,共4页; 目的:构建抗体库并筛选Rh抗原的Fab抗体。方法:收集5份血清中抗Rh抗体效价在1∶256～512的人淋巴细胞,提取RNA,用多对引物PCR扩增VH、Vκ、Vλ基因,并分别从pComb3xTT和pComb3xλ噬粒中扩增CH1、Cκ、Cλ,通过重叠PCR,构建重链Fd基因及... 展开更多; 关键词 RH血型基因工程抗体噬菌体抗体库 FAB; 在线阅读下载PDF 职称材料

克罗卡林对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响被引量：4: 2; 作者陈琦王晓良《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期171-174,共4页; 目的研究钾通道开放剂克罗卡林（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响。方法大鼠离体血管平滑肌张力记录法。结果ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可抑制由苯肾上腺素（Ｐｈｅ）介导弓；起的血管收缩，其作用在老年大鼠... 展开更多; 关键词钾通道开放剂克罗卡林 CROMAKALIM 一氧化氮血管平滑肌张力; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙肝Ⅰ号方对实验性肝损伤小鼠血栓素、前列环素代谢的作用被引量：1: 3; 作者孙沛毅钱涯邻 +2 位作者孙云张洪泉陈翠华《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第2期121-123,共3页; 检测实验性肝损伤小鼠肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及血浆血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）和前列环素（ＰＧＩ２）代谢产物的浓度，以探讨氧自由基（ＯＦＲ）及ＴＸＡ２－ＰＧＩ２在小鼠实验性肝损伤中的作用。结果表... 展开更多; 关键词肝损伤实验性丙二醛 SOD TXA2 乙肝I号中药; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：2: 4; 作者陈琦曹慧 +3 位作者张海燕高哓飞王芬李厚达《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期556-558,共3页; 目的：制备抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B（GPA/GPB）的单克隆抗体（mAb）, 并进行特性鉴定.方法：用人“O”型血红细胞作为免疫源, 免疫BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备mAb, 用谱红细胞筛选阳性克隆; 采用直接、间接血凝试验... 展开更多; 关键词 MN血型系统血型糖蛋白A 血型糖蛋白B 谱红细胞单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

人红细胞血型糖蛋白GYPC的克隆与表达被引量：1: 5; 作者陈琦洪光 +1 位作者刘进李厚达《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期408-410,共3页; 目的克隆人红细胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,构建GYPC重组逆转录病毒载体,以获得稳定表达GYPC的L929细胞。方法RT-PCR扩增人GYPC基因,克隆入T载体后,将GYPC双酶切亚克隆入逆转录病毒载体pEGZ,用此重组载体转染L929细胞,Zeocin筛选得到阳性... 展开更多; 关键词血型糖蛋白C 逆转录病毒转染基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立: 6; 作者陈琦曹慧 +2 位作者张海燕高晓飞李厚达《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期419-422,共4页; 为鉴定MNSs血型单克隆细胞株6D7C9分泌的抗体类型,通过克隆、亚克隆、细胞转染等分子生物学技术建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,并将其作为抗原,通过ELISA、Western印迹法确定6D7C9分泌的McAb.结果显示,RT-PCR技术成功克隆获得... 展开更多; 关键词血型糖蛋白A 血型糖蛋白B 单克隆抗体基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Rh抗原Fab抗体库的构建与筛选被引量：2: 1; 作者陈琦张嘉敏张海燕朱自严李厚达; 机构扬州大学医学院生理学教研室上海市血液中心苏州贝尔达生物医药科技有限公司; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期805-807,810,共4页; 基金苏州市科技局自然科学基金(SSY0616); 文摘目的:构建抗体库并筛选Rh抗原的Fab抗体。方法:收集5份血清中抗Rh抗体效价在1∶256～512的人淋巴细胞,提取RNA,用多对引物PCR扩增VH、Vκ、Vλ基因,并分别从pComb3xTT和pComb3xλ噬粒中扩增CH1、Cκ、Cλ,通过重叠PCR,构建重链Fd基因及完整的kappa、Lamda轻链,并进一步重叠PCR,获得Fab抗体片段。Fab经酶切、连接并电转化到噬菌体抗体表达载体pComb3xSS中,构建获得抗Rh的Fab抗体库,经4轮Rh(-)/Rh(+)红细胞阴/阳淘筛,获得的阳性克隆分别进行血凝试验、Western blot分析及测序鉴定。结果:构建获得总库容为7.4×106的Fab抗体库,并从中筛选得到1株能特异结合Rh抗原的Fab抗体。结论:应用基因工程抗体技术,成功获得了1株能与Rh(+)红细胞特异凝集的Fab抗体,为制备能用于临床的特异性强、效价高,并具有自主知识产权的Rh抗体打下基础。; 关键词 RH血型基因工程抗体噬菌体抗体库 FAB; Keywords Rh antibody genetic engineering antibody phage display antibody library Fab; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名克罗卡林对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响被引量：4: 2; 作者陈琦王晓良; 机构扬州大学医学院生理学教研室中国医学科学院药物研究所; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期171-174,共4页; 文摘目的研究钾通道开放剂克罗卡林（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响。方法大鼠离体血管平滑肌张力记录法。结果ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可抑制由苯肾上腺素（Ｐｈｅ）介导弓；起的血管收缩，其作用在老年大鼠明显减弱；血管内皮的去除或分别应用ＮＯ合酶抑制剂Ｌ．ＮＡＭＥ、环氧酶抑制剂亚甲蓝，均可明显降低ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ的舒血管反应，但内皮去除或ＮＯ作用被抑制却消除了ｃｒｏ－ｍａｋａｌｉｍ作用与年龄变化的关系。此外研究还表明：内源性和外源性ＮＯ供体Ａｃｈ及ＳＮＰ的舒血管反应在老年大鼠明显弱于幼年大鼠。结论ＮＯ释放量的减少或血管对ＮＯ反应性的降低可能是引起ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ舒血管作用在老年大鼠明显减弱的重要原因。; 关键词钾通道开放剂克罗卡林 CROMAKALIM 一氧化氮血管平滑肌张力; Keywords potassium channel opener cromakalim NO vascular smooth muscle; 分类号 R972 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙肝Ⅰ号方对实验性肝损伤小鼠血栓素、前列环素代谢的作用被引量：1: 3; 作者孙沛毅钱涯邻孙云张洪泉陈翠华; 机构扬州大学医学院病理生理学教研室扬州苏北人民医院; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第2期121-123,共3页; 基金江苏省科委社会发展指导性计划项目; 文摘检测实验性肝损伤小鼠肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及血浆血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）和前列环素（ＰＧＩ２）代谢产物的浓度，以探讨氧自由基（ＯＦＲ）及ＴＸＡ２－ＰＧＩ２在小鼠实验性肝损伤中的作用。结果表明，与对照组比较，肝损伤小鼠肝组织ＭＤＡ明显升高，且与血浆ＴＸＢ２变化呈正相关（ｒ＝０．９０８３，Ｐ＜０．０１）。ＳＯＤ明显降低；血浆ＴＸＡ２明显升高，ＰＧＩ２明显下降。以上结果提示ＯＦＲ与ＴＸＡ２／ＰＧＩ２平衡失调相互作用，共同引起实验性肝损伤。而乙肝Ⅰ号方可逆转ＭＤＡ、ＳＯＤ。; 关键词肝损伤实验性丙二醛 SOD TXA2 乙肝I号中药; Keywords hepatic injury, experimental malondialdehyde superoxide dismutase prostaglandins mice, inbred ICR; 分类号 R285.5 [医药卫生—中药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：2: 4; 作者陈琦曹慧张海燕高哓飞王芬李厚达; 机构扬州大学医学院生理学教研室扬州大学实验动物中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期556-558,共3页; 基金国家科技部中小企业技术创新基金项目(04C26223200112); 文摘目的：制备抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B（GPA/GPB）的单克隆抗体（mAb）, 并进行特性鉴定.方法：用人“O”型血红细胞作为免疫源, 免疫BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备mAb, 用谱红细胞筛选阳性克隆; 采用直接、间接血凝试验检测杂交瘤细胞培养上清及腹水中mAb的效价.分别用快速定性试纸和酶处理红细胞检测mAb的Ig亚类及抗原表位.用Western blot鉴定抗GPA/GPB mAb的特异性.结果：获得4株分泌抗M、1株抗N及3株抗GPA/GPB mAb的杂交瘤细胞株.杂交瘤细胞培养上清mAb的效价介于1×2^-4 ～1×2^-8之间, 腹水mAb的效价在1×2^-7 ～1×2^-12之间.除1株mAb 1C1C9C4为IgM外, 其他7株mAb均为IgG.通过杂交瘤细胞培养上清与谱红细胞的反应格局, 结合mAb抗原表位的检测, 确定4株和1株mAb可分别特异性结合于GPA的M、N抗原表位; 另3株mAb 6D7C9、7C9H4和7C9G11 与“O”型血红细胞膜的Western blot结果显示, 均可结合GPA、GPB蛋白.结论：成功地建立了4株分泌抗M、1株分泌抗N及3株分泌抗GPA/GPB mAb的杂交瘤细胞株, 可用于MNSs血型系统的研究及鉴定, 并为制备双功能抗体用于病毒、肿瘤疾病的诊断和治疗打下了坚实的基础.; 关键词 MN血型系统血型糖蛋白A 血型糖蛋白B 谱红细胞单克隆抗体; Keywords MN blood group glycophorin A glycophorin B panel erythrocyte mAb; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人红细胞血型糖蛋白GYPC的克隆与表达被引量：1: 5; 作者陈琦洪光刘进李厚达; 机构扬州大学医学院生理学教研室扬州大学比较医学中心扬州大学比较医学中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期408-410,共3页; 基金科技型企业技术创新基金项目资助(No.04C26223200112); 文摘目的克隆人红细胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,构建GYPC重组逆转录病毒载体,以获得稳定表达GYPC的L929细胞。方法RT-PCR扩增人GYPC基因,克隆入T载体后,将GYPC双酶切亚克隆入逆转录病毒载体pEGZ,用此重组载体转染L929细胞,Zeocin筛选得到阳性克隆;用RT-PCR及流式细胞术等方法对重组载体进行鉴定。结果克隆了人GYPC基因,并获得稳定表达GYPC的L929细胞系。结论应用基因工程技术,成功构建了含人GYPC基因重组逆转录病毒载体和稳定表达人GYPC的细胞株,建立了红细胞血型抗原的异源表达系统,为血清中抗GYPC特异性抗体的检测及GYPC单克隆抗体的制备和研究奠定了基础。; 关键词血型糖蛋白C 逆转录病毒转染基因表达; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立: 6; 作者陈琦曹慧张海燕高晓飞李厚达; 机构扬州大学医学院生理学教研室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期419-422,共4页; 文摘为鉴定MNSs血型单克隆细胞株6D7C9分泌的抗体类型,通过克隆、亚克隆、细胞转染等分子生物学技术建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,并将其作为抗原,通过ELISA、Western印迹法确定6D7C9分泌的McAb.结果显示,RT-PCR技术成功克隆获得了GPA、GPB血型糖蛋白编码基因,通过分别构建其重组逆转录病毒表达载体pEGZ/GPA及pEGZ/GPB,转染包装细胞293T,再感染L929细胞,经zeocin筛选2周后,RT-PCR及流式细胞仪分析证实,L929/GPA和L929/GPB转基因细胞中分别有GPA、GPB目的基因的转录和蛋白表达.用稳定高表达GPA、GPB的转基因细胞通过ELISA和Western印迹法证实单克隆细胞株6D7C9分泌的是抗GPA/GPBMcAb.本研究成功地建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,为MNSs血型McAb的检测及GPA、GPB蛋白的功能学研究奠定了基础.; 关键词血型糖蛋白A 血型糖蛋白B 单克隆抗体基因表达; Keywords glycophorin A glycophorin B monoclonal antibody gene expression; 分类号 Q987.2 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Rh抗原Fab抗体库的构建与筛选	陈琦张嘉敏张海燕朱自严李厚达	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	克罗卡林对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响	陈琦王晓良	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2001	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	乙肝Ⅰ号方对实验性肝损伤小鼠血栓素、前列环素代谢的作用	孙沛毅钱涯邻孙云张洪泉陈翠华	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B单克隆抗体的制备及其特性鉴定	陈琦曹慧张海燕高哓飞王芬李厚达	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人红细胞血型糖蛋白GYPC的克隆与表达	陈琦洪光刘进李厚达	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立	陈琦曹慧张海燕高晓飞李厚达	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料