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猪繁殖与呼吸综合征病毒接触感染仔猪模型的建立
被引量：
4
1
作者
夏文龙
吴植
+4 位作者
郭长明
朱善元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2019年第3期3-6,10,I0001,共6页
为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触感染模型,将易感仔猪与PRRSV人工感染仔猪在隔离器中同居饲养,每日观察记录体温变化和临床症状,定期采集血清和粪便样品,用荧光定量RT-PCR检测病毒血症和粪便排毒水平;对病死猪和试验结束迫...
为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触感染模型,将易感仔猪与PRRSV人工感染仔猪在隔离器中同居饲养,每日观察记录体温变化和临床症状,定期采集血清和粪便样品,用荧光定量RT-PCR检测病毒血症和粪便排毒水平;对病死猪和试验结束迫杀猪进行剖检和肺脏组织病理学检查,并检测各器官病毒载量和组织分布。结果显示:接触感染仔猪出现高热和PRRS症状时间分别较人工接种猪推迟2~3d;第3天起血清检测PRRSV阳性,第10天病毒血症上升至较高水平(108.6拷贝/mL);第5天起粪便检测PRRSV阳性,第7天粪便排毒量上升至较高水平(103.9拷贝/0.1g);3头接触感染仔猪分别于同居后第12天和第13天死亡,较人工接种猪推迟1~2d,病死猪的主要器官病毒载量以及剖检和肺脏显微病理变化与人工接种病死猪相似。这些结果表明,本研究建立的接触感染仔猪模型可用于PRRS疫苗免疫效果评价。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征
接触感染
仔猪模型
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职称材料
奶牛乳房炎葡萄球菌菌种的鉴定及其mecA基因与耐药性关系分析
被引量：
2
2
作者
徐佳
谭笑
+2 位作者
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2015年第12期86-88,共3页
从209份奶牛乳房炎阳性乳样分离葡萄球菌,用PCR扩增Tuf和16S rRNA基因片段,根据序列同源性进行种的鉴定,用PCR检测mecA基因,用标准方法进行药敏试验。结果显示,分离的104株葡萄球菌分为14个种,包括金黄色葡萄球菌和13种凝固酶阴性葡萄球...
从209份奶牛乳房炎阳性乳样分离葡萄球菌,用PCR扩增Tuf和16S rRNA基因片段,根据序列同源性进行种的鉴定,用PCR检测mecA基因,用标准方法进行药敏试验。结果显示,分离的104株葡萄球菌分为14个种,包括金黄色葡萄球菌和13种凝固酶阴性葡萄球菌,后者主要为阿氏葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、木糖葡萄球菌和产色葡萄球菌,不同于国外的研究报道;松鼠葡萄球菌和溶血葡萄球菌的mecA基因检出率高达66.7%,表皮葡萄球菌达42.9%,金黄色葡萄球菌达35.7%,显著高于国内外报道;大部分葡萄球菌的β-内酰胺类抗生素耐药性与mecA基因检测不相符,可能与其他mec基因有关。
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关键词
奶牛乳房炎
葡萄球菌
MECA基因
耐药性
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职称材料
重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究
3
作者
肖真真
汤明元
+2 位作者
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018年第10期16-19,24,共5页
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切...
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL; TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0. 47μg/mL和1. 88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。
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关键词
重组P128蛋白
融合表达
纯化
抗葡萄球菌活性
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒接触感染仔猪模型的建立
被引量：
4
1
作者
夏文龙
吴植
郭长明
朱善元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
机构
扬州大学兽医学院江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心
江苏
农牧科技职业
学院
江苏省
兽
用生物制药高技术研究重点实验室
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2019年第3期3-6,10,I0001,共6页
基金
江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目
+1 种基金
江苏省农业科技自主创新资金项目(CX142087)
江苏省自然科学基金(BK20151576)
文摘
为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触感染模型,将易感仔猪与PRRSV人工感染仔猪在隔离器中同居饲养,每日观察记录体温变化和临床症状,定期采集血清和粪便样品,用荧光定量RT-PCR检测病毒血症和粪便排毒水平;对病死猪和试验结束迫杀猪进行剖检和肺脏组织病理学检查,并检测各器官病毒载量和组织分布。结果显示:接触感染仔猪出现高热和PRRS症状时间分别较人工接种猪推迟2~3d;第3天起血清检测PRRSV阳性,第10天病毒血症上升至较高水平(108.6拷贝/mL);第5天起粪便检测PRRSV阳性,第7天粪便排毒量上升至较高水平(103.9拷贝/0.1g);3头接触感染仔猪分别于同居后第12天和第13天死亡,较人工接种猪推迟1~2d,病死猪的主要器官病毒载量以及剖检和肺脏显微病理变化与人工接种病死猪相似。这些结果表明,本研究建立的接触感染仔猪模型可用于PRRS疫苗免疫效果评价。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征
接触感染
仔猪模型
Keywords
PRRSV
contagious infection
piglet model
分类号
S852.657 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
奶牛乳房炎葡萄球菌菌种的鉴定及其mecA基因与耐药性关系分析
被引量：
2
2
作者
徐佳
谭笑
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
机构
扬州大学兽医学院江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2015年第12期86-88,共3页
基金
江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心和高校优势学科建设工程项目(PAPD)
文摘
从209份奶牛乳房炎阳性乳样分离葡萄球菌,用PCR扩增Tuf和16S rRNA基因片段,根据序列同源性进行种的鉴定,用PCR检测mecA基因,用标准方法进行药敏试验。结果显示,分离的104株葡萄球菌分为14个种,包括金黄色葡萄球菌和13种凝固酶阴性葡萄球菌,后者主要为阿氏葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、木糖葡萄球菌和产色葡萄球菌,不同于国外的研究报道;松鼠葡萄球菌和溶血葡萄球菌的mecA基因检出率高达66.7%,表皮葡萄球菌达42.9%,金黄色葡萄球菌达35.7%,显著高于国内外报道;大部分葡萄球菌的β-内酰胺类抗生素耐药性与mecA基因检测不相符,可能与其他mec基因有关。
关键词
奶牛乳房炎
葡萄球菌
MECA基因
耐药性
分类号
S852.653 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究
3
作者
肖真真
汤明元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
机构
扬州大学兽医学院江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018年第10期16-19,24,共5页
基金
江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目
文摘
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL; TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0. 47μg/mL和1. 88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。
关键词
重组P128蛋白
融合表达
纯化
抗葡萄球菌活性
Keywords
P128 protein
fusion expression
purification
anti-staphylococcal activity
分类号
S853.72 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒接触感染仔猪模型的建立
夏文龙
吴植
郭长明
朱善元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2019
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
奶牛乳房炎葡萄球菌菌种的鉴定及其mecA基因与耐药性关系分析
徐佳
谭笑
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2015
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究
肖真真
汤明元
张鑫宇
夏晓莉
孙怀昌
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018
0
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职称材料
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