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结核分枝杆菌Rv3641c抑制巨噬细胞Ⅰ型干扰素应答并促进胞内存活的研究
1
作者
金雯
耿敏
+6 位作者
胡苏洁
张馨阳
李文琴
郑成坤
焦新安
陈祥
徐正中
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025年第4期385-391,共7页
目的探究结核分枝杆菌Rv3641c基因对于宿主Ⅰ型干扰素应答的免疫调控功能和机制。方法使用穿梭质粒pMV261构建Rv3641c过表达重组耻垢分枝杆菌,对重组菌的生物学特性进行分析,探究Rv3641c对于分枝杆菌生长曲线、菌落形态和抗逆性的影响...
目的探究结核分枝杆菌Rv3641c基因对于宿主Ⅰ型干扰素应答的免疫调控功能和机制。方法使用穿梭质粒pMV261构建Rv3641c过表达重组耻垢分枝杆菌,对重组菌的生物学特性进行分析,探究Rv3641c对于分枝杆菌生长曲线、菌落形态和抗逆性的影响。随后,Rv3641c过表达耻垢分枝杆菌感染RAW264.7细胞,通过RT-PCR测定抑制Ⅰ型干扰素通路相关基因转录表达,通过ELISA测定IFN-β蛋白表达水平,并测定胞内存活水平。结果成功构建过表达重组耻垢分枝杆菌rMS::pMV261-Rv3641c,生物学特性分析结果显示Rv3641c不影响分枝杆菌生长,但是显著改变分枝杆菌菌落形态并提高了其对于H2O2抗逆性水平。重组菌感染实验结果显示Rv3641c显著下调宿主细胞IFN-α、IFN-β和下游ISGs基因CXCL10、IFIT2和IL-1β转录水平,同时Rv3641c显著下调IFN-β蛋白表达水平。胞内定殖实验结果显示过表达重组菌感染组,胞内分枝杆菌显著高于空载体组,表明Rv3641c可以促进分枝杆菌胞内存活。结论结核分枝杆菌Rv3641c基因可以抑制宿主Ⅰ型干扰素应答并促进分枝杆菌胞内存活,为深入探究结核分枝杆菌免疫逃逸功能及抗结核药物新靶标挖掘提供了新思路。
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关键词
结核分枝杆菌
Ⅰ型干扰素
免疫逃逸
胞内存活
Rv3641c
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职称材料
结核分枝杆菌靶向宿主细胞蛋白逃逸免疫杀伤的研究进展
被引量：
2
2
作者
全娟娟
夏爱鸿
+5 位作者
孟闯
李昕
姚志鸿
陈祥
徐正中
焦新安
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期259-263,共5页
结核分枝杆菌是引发结核病的一种人兽共患病原菌,严重危害人类健康以及公共安全,作为一种兼性胞内感染菌,其引发结核病的关键是破坏宿主免疫防御机制以提高其在胞内生存能力。结核分枝杆菌感染宿主细胞的过程中,分枝杆菌效应蛋白通过与...
结核分枝杆菌是引发结核病的一种人兽共患病原菌,严重危害人类健康以及公共安全,作为一种兼性胞内感染菌,其引发结核病的关键是破坏宿主免疫防御机制以提高其在胞内生存能力。结核分枝杆菌感染宿主细胞的过程中,分枝杆菌效应蛋白通过与宿主靶蛋白的相互作用来影响细胞凋亡、炎性因子表达、抗原提呈等多种免疫效应,从而逃逸宿主细胞的杀伤,并在机体免疫状态低下时复发从而引起结核病。深入了解结核分枝杆菌效应蛋白和宿主靶蛋白的相互作用及分子机制,将为结核病的防治提供新的线索。
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关键词
结核分枝杆菌
宿主细胞
免疫逃逸
蛋白互作
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职称材料
新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定
被引量：
2
3
作者
汪巧菊
胡雨萌
+4 位作者
温亚亚
宋丽
孟闯
潘志明
焦新安
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期157-163,共7页
旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2 S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原。该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感...
旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2 S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原。该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内诱导表达S1蛋白,经Ni^(2+)柱亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白的表达情况。结果表明,已成功表达含His标签的S1蛋白,并且已获得浓度和纯度较高、能与S1多克隆抗体反应的目的蛋白。此外,蛋白刺激细胞的结果表明,原核表达的S1蛋白免疫原性良好,能诱导小鼠巨噬细胞上调表达多种细胞因子和趋化因子,促进RAW264.7细胞产生免疫反应。综上,该研究成功构建了pCold I-S1重组质粒,获得了SARS-CoV-2的良好候选抗原S1蛋白。
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关键词
SARS-CoV-2
S1蛋白
原核表达
生物活性鉴定
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职称材料
题名
结核分枝杆菌Rv3641c抑制巨噬细胞Ⅰ型干扰素应答并促进胞内存活的研究
1
作者
金雯
耿敏
胡苏洁
张馨阳
李文琴
郑成坤
焦新安
陈祥
徐正中
机构
扬州大学/江苏省人兽共患病学重点实验室
农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制
重点
实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025年第4期385-391,共7页
基金
国家重点研发计划(No.2021YFD1800403)
江苏省农业科技自主创新资金项目(No.CX(21)1004)
+2 种基金
江苏省重点研发计划(现代农业)(No.BE2021331)
江苏省大学生创新创业训练计划项目(No.202411117252Y)
江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)。
文摘
目的探究结核分枝杆菌Rv3641c基因对于宿主Ⅰ型干扰素应答的免疫调控功能和机制。方法使用穿梭质粒pMV261构建Rv3641c过表达重组耻垢分枝杆菌,对重组菌的生物学特性进行分析,探究Rv3641c对于分枝杆菌生长曲线、菌落形态和抗逆性的影响。随后,Rv3641c过表达耻垢分枝杆菌感染RAW264.7细胞,通过RT-PCR测定抑制Ⅰ型干扰素通路相关基因转录表达,通过ELISA测定IFN-β蛋白表达水平,并测定胞内存活水平。结果成功构建过表达重组耻垢分枝杆菌rMS::pMV261-Rv3641c,生物学特性分析结果显示Rv3641c不影响分枝杆菌生长,但是显著改变分枝杆菌菌落形态并提高了其对于H2O2抗逆性水平。重组菌感染实验结果显示Rv3641c显著下调宿主细胞IFN-α、IFN-β和下游ISGs基因CXCL10、IFIT2和IL-1β转录水平,同时Rv3641c显著下调IFN-β蛋白表达水平。胞内定殖实验结果显示过表达重组菌感染组,胞内分枝杆菌显著高于空载体组,表明Rv3641c可以促进分枝杆菌胞内存活。结论结核分枝杆菌Rv3641c基因可以抑制宿主Ⅰ型干扰素应答并促进分枝杆菌胞内存活,为深入探究结核分枝杆菌免疫逃逸功能及抗结核药物新靶标挖掘提供了新思路。
关键词
结核分枝杆菌
Ⅰ型干扰素
免疫逃逸
胞内存活
Rv3641c
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
type I interferon
immune escape
intracellular survival
Rv3641c
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
结核分枝杆菌靶向宿主细胞蛋白逃逸免疫杀伤的研究进展
被引量：
2
2
作者
全娟娟
夏爱鸿
孟闯
李昕
姚志鸿
陈祥
徐正中
焦新安
机构
扬州大学/江苏省人兽共患病学重点实验室
/江苏省
动物重要疫病和
人兽
共
患病
防控协同创新中心
农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制
重点
实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期259-263,共5页
基金
国家重点研发计划(No.2018YFD0500500,No.2017YFD0500300)
江苏省自然科学基金(No.BK20201432,No.BK20170493)
+2 种基金
扬州大学科技创新培育基金(No.2019CXJ158)
江苏‘六大人才高峰’(No.SWYY-083)
优势学科建设工程项目(PAPD)联合资助。
文摘
结核分枝杆菌是引发结核病的一种人兽共患病原菌,严重危害人类健康以及公共安全,作为一种兼性胞内感染菌,其引发结核病的关键是破坏宿主免疫防御机制以提高其在胞内生存能力。结核分枝杆菌感染宿主细胞的过程中,分枝杆菌效应蛋白通过与宿主靶蛋白的相互作用来影响细胞凋亡、炎性因子表达、抗原提呈等多种免疫效应,从而逃逸宿主细胞的杀伤,并在机体免疫状态低下时复发从而引起结核病。深入了解结核分枝杆菌效应蛋白和宿主靶蛋白的相互作用及分子机制,将为结核病的防治提供新的线索。
关键词
结核分枝杆菌
宿主细胞
免疫逃逸
蛋白互作
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
host cell
immune escape
protein interaction
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定
被引量：
2
3
作者
汪巧菊
胡雨萌
温亚亚
宋丽
孟闯
潘志明
焦新安
机构
扬州大学/江苏省人兽共患病学重点实验室
/江苏省
动物重要疫病与
人兽
共
患病
防控协同创新中心/农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制
重点
实验室
/教育部农业与农产品安全国际合作联合
实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期157-163,共7页
基金
中国博士后科学基金资助项目(2020M681741)
江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
江苏省重点研发计划(现代农业)重点项目(BE2021331)。
文摘
旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2 S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原。该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内诱导表达S1蛋白,经Ni^(2+)柱亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白的表达情况。结果表明,已成功表达含His标签的S1蛋白,并且已获得浓度和纯度较高、能与S1多克隆抗体反应的目的蛋白。此外,蛋白刺激细胞的结果表明,原核表达的S1蛋白免疫原性良好,能诱导小鼠巨噬细胞上调表达多种细胞因子和趋化因子,促进RAW264.7细胞产生免疫反应。综上,该研究成功构建了pCold I-S1重组质粒,获得了SARS-CoV-2的良好候选抗原S1蛋白。
关键词
SARS-CoV-2
S1蛋白
原核表达
生物活性鉴定
Keywords
SARS-CoV-2
S1 protein
prokaryotic expression
bioactivity identification
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌Rv3641c抑制巨噬细胞Ⅰ型干扰素应答并促进胞内存活的研究
金雯
耿敏
胡苏洁
张馨阳
李文琴
郑成坤
焦新安
陈祥
徐正中
《中国人兽共患病学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌靶向宿主细胞蛋白逃逸免疫杀伤的研究进展
全娟娟
夏爱鸿
孟闯
李昕
姚志鸿
陈祥
徐正中
焦新安
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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下载PDF
职称材料
3
新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定
汪巧菊
胡雨萌
温亚亚
宋丽
孟闯
潘志明
焦新安
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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