高敏荧光免疫层析法的原理及在布鲁氏杆菌病检测中的应用与展望 被引量：1

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作者 马晓菁 钟远军 +7 位作者 薛晓波 叶锋 张家瑞 刘丽娅 章健 谷文喜 李岩 易新萍 《新疆畜牧业》 2025年第2期12-15,共4页

高敏荧光免疫层析法是在时间分辨荧光免疫分析技术基础上建立的,以镧系元素作为抗原(或抗体)示踪标记物的一种超微量快速检测技术,解决了时间分辨荧光免疫分析技术因延迟检测导致荧光弱的缺点,增大了荧光信号强度,从而大大提高了检测灵... 高敏荧光免疫层析法是在时间分辨荧光免疫分析技术基础上建立的,以镧系元素作为抗原(或抗体)示踪标记物的一种超微量快速检测技术,解决了时间分辨荧光免疫分析技术因延迟检测导致荧光弱的缺点,增大了荧光信号强度,从而大大提高了检测灵敏度。布鲁氏杆菌抗体高敏荧光免疫层析法采用免疫竞争原理,以镧系元素铕(Eu)作为荧光标记物,测定免疫反应产物的荧光强度,检测动物血清中的布鲁氏杆菌抗体。该技术具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简单和无放射性等优点,适合在条件有限的实验室及现场开展动物布鲁氏杆菌病快速检测。本文作者介绍了高敏荧光免疫层析法的原理、在动物疫病检测中的应用现状以及在布鲁氏杆菌病快速诊断中的应用前景,旨在为布鲁氏杆菌病现场快速诊断提供快捷实用的方法。 展开更多

关键词 高敏荧光免疫层析 布鲁氏杆菌病 检测 应用

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镧系荧光免疫层析法辅助诊断牛结核病的应用研究

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作者 张家瑞 张力 +5 位作者 李岩 屈勇刚 张旭 剡文亮 殷涛 章健 《中国奶牛》 2025年第8期22-26,共5页

本研究旨在评估镧系荧光免疫层析法对牛结核病的诊断效果。试验采用镧系荧光免疫层析法对24份采集自某奶牛养殖小区的牛结核病阳性淘汰牛血清进行抗体检测,应用荧光定量PCR对与血清对应的淘汰牛的鼻腔拭子进行核酸检测。根据镧系荧光免... 本研究旨在评估镧系荧光免疫层析法对牛结核病的诊断效果。试验采用镧系荧光免疫层析法对24份采集自某奶牛养殖小区的牛结核病阳性淘汰牛血清进行抗体检测,应用荧光定量PCR对与血清对应的淘汰牛的鼻腔拭子进行核酸检测。根据镧系荧光免疫层析法检测结果及鼻腔拭子荧光定量PCR结果,挑选检测结果均为阳性的淘汰牛的肺脏等组织样品送至国家动物结核病专业实验室进行病原菌分型。经调查,24头淘汰牛在皮内变态反应中的72h后皮厚差均大于2mm,IFN-γ体外释放试验阳性率为100%(24/24)。镧系荧光免疫层析法检出阳性血清3份,阴性血清21份。24份鼻腔拭子经荧光定量PCR检测,3份样品出现扩增曲线且Ct值在35.4~35.9,判定为牛结核病核酸阳性。在送至国家动物结核病专业实验室进行PCR检测的3头牛的对应脏器中,有3份肺门淋巴结、3份肺脏样品、1份乳房淋巴结和1份肠系膜淋巴结样品均扩增获得406bp目的条带,判定为牛分枝杆菌核酸阳性。应用镧系荧光免疫层析法检测血清中的抗体对辅助检出具有牛结核病传染风险的牛可提供较为可靠的数据。 展开更多

关键词 牛结核病 奶牛 镧系荧光免疫层析法 抗体检测

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镧系荧光免疫层析法在牛结核病诊断中的应用

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作者 张家瑞 李岩 +8 位作者 樊晓旭 屈勇刚 张力 剡文亮 张旭 孙淑芳 章健 任雪建 陈斯奇 《中国动物检疫》 2025年第10期91-96,共6页

为探究镧系荧光免疫层析法在牛结核病诊断中的应用,经结核菌素皮肤试验(TST)、伽马干扰素(IFN-γ)体外释放试验等背景调查后,采用IDEXX公司的牛分枝杆菌ELISA试剂盒和镧系荧光免疫层析法,对采集自某奶牛场的牛结核病阳性淘汰牛的30份血... 为探究镧系荧光免疫层析法在牛结核病诊断中的应用,经结核菌素皮肤试验(TST)、伽马干扰素(IFN-γ)体外释放试验等背景调查后,采用IDEXX公司的牛分枝杆菌ELISA试剂盒和镧系荧光免疫层析法,对采集自某奶牛场的牛结核病阳性淘汰牛的30份血清进行抗体检测,同时应用荧光定量PCR对血清来源牛的鼻腔拭子进行核酸检测。根据镧系荧光免疫层析法检测结果及鼻腔拭子荧光定量PCR结果,挑选有代表性病变的淘汰牛肺门淋巴结样品送至国家动物结核病参考实验室进行病原学检测。结果显示:30头淘汰牛的首次TST阳性检出率为100%(30/30),首次检疫后45 d,所有牛的皮厚差均大于2 mm;IFN-γ体外释放试验阳性检出率为66.66%(20/30);经与ELISA试剂盒检测比对,镧系荧光免疫层析法的敏感性为75%,特异性为100%,与ELISA的总符合率为93.33%,两种方法的Kappa值为0.815,且差异不显著(P=0.124>0.05)。30份鼻腔拭子经荧光定量PCR检测,4份样品出现扩增曲线且Ct值为34.6~35.0,判定为牛分枝杆菌核酸阳性。送至国家动物结核病参考实验室进行荧光定量PCR检测的2份镧系荧光抗体阴性血清来源牛的对应肺门淋巴结样品无扩增曲线及Ct值;4份牛分枝杆菌核酸阳性血清来源牛有病变的肺门淋巴结样品中,有3份出现扩增曲线且Ct值为28.7~32.5,判定为牛分枝杆菌核酸阳性。结果表明,镧系荧光免疫层析法具有高特异性和较高敏感性,且与ELISA试剂盒符合性较好,一致性强,对辅助检出牛结核病传染风险牛可提供较为可靠的数据。 展开更多

关键词 牛结核病 镧系荧光免疫层析法 奶牛 抗体检测

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高敏荧光层析法在骆驼布鲁氏菌病流行病学调查中的应用 被引量：4

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作者 马晓菁 努尔巴哈提·努尔旦 +6 位作者 刘丽娅 李威 剡文亮 叶锋 谷文喜 章健 易新萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期466-470,共5页

目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布... 目的了解新疆部分地区骆驼布鲁氏菌病(简称布病)流行情况,探索高敏荧光层析法在骆驼布病流行病学调查中的应用。方法分别在新疆阿勒泰地区、塔城地区、和田地区、伊犁地区、博尔塔拉蒙古自治州采集骆驼血清2000份,骆驼乳307份。应用布病虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)进行骆驼布病血清学调查。提取骆驼乳基因组DNA,应用实时荧光PCR(Realtime-PCR)和AMOS-PCR方法进行病原学检测并分型。同时应用高敏荧光层析法对200份骆驼血清和100份骆驼乳样进行布病符合率检测。结果新疆5个地区骆驼血清SAT确诊阳性31份,布病血清学阳性率为1.55%(31/2000)。307份骆驼乳经Realtime-PCR检测,5份骆驼乳出现扩增曲线且Ct值在29.65~33.68,骆驼乳布鲁氏菌核酸阳性率为1.63%(5/307)。其中2份骆驼乳提取基因组DNA经AMOS-PCR扩增获得498 bp目的条带,测序并在NCBI进行BLAST比对分析,结果与牛种生物I型布鲁氏菌序列同源性在99.8%~100%。高敏荧光层析法检出骆驼布病阳性血清33份,阴性血清167份,该方法敏感性为96.77%,特异性为98.22%,与SAT检测方法总体符合率为98%,两种方法的Kappa值为0.925。高敏荧光层析法对100份骆驼乳检出布病抗体阳性乳7份,阴性乳93份,该方法与病原学检测方法(Realtime-PCR)总体符合率为98%。结论布鲁氏菌高敏荧光层析法具有灵敏度和特异度高的优点,且与布病常规检测方法符合率较好,可用于骆驼布病现场快速检测。骆驼布病流行病学调查数据提示应加强骆驼布病防控,同时加强骆驼乳的食品安全监管。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 骆驼 高敏荧光 流行病学

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时间分辨荧光免疫分析技术的研究进展 被引量：20

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作者 王泽洲 吴俊清 +3 位作者 张永宁 章健 吴宣 吴冠英 《四川畜牧兽医》 2015年第7期34-37,共4页

时间分辨荧光免疫分析技术是一种新型的超微量免疫标记分析方法,集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身,具有无放射性、无背景光干扰、灵敏、稳定、线性范围宽、操作简便、分析速度快等优点,已广泛应用于临床医学检测、食品安全... 时间分辨荧光免疫分析技术是一种新型的超微量免疫标记分析方法,集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身,具有无放射性、无背景光干扰、灵敏、稳定、线性范围宽、操作简便、分析速度快等优点,已广泛应用于临床医学检测、食品安全快速检测等领域。本文就时间分辨荧光免疫分析的原理及在兽医学中的应用作一综述。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫分析 兽医学 应用

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猪瘟抗体镧系荧光免疫层析法的建立 被引量：11

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作者 王泽洲 王琴 +3 位作者 赵启祖 吴俊清 章健 吴冠英 《四川畜牧兽医》 2018年第6期26-28,32,共4页

本研究以纯化的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白和纯化全病毒为抗原,用镧系元素铕(Eu)为荧光标记,建立了猪瘟抗体镧系荧光免疫层析快检法,经特异性、敏感性、重复性试验,表明该方法具有敏感性和特异性强、重复性好、快速、无辐射、高通量等优... 本研究以纯化的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白和纯化全病毒为抗原,用镧系元素铕(Eu)为荧光标记,建立了猪瘟抗体镧系荧光免疫层析快检法,经特异性、敏感性、重复性试验,表明该方法具有敏感性和特异性强、重复性好、快速、无辐射、高通量等优点,且操作简单、省时省力,该方法完全可以用于CSF抗体检测和免疫效价评估。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 镧系荧光免疫层析法(LFICA) 检测

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猪蓝耳病抗体高敏荧光免疫层析快检试剂盒的研制 被引量：5

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作者 王泽洲 张毅 +3 位作者 吴俊清 章健 陈弟诗 贺冬梅 《四川畜牧兽医》 2019年第11期27-29,32,共4页

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记建立了检测猪蓝耳病病毒抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒,经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的比对试验,表明该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高;且质量稳定,保质期长,是实现... 本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记建立了检测猪蓝耳病病毒抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒,经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的比对试验,表明该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高;且质量稳定,保质期长,是实现猪蓝耳病即时现场快速检测的简单而实用的血清学检测方法。 展开更多

关键词 猪蓝耳病毒 镧系荧光免疫层析检测法 抗体检测

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猪圆环病毒病抗体高敏荧光免疫层析快检试剂盒的研制 被引量：5

8

作者 王泽洲 吴俊清 +3 位作者 章健 陈弟诗 张毅 贺冬梅 《四川畜牧兽医》 2019年第12期22-25,共4页

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PCV-2表达蛋白抗原建立了检测猪圆环病毒病抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高,... 本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PCV-2表达蛋白抗原建立了检测猪圆环病毒病抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高,且质量稳定,保质期长,是实现猪圆环病毒病即时现场快速检测的简单而实用的血清学检测方法。 展开更多

关键词 猪圆环病毒 镧系荧光免疫层析检测法 抗体检测

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两种检测猪瘟和猪伪狂犬病毒抗体方法比较 被引量：2

9

作者 谢玉洁 占松鹤 +3 位作者 何长生 章健 张贺森 李郁 《中国畜禽种业》 2019年第9期92-94,共3页

为评价Wellray CSFV和PRV抗体快速检测方法在临床样品检测中的适用性,将其与IDEXX公司ELISA抗体检测方法进行比较试验。试验对177份血清进行CSFV抗体、PRV gB和PRV gE抗体的对比检测。结果显示,Wellray CSFV抗体快速检测方法与IDEXX公司... 为评价Wellray CSFV和PRV抗体快速检测方法在临床样品检测中的适用性,将其与IDEXX公司ELISA抗体检测方法进行比较试验。试验对177份血清进行CSFV抗体、PRV gB和PRV gE抗体的对比检测。结果显示,Wellray CSFV抗体快速检测方法与IDEXX公司ELISA抗体检测方法的符合率、相对敏感性、相对特异性分别为87.72%、96%、81.25%,Kappa值=0.756,PRVgB抗体分别为92.06%、91.67%、92.59%,Kappa值=0.839,PRVgE抗体分别为84.21%、85.71%、83.33%,Kappa值=0.671。结果表明,Wellray CSFV和PRV抗体快速检测方法与IDEXX公司ELISA抗体检测方法的符合率、相对敏感性、相对特异性都较高,且不需要昂贵复杂的仪器设备,15min内即可完成检测,能更好地适应基层检测的实际需求。 展开更多

关键词 猪瘟病毒抗体 猪伪狂犬病病毒 gB和gE抗体 检测方法 符合率 比较

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禽流感高敏荧光免疫分析快检试剂盒的研制与应用 被引量：4

10

作者 王泽洲 吴俊清 +3 位作者 章健 吴冠英 陈弟诗 贺冬梅 《四川畜牧兽医》 2019年第8期25-27,29,共4页

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用禽流感通用型和H7亚型单克隆抗体,研制了检测禽流感抗原的镧系高敏荧光免疫分析快检试剂盒(LFICA),经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,表明该快检试剂盒(LFICA)特异性强,敏感性高... 本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用禽流感通用型和H7亚型单克隆抗体,研制了检测禽流感抗原的镧系高敏荧光免疫分析快检试剂盒(LFICA),经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,表明该快检试剂盒(LFICA)特异性强,敏感性高,重复性好,是目前禽流感病原快速诊断初筛和流行病学调查最快捷、简单和实用的诊断检测方法。 展开更多

关键词 禽流感 镧系荧光免疫分析 试剂盒 检测

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禽流感病毒三种病原学检测方法的比较研究 被引量：1

11

作者 陈弟诗 陈斌 +3 位作者 章健 邱明双 邓飞 王泽洲 《四川畜牧兽医》 2019年第4期27-30,共4页

为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明... 为了分析比较不同的商品化检测方法在禽流感病毒快速诊断中的实用性,本试验运用禽流感高敏快速荧光免疫法、胶体金免疫层析纸条法和实时荧光RT-PCR三种方法同时对禽流感病毒H5、H7和H9三个亚型抗原各12个稀释度的样本进行检测。结果表明,禽流感高敏快速荧光免疫法对三种亚型抗原的灵敏度较高,各亚型检出最低稀释度分别为H5:1∶2 560,H7:1∶1 280,H9:1∶640,该方法快捷简便,且设备便携,通过云平台处理数据,适用于现场即时检测(POCT)等;进口胶体金免疫层析纸条法对H5、H9亚型抗原的灵敏度高,对H7亚型抗原的灵敏度较低,且国内产品存在假阳性、准确性较低等缺点,但均操作简单,适用于基层初筛;实时荧光RT-PCR法对三种亚型抗原的灵敏度高,稀释度均可达1∶40 960以上,但耗时长,设备和技术要求相对较高,更适用于实验室确诊。 展开更多

关键词 禽流感病毒 高敏快速荧光免疫法 胶体金免疫层析纸条法 实时荧光RT-PCR法

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猪伪狂犬病gE、gB抗体镧系荧光免疫层析快检试剂盒的研制及效果评估 被引量：1

12

作者 王泽洲 陈弟诗 +3 位作者 张毅 吴俊清 章健 贺冬梅 《四川畜牧兽医》 2020年第1期33-37,共5页

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PRV-gE和PRV-gB表达蛋白抗原建立了检测猪伪狂犬病gE、gB抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性... 本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PRV-gE和PRV-gB表达蛋白抗原建立了检测猪伪狂犬病gE、gB抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高,且质量稳定,保质期长,是实现猪伪狂犬病即时现场快速检测的一种血清学检测方法。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 镧系荧光免疫层析检测法 抗体检测

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布鲁氏菌抗体镧系高敏荧光快速检测试剂盒的研制 被引量：1

13

作者 章健 侯巍 +5 位作者 张朝辉 曲伍 李劲 尹杰 郇敏 王泽洲 《四川畜牧兽医》 2023年第8期22-25,共4页

本试验选用镧系元素铕(Eu)为荧光物质标记布鲁氏菌脂多糖抗原(LPS),建立了布鲁氏菌抗体高敏荧光免疫层析快速检测试剂盒(Bru-LFICA)。经相关试验验证,得出该试剂盒特异性强,敏感性高,重复性好,符合率高,且兼具操作方便,检测快速(15 min)... 本试验选用镧系元素铕(Eu)为荧光物质标记布鲁氏菌脂多糖抗原(LPS),建立了布鲁氏菌抗体高敏荧光免疫层析快速检测试剂盒(Bru-LFICA)。经相关试验验证,得出该试剂盒特异性强,敏感性高,重复性好,符合率高,且兼具操作方便,检测快速(15 min),价廉,不需特殊设备和专业技术人员等优点,特别适合于基层兽医站、养殖场的即时快速检测。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 镧系荧光免疫层析检测法 抗体 试剂盒

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宠物新冠病毒抗原红乳胶免疫试剂卡检测方法的建立 被引量：2

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作者 章健 杨苗 +5 位作者 陈弟诗 岳建国 林华 严涛 李明伟 王泽洲 《现代畜牧科技》 2023年第3期1-6,共6页

宠物(猫、犬)作为人类的伴侣动物,正突飞猛进的增长,越来越多的进入社会家庭,尤其老人、单身和丁克家庭。新冠病毒传染性极强,猫、犬可带毒但不表现症状,病人或无症状阳性人员因密接宠物,有可能传染给猫、犬,通过猫、犬的活动又污染环... 宠物(猫、犬)作为人类的伴侣动物,正突飞猛进的增长,越来越多的进入社会家庭,尤其老人、单身和丁克家庭。新冠病毒传染性极强,猫、犬可带毒但不表现症状,病人或无症状阳性人员因密接宠物,有可能传染给猫、犬,通过猫、犬的活动又污染环境或可传染给其他人,对宠物新冠抗原的检测是有效防控新冠疫情的重要举措,对公共卫生安全具有重要意义。本试验采用红色乳胶微球标记新型冠状病毒N蛋白单抗,建立宠物新冠病毒抗原红乳胶免疫试剂盒。试验结果表明该试剂盒的灵敏度高(150 pg/mL),特异性强(与其他19病毒或病菌抗原无交叉反应),操作简便,快捷,15 min出结果,具有良好的稳定性和重复性,可用于宠物(猫、犬)新冠病毒抗原的快速检查。 展开更多

关键词 乳胶微球 新型冠状病毒 试剂盒 宠物

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