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miR-29a-3p靶向肝癌衍生生长因子抑制E6-1细胞增殖并促进其凋亡 被引量:4
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作者 周箭 黄纯兰 +2 位作者 刘恒伟 曾昭宇 谭竞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1650-1654,共5页
目的:探讨miRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对肝癌衍生生长因子(HDGF)的调控作用以及急性淋巴细胞白血病细胞系E6-1增殖、凋亡的影响。方法:选择2017年1月-2019年1月在本院就诊的急性淋巴细胞白血病患者35例,同期进行健康体检的成人35例为健康... 目的:探讨miRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对肝癌衍生生长因子(HDGF)的调控作用以及急性淋巴细胞白血病细胞系E6-1增殖、凋亡的影响。方法:选择2017年1月-2019年1月在本院就诊的急性淋巴细胞白血病患者35例,同期进行健康体检的成人35例为健康对照组。将miR-29a-3p过表达载体、miR-29a-3p抑制表达载体以及miR-29a-3p和HDGF联合过表达载体转染至E6-1细胞中,用RT-qP CR检测miR-29a-3p和ma-3p HDGF mRNA的表达水平,Western blot检测蛋白表达,双荧光素酶报告实验检测iR-29和HDGF的靶向关系,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:与健康对照组相比,急性淋巴细胞白血病患者血清及细胞mHuT78、E6-1、CCRF-CEM中HDGF高表达,iR-29a-3p低表达(P<0.05)。过表达miR-29a-3p后,白血病细胞E6-1中CyclinD1、Bcl-2表达水平显著降低,p21、Bax表达水平显著升高,E6-1细胞活性显著降低,凋亡率显著升高(均Pm<0.05)。miR-29a-3p能靶向调控HDGF表达,过表达HDGF逆转了iR-29a-3p过表达对白血病细胞E6-1的增殖抑制和凋亡促进作用。结论:miR-29a-3p过表达可抑制急性淋巴细胞白血病细胞E6-1的增殖、促进其凋亡,其机制可能与调控HDGF的表达有关。 展开更多
关键词 miRNA-29a-3p 肝癌衍生生长因子 急性淋巴细胞白血病 增殖 凋亡
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235例急性髓系白血病患者血浆游离DNA FLT3-ITD的检测及临床意义 被引量:2
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作者 钟凌 孟文彤 +2 位作者 郑沁 周健 贾永前 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期1144-1148,共5页
本研究检测急性髓系白血病(AML)患者外周血血浆游离DNAFLT3内部串联重复序列(internal tandem duplication,ITD)并探讨其临床意义。提取235例AML患者血浆游离DNA并以PCR扩增看家基因globin作为判定标准,通过PCR方法检测FLT3-ITD,并与骨... 本研究检测急性髓系白血病(AML)患者外周血血浆游离DNAFLT3内部串联重复序列(internal tandem duplication,ITD)并探讨其临床意义。提取235例AML患者血浆游离DNA并以PCR扩增看家基因globin作为判定标准,通过PCR方法检测FLT3-ITD,并与骨髓或外周血白血病细胞DNA检测结果进行比较。结果表明:235例AML患者中,190例患者血浆游离DNA扩增出globin基因。188例初诊、复发或难治患者中,血浆游离DNA发生FLT3-ITD突变35例(19%,35/188),与病人白血病细胞DNA检测结果完全一致。47例临床缓解患者中,有2例血浆游离DNA扩增出globin基因并检出FLT3-ITD突变,而其细胞来源DNA均为阴性。2例患者均早期复发。与FLT3-野生型(wt)相比,FLT3-ITD突变患者白细胞计数、CD7、CD56表达等明显升高,CR率降低。结论:AML患者血浆中可以检测出白血病细胞特异性的血浆游离DNA,与直接检测白血病细胞结果一致。对骨髓缓解期病人残留白血病(MRD)的检测,血浆游离DNA具有更高的敏感性。FLT3-ITD的检测对AML患者的预后及疗效判断有重要意义。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 血浆 脱氧核糖核酸 FLT3-ITD
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雷公藤内酯醇通过Nrf2/ARE信号通路调控淋巴瘤细胞增殖、凋亡的机制研究 被引量:2
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作者 周箭 黄纯兰 +2 位作者 刘恒伟 曾昭宇 谭竞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期687-690,共4页
目的:探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人源套细胞淋巴瘤细胞JeKo-1增殖、凋亡的影响,以及Nrf2/ARE信号通路的可能作用。方法:常规条件培养JeKo-1细胞,不同浓度TPL(0、25、50、100 ng/ml)处理细胞,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率;Wes... 目的:探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人源套细胞淋巴瘤细胞JeKo-1增殖、凋亡的影响,以及Nrf2/ARE信号通路的可能作用。方法:常规条件培养JeKo-1细胞,不同浓度TPL(0、25、50、100 ng/ml)处理细胞,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测Ki67、Bcl-2、Bax、Nrf2、NQO-1和HO-1蛋白表达。qRT-PCR和Western blot检测TPL对转染Nrf2 pcDNA的mRNA和蛋白表达的影响,观察TPL对Nrf2/ARE信号通路增殖和凋亡的作用。结果:随着TPL浓度增加,TPL明显抑制JeKo-1细胞活力,促进细胞凋亡,下调Ki67、Bcl-2、Nrf2、NQO-1和HO-1蛋白表达,上调Bax蛋白表达,且呈剂量依赖性。与TPL+vector组相比,TPL+Nrf2 pcDNA组Nrf2 mRNA和蛋白表达显著增加,细胞活力显著提高,凋亡率显著降低,Ki67、Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调。结论:TPL可明显抑制JeKo-1细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与Nrf2/ARE信号通路有关。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 Nrf2/ARE信号通路 淋巴瘤细胞 增殖 凋亡
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BD和BAD化疗方案治疗多发性骨髓瘤的疗效比较 被引量:8
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作者 郑琳 陈果 李黎博 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第3期435-438,共4页
目的:分析BD(硼替佐米+地塞米松)、BAD(硼替佐米+地塞米松+阿霉素)化疗方案治疗多发性骨髓瘤(MM)的疗效。方法:MM患者90例,采用BD、BAD方案化疗各45例,均治疗4个疗程后评估疗效,比较两组化疗前后血清胱抑素C(Cys-C)、尿素(Urea)、肌酐(S... 目的:分析BD(硼替佐米+地塞米松)、BAD(硼替佐米+地塞米松+阿霉素)化疗方案治疗多发性骨髓瘤(MM)的疗效。方法:MM患者90例,采用BD、BAD方案化疗各45例,均治疗4个疗程后评估疗效,比较两组化疗前后血清胱抑素C(Cys-C)、尿素(Urea)、肌酐(Scr)、β2-微球蛋白(β2-MG)水平及骨髓瘤细胞比例,比较两组不良反应发生率和复发率。结果:BAD组总有效率93. 3%,高于BD组的73. 3%(P <0. 05)。BAD组、BD组不良反应发生率分别为28. 9%、22. 2%,复发率分别为8. 9%、13. 3%,差异均无统计学意义(P> 0. 05)。化疗后两组血清Cys-C、Urea、Scr、β2-MG及骨髓瘤细胞比例均较治疗前下降,且BAD组下降幅度大于BD组(P <0. 05)。结论:BD、BAD化疗方案对MM均有一定疗效,BAD方案优于BD方案。 展开更多
关键词 BD方案 BAD方案 多发性骨髓瘤 肾功能
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SARS-CoV-2核衣壳蛋白预测与原核重组表达应用 被引量:1
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作者 秦小波 高华 +1 位作者 张冰冰 高继海 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期17-22,共6页
为了优化构建SARS-CoV-2核衣壳蛋白原核表达载体并获得大肠杆菌表达的重组融合蛋白,研究利用公开的基因组数据与在线各蛋白质预测工具分析SARS-CoV-2核衣壳蛋白与其他β-CoV核衣壳蛋白的异同,以及二、三级结构情况;为合成、构建大肠杆... 为了优化构建SARS-CoV-2核衣壳蛋白原核表达载体并获得大肠杆菌表达的重组融合蛋白,研究利用公开的基因组数据与在线各蛋白质预测工具分析SARS-CoV-2核衣壳蛋白与其他β-CoV核衣壳蛋白的异同,以及二、三级结构情况;为合成、构建大肠杆菌表达系统密码子优化的SARS-CoV-2核衣壳蛋白原核表达载体提供辅助。基于生物信息分析,设计并构建含His标签的重组原核载体pET-N,转化BL21大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白,亲和层析法纯化重组融合蛋白,并经SDS-PAGE与Western Blot进行鉴定。预测分析了SARS-CoV-2核衣壳蛋白的序列特征与结构情况;并成功获得原核表达重组载体pET-N,发现其重组融合蛋白在上清液与包涵体中都存在,通过破碎包涵体,纯化获取目的蛋白,为间接ELISA法检测感染者血清中抗体所需的ELISA包被抗原提供参考。 展开更多
关键词 冠状病毒 核衣壳蛋白 SARS-CoV-2 原核表达 间接ELISA
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