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表没食子儿茶素没食子酸酯通过减弱HMGB1/TLR4/NF-κB/NLRP3途径改善脓毒症后急性肝损伤 被引量:6
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作者 李飞 吴传新 +3 位作者 何佳辉 张杰 刘慧玲 孙航 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1012-1021,共10页
目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在脓毒症后急性肝损伤中的保护作用及潜在机制。方法8~10周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为盲肠结扎穿刺术(CLP)组(脓毒症后急性肝损伤模型小鼠)、CLP+EGCG低剂量(4 mg/kg,皮下注射)组、CLP+EGCG高剂... 目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在脓毒症后急性肝损伤中的保护作用及潜在机制。方法8~10周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为盲肠结扎穿刺术(CLP)组(脓毒症后急性肝损伤模型小鼠)、CLP+EGCG低剂量(4 mg/kg,皮下注射)组、CLP+EGCG高剂量(8 mg/kg,皮下注射)组和假手术组(n=6)。人正常肝细胞(L02细胞)根据干预方式不同分为脂多糖(400 ng/mL,脓毒症后急性肝损伤细胞模型)组、脂多糖(400 ng/mL)+高迁移率族蛋白B1(HMGB1)(100 ng/mL)组、脂多糖(400 ng/mL)+EGCG(100μg/mL)组和对照组(加入PBS)组。术后24 h收集小鼠全血并分离肝组织,采用全自动生化分析仪检测小鼠血常规及肝功能,通过H-E染色观察肝组织病理学变化。采用ELISA检测小鼠血清及L02细胞培养上清液中炎症因子(HMGB1、TNF-α、IL-6)表达,采用蛋白质印迹法检测小鼠肝组织及L02细胞中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、焦亡相关蛋白[消皮素D(GSDMD)、caspase 1、caspase 11、IL-1β、IL-18]的表达,采用免疫组织化学染色分析小鼠肝组织中HMGB1、GSDMD的表达及定位情况。结果CLP组小鼠白细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数均低于假手术组(P均<0.05),血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)均高于假手术组(P均<0.01),提示脓毒症后急性肝损伤模型小鼠构建成功。与CLP组相比,CLP+EGCG低剂量、高剂量组小鼠ALT、AST、HMGB1、TNF-α、IL-6表达水平均降低(P均<0.05),且这些指标在CLP+EGCG高剂量组较CLP+EGCG低剂量组降低更显著(P均<0.05)。组织病理学提示CLP+EGCG低剂量、高剂量组小鼠肝组织损伤较CLP组减轻,且以高剂量组较为显著。CLP+EGCG低剂量、高剂量组小鼠肝组织中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、NLRP3和焦亡相关蛋白的表达水平均低于CLP组(P均<0.05),且以高剂量组降低更为明显(P均<0.05)。免疫组织化学染色显示GSDMD主要表达于肝细胞的细胞质内,而HMGB1在细胞质和细胞核均有表达;CLP+EGCG低剂量、高剂量组小鼠肝组织中HMGB1和GSDMD的表达均较CLP组减少(P均<0.05),且CLP+EGCG高剂量组降低更为明显(P均<0.05)。脂多糖组、脂多糖+EGCG组及对照组细胞培养上清液中HMGB1、TNF-α和IL-6的表达水平均低于脂多糖+HMGB1组(P均<0.05),且该3个指标在脂多糖+EGCG组降低较脂多糖组更为显著(P均<0.05)。脂多糖+HMGB1组中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、NLRP3和焦亡相关蛋白的表达水平均高于脂多糖组、脂多糖+EGCG组和对照组(P均<0.05),且脂多糖+EGCG组上述蛋白质的表达水平低于脂多糖组(P均<0.05)。结论EGCG对脓毒症后急性肝损伤有保护作用,其机制可能与通过减弱HMGB1/TLR4/NF-κB/NLRP3途径降低肝细胞焦亡有关。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 脓毒症 急性肝损伤 高迁移率族蛋白B1 细胞焦亡
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全反式视黄酸预防性给药可减轻类风湿关节炎模型大鼠的炎症 被引量:1
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作者 曾香 单靖焱 +5 位作者 刘杨 宁艳花 谢雪健 申雨燕 宋杰 李云 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期172-177,共6页
目的探索全反式视黄酸(ATRA)对Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的类风湿关节炎模型(CIA)大鼠关节炎形成期关节组织结构、血清中相关炎性细胞因子表达水平,以及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响。方法将6~8周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂... 目的探索全反式视黄酸(ATRA)对Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的类风湿关节炎模型(CIA)大鼠关节炎形成期关节组织结构、血清中相关炎性细胞因子表达水平,以及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响。方法将6~8周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、ATRA各剂量组,给予溶剂对照组和ATRA各剂量组大鼠尾部皮内注射CⅡ和不完全弗氏佐剂诱导类风湿关节炎,空白对照组大鼠以相同方式给予等量生理盐水。自初次免疫第2天起,ATRA各剂量组大鼠腹腔注射不同剂量(0.05、0.5、5 mg/kg)的ATRA油剂,溶剂对照组腹腔注射等体积玉米油,空白对照组腹腔注射等体积生理盐水,每周3次,连续3周。观察ATRA对大鼠关节炎指数(AI)评分、膝踝关节组织病理形态学、血清中相关炎性细胞因子的表达水平及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响。结果自初次免疫第15天起,ATRA各剂量组和溶剂对照组AI值均显著高于空白对照组(P<0.05),溶剂对照组AI值趋于平稳,ATRA各剂量组AI值呈上升趋势,且低于溶剂对照组(P<0.05);膝踝关节病理切片可见,ATRA各剂量组和溶剂对照组踝关节结构出现严重紊乱,但组间关节损伤的半定量评分差异无统计学意义(P>0.05);此外,与溶剂对照组相比,ATRA各剂量组白介素-17A(IL-17A)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌减少(P<0.05),白介素-10(IL-10)分泌增多(P<0.05);膝关节中解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS-4)和基质金属蛋白酶(MMP-3)表达下调(P<0.05),其余软骨损伤相关蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论在胶原诱导关节炎形成期,ATRA可抑制TNF-α、IL-17A等促炎因子的分泌,促进IL-10的分泌,从而减轻CIA大鼠关节炎形成期的炎症反应。说明ATRA在关节炎形成期可延缓疾病的进展,其作用机制可能与纠正Th1/Th2及Th17/Treg失衡有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 胶原诱导性关节炎 全反式视黄酸
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MPO基因多态性与KD患儿冠状动脉损伤及IVIG联合肝素治疗疗效的相关性研究 被引量:4
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作者 赵宗秀 石坤 +1 位作者 朱波 肖雪清 《海南医学院学报》 CAS 2019年第7期519-523,529,共6页
目的:探讨髓过氧化酶(MPO)基因多态性与川崎病(KD)患儿冠状动脉损伤及其与人免疫球蛋白(IVIG)联合肝素治疗效果的相关性。方法:选取在我院接受治疗的78例KD患儿和65例正常儿童作为研究对象,分别作为KD组和对照组,将KD组患儿根据是否合... 目的:探讨髓过氧化酶(MPO)基因多态性与川崎病(KD)患儿冠状动脉损伤及其与人免疫球蛋白(IVIG)联合肝素治疗效果的相关性。方法:选取在我院接受治疗的78例KD患儿和65例正常儿童作为研究对象,分别作为KD组和对照组,将KD组患儿根据是否合并冠状动脉损伤分为冠状动脉损伤组(36例)和无冠状动脉损伤组(42例)。收集应用聚合酶链-内切酶片段(PCR-RFLP)法测定KD组和对照组MPO基因的单核苷酸多态性(SNP)位点多态性分布,收集患儿的临床资料,比较各组间基因型频率分布和等位基因频率分布情况。所有KD患儿接受上静脉滴注静注IVIG联合皮下注射低分子肝素钙治疗,分析MPO基因多态性和患儿治疗效果之间的相关性。结果:两组3种基因型(AA、AG、GG)的频率比较,差异具有统计学意义(χ~2=11.249,P=0.004);KD组G的等位基因频率显著高于对照组(χ~2=6.706,P=0.009)。KD组中冠状动脉损伤组各基因型频率分布与非冠状动脉损伤组比较,差异具有统计学意义(P<0.05),冠状动脉损伤组G等位基因频率显著高于非冠状动脉损伤组(P<0.05)。KD组治疗总有效率为75.64%,AG+AA基因型和GG基因型患儿治疗总有效率分别为94.12%和70.49%,比较差异具有统计学意义(χ~2=4.028,P=0.045);不同基因型患儿治疗后冠状动脉直径较治疗前均显著减小,其中GA+AA基因型较GG基因型显著减少(P<0.05);GA+AA基因型患儿总发热时间、充血与水肿消退时间、淋巴结肿大消退时间均显著短于GG基因型(P<0.05)。结论:MPO基因SNP位点多态性可能与KD患儿冠状动脉损伤的发生有关,其中G等位基因可能是风险因子。此外,MPO基因该位点多态性与IVIG联合肝素治疗KD的疗效有关,其可能是IVIG联合肝素疗效的有效预测因子。 展开更多
关键词 川崎病 冠状动脉损伤 MPO基因 单核苷酸多态性
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