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大熊猫国家公园成都片区周边社区犬只弓形虫感染情况调查
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作者 杨琬婧 樊星 +8 位作者 燕霞 苏小艳 刘颂蕊 侯蓉 杨梅 陈红 刘梅龄 李林 岳婵娟 《四川动物》 北大核心 2025年第2期213-219,共7页
大熊猫国家公园是我国野生大熊猫Ailuropoda melanoleuca重要的自然栖息地,其周边村落饲养犬只较多,但犬只感染弓形虫Toxoplasma gondii的情况和数据并不清楚。为掌握大熊猫公园成都片区毗邻的村落犬只弓形虫感染情况及潜在风险因素,于2... 大熊猫国家公园是我国野生大熊猫Ailuropoda melanoleuca重要的自然栖息地,其周边村落饲养犬只较多,但犬只感染弓形虫Toxoplasma gondii的情况和数据并不清楚。为掌握大熊猫公园成都片区毗邻的村落犬只弓形虫感染情况及潜在风险因素,于2022—2023年对大熊猫国家公园成都片区周边毗邻的11个村/镇/社区饲养犬只居民进行逐户走访、问卷调查,收集了犬只性别、年龄、犬种数据,并采集了63份犬只的血液样本。通过酶联免疫吸附试验与PCR检测样品中弓形虫抗体及核酸,结果显示弓形虫核酸阳性率为0%(0/63),弓形虫抗体阳性率为33.33%(21/63),不同犬种(宠物犬、田园犬)间的感染率有显著性差异(P<0.05)。研究结果可为大熊猫国家公园成都片区周边犬只弓形虫的防控预警提供科学数据。 展开更多
关键词 大熊猫国家公园 家犬 弓形虫
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大熊猫国家公园广元片区野生动物及其环境源大肠杆菌流行病学及耐药性调查 被引量:1
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作者 苏小艳 杨梅 +7 位作者 燕霞 侯蓉 肖梅 王劲松 刘圣 王路才 张文平 黄虹秀 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期430-442,共13页
为了解大熊猫国家公园广元片区野生动物及其生活环境中大肠杆菌流行病学特点,防止大肠杆菌在该区域造成流行性疫病,探明该区域野生动物对抗生素的耐药情况,本研究2022年8—9月采集大熊猫国家公园广元片区内野生动物粪便、水及土壤样品共... 为了解大熊猫国家公园广元片区野生动物及其生活环境中大肠杆菌流行病学特点,防止大肠杆菌在该区域造成流行性疫病,探明该区域野生动物对抗生素的耐药情况,本研究2022年8—9月采集大熊猫国家公园广元片区内野生动物粪便、水及土壤样品共计243份,采用16S rRNA、K-B法、高通量荧光定量PCR法和PCR技术对该区域的大肠杆菌进行分离鉴定、药敏实验、耐药基因和毒力基因检测。结果显示:243份样品中共分离鉴定出86株大肠杆菌,分离率为35.39%;该区域内分离到的大肠杆菌对阿莫西林有较高的耐药率(52.33%),对链霉素、庆大霉素等抗生素的耐药率较低(1.16%~9.30%),对头孢他啶、氯霉素、氟苯尼考、甲氧苄氨嘧啶均敏感;携带大量的耐药基因,其中多重耐药类(83.14%)、磺胺类(55.52%)、四环素类(48.52%)抗生素耐药基因携带率较高,其余耐药基因携带率为26.16%~35.72%;分离株携带1~6个毒力基因,irp2检出率(91.86%)最高,其次为ompA、ibeB和tsh(检出率分别为55.81%、69.77%和52.33%),FyuA、fimH和PapA检出率较低(分别为17.44%、19.77%和1.16%);86株大肠杆菌中均未检出5种致泻性大肠杆菌。本研究为大熊猫国家公园广元片区野生动物及环境源大肠杆菌的流行情况提供了科学数据参考,为人兽共患病的防控提供生态学依据。 展开更多
关键词 大熊猫国家公园广元片区 大肠杆菌 流行情况 耐药性 毒力基因
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白血病抑制因子(LIF)过表达对大熊猫骨髓间充质干细胞生长的影响
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作者 李非平 张梦诗 +5 位作者 王神飞 胡贤彪 刘玉良 侯蓉 刘项宇 蔡开来 《兽类学报》 北大核心 2025年第3期295-301,共7页
白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)是一种调节细胞生长、增殖和分化的重要因子。骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BM‑MSCs)在组织损伤修复、自身免疫疾病治疗中具有广阔的应用前景,对大熊猫等濒危... 白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)是一种调节细胞生长、增殖和分化的重要因子。骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BM‑MSCs)在组织损伤修复、自身免疫疾病治疗中具有广阔的应用前景,对大熊猫等濒危动物的疾病治疗和遗传保护方面有着巨大的潜力。本研究旨在构建大熊猫LIF过表达载体,应用脂质体转染大熊猫骨髓间充质干细胞(Panda bone marrow mesenchymal stem cells,PDBM‑MSCs),研究LIF对PDBM‑MSCs生长的影响。本研究从PDBM‑MSCs cDNA中扩增LIF基因CDS区,无缝克隆连接至pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑GFP+puro过表达载体上,构建LIF过表达重组质粒,利用Lipo3000转染重组质粒至PDBM‑MSCs中。研究结果显示,转染48 h后PDBM‑MSCs表达绿色荧光,转染72 h后分别提取细胞总RNA,反转录成cDNA,经q‑PCR检测发现,转染后LIF过表达组相比阴性对照组LIF的mRNA表达水平显著提高。同时,LIF过表达后能够显著上调细胞周期调控基因CCNB2、CDK7在mRNA水平上的表达,显著下调凋亡基因cas⁃pase3、P53、P16、P21在mRNA水平上的表达;转染72 h后流式检测显示转染LIF过表达重组质粒的PDBM‑MSCs细胞活率显著高于阴性对照组。本研究成功构建大熊猫LIF过表达载体并转染至PDBM‑MSCs中,显著提高细胞活率、抑制凋亡,表明LIF对PDBM‑MSCs起到促进生长抑制凋亡的作用,为LIF在大熊猫中的作用机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 大熊猫 骨髓间充质干细胞 白血病抑制因子 细胞生长
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唐家河国家级自然保护区同域分布六种偶蹄类动物的活动节律与空间利用 被引量:3
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作者 韩一敏 肖梅 +7 位作者 何梦楠 李明富 侯蓉 吴鹏程 何芳 谌利民 胡杰 陈鹏 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期598-610,共13页
了解群落中具有相似生态位的同域分布物种的时空分布是群落生态学研究的主要内容之一。本研究于2021年1—12月在四川唐家河国家级自然保护区境内应用红外相机技术进行大中型哺乳动物的监测,共布设红外相机82台,总相机工作日为18710 d。... 了解群落中具有相似生态位的同域分布物种的时空分布是群落生态学研究的主要内容之一。本研究于2021年1—12月在四川唐家河国家级自然保护区境内应用红外相机技术进行大中型哺乳动物的监测,共布设红外相机82台,总相机工作日为18710 d。采用核密度估计法(Kernel density estimation)和占域模型(Occupancy model)分析冷季和暖季该保护区内6种偶蹄类的时空分布。研究结果表明:(1)毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)和小麂(Muntiacus reevesi)在冷季和暖季的日活动节律高度重叠(△≥0.80),中华扭角羚(Budorcas tibetana)、中华斑羚(Naemorhedus griseus)、中华鬣羚(Capricornis milneedwardsii)和野猪(Sus scrofa)为中度重叠(△值为0.50~0.80);(2)毛冠鹿、小麂、中华扭角羚、中华斑羚和野猪的日活动模式均为双峰型,且都具有晨昏习性,中华鬣羚偏夜行性,日活动模式为多峰型;(3)在冷季,中华扭角羚的占域率最高(0.70),在暖季,中华斑羚的占域率最高(0.96),中华鬣羚在冷季和暖季的占域率均最低,分别是0.18和0.19;(4)海拔、坡度、坡向、距水源地距离及距道路距离是影响这6种偶蹄类空间分布的重要因子。研究显示,唐家河国家级自然保护区内6种偶蹄类动物的活动节律与空间利用在冷季和暖季具有一定的差异性。本研究结果初步揭示了不同季节偶蹄类动物的时空分布特征及影响因素,为今后该区域制定针对性的保护管理措施提供科学依据。 展开更多
关键词 红外相机 偶蹄类动物 季节性 活动节律 空间利用 占域模型
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不同生活环境下小熊猫皮质醇和肠道微生物的变化规律
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作者 赵星 马锐 +5 位作者 吴蔚 李明喜 陈超 周延山 洪明生 齐敦武 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期427-435,共9页
肠道微生物群落易受环境压力的影响,其结构的相对稳定对维持动物机体健康至关重要。皮质醇作为一种应激激素不仅能反映动物应激状况还影响动物的肠道微生物结构,然而小熊猫肠道菌群和粪便皮质醇之间的共变机制尚未被研究。为此,我们通... 肠道微生物群落易受环境压力的影响,其结构的相对稳定对维持动物机体健康至关重要。皮质醇作为一种应激激素不仅能反映动物应激状况还影响动物的肠道微生物结构,然而小熊猫肠道菌群和粪便皮质醇之间的共变机制尚未被研究。为此,我们通过比较不同生活环境下(圈养、散养和野生)小熊猫粪便皮质醇和肠道微生物结构的差异,以期阐明其皮质醇和肠道微生物的变化规律。结果发现:(1)圈养环境下皮质醇浓度最低(71.1±21.6)ng/g,散养环境下其浓度为(111.3±5.6)ng/g,而野生环境下最高,为(5094.8±5383.9)ng/g。同时,散养环境下的小熊猫肠道微生物Shannon指数最高(6.178),其次是野生环境下(5.535),圈养环境下最低(3.449)。(2)圈养小熊猫皮质醇浓度与大肠杆菌志贺氏菌属(Escherichia⁃Shigella)呈显著负相关(P<0.001),与难辨梭菌属(Clostridium_sensu_stricto_1)呈显著正相关(P<0.001)。综上所述,不同生活环境显著影响小熊猫的肠道微生物组成和粪便皮质醇浓度,减少环境的变化频率和强度能有效降低其应激性,维持肠道菌群的健康稳定,这将为小熊猫种群的健康管理提供技术支撑。 展开更多
关键词 小熊猫 肠道微生物 16S rRNA测序 皮质醇 应激
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大熊猫源肠外致病性大肠杆菌的分子分型、耐药表型与耐药基因分析
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作者 王一霖 郭向辉 +4 位作者 彭焜 王乙好 袁羽 刘颂蕊 耿毅 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期672-680,共9页
【目的】明确四川大熊猫源肠外致病性大肠杆菌(Ex PEC)的耐药性与耐药基因流行情况,为大熊猫源Ex PEC感染的临床用药提供参考。【方法】从四川省绵阳市和雅安市野外死亡大熊猫的肠外器官采集病料,进行病原菌的分离,通过16S rRNA基因序... 【目的】明确四川大熊猫源肠外致病性大肠杆菌(Ex PEC)的耐药性与耐药基因流行情况,为大熊猫源Ex PEC感染的临床用药提供参考。【方法】从四川省绵阳市和雅安市野外死亡大熊猫的肠外器官采集病料,进行病原菌的分离,通过16S rRNA基因序列分析与Ex PEC多重PCR鉴定,继而对分离的Ex PEC进行系统进化群分群、MLST分型和PFGE分型,并采用K-B法与Wafergen Smartchip超高通量qPCR进行耐药表型测定和耐药基因分析。【结果】分离出9株Ex PEC,系统进化群分别为B2群和A群;MLST和PFGE分型均为3种分子型,其中MLST为ST555、U10和ST127型,PFGE为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型;9株Ex PEC对多黏菌素B、亚胺培南、左氧氟沙星与萘啶酸敏感率达100%;对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类等9类抗生素耐药基因(ARGs)的检测发现,β-内酰胺类和多重耐药类ARGs检出率较高。【结论】分离鉴定的9株大熊猫源Ex PEC系统进化群主要为B2群,MLST和PFGE分型主要为ST127/PFGE基因Ⅰ型,具有明显的多重耐药性,且β-内酰胺类和多重耐药类ARGs检出率较高,主要通过抗生素失活(antibiotic deactivate)和抗生素外排泵(efflux pump)两种耐药机制介导耐药性。 展开更多
关键词 肠外致病性大肠杆菌 大熊猫 分子分型 耐药性 耐药机制
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大熊猫自然保护区(瓦屋山、大相岭)潜在风险区域犬瘟热等病毒病的防控 被引量:3
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作者 燕霞 苏小艳 +8 位作者 马锐 张东升 李林 齐敦武 李运莉 岳婵娟 冯娜 侯蓉 刘颂蕊 《野生动物学报》 北大核心 2022年第4期888-896,共9页
为掌握瓦屋山和大相岭大熊猫自然保护区潜在风险区域内犬饲养及其携带犬瘟热病毒(CDV)、细小病毒(PV)、轮状病毒(RV)和狂犬病病毒(RABV)的情况,并在潜在风险区域建立犬瘟热等多种病毒病的免疫隔离带,以保护野生大熊猫(Ailuropoda melano... 为掌握瓦屋山和大相岭大熊猫自然保护区潜在风险区域内犬饲养及其携带犬瘟热病毒(CDV)、细小病毒(PV)、轮状病毒(RV)和狂犬病病毒(RABV)的情况,并在潜在风险区域建立犬瘟热等多种病毒病的免疫隔离带,以保护野生大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的种群健康。采用逐户走访、问卷调查、称体重和量体长的方法对保护区潜在风险区域的犬进行数量、饲养方式、体型和性别统计;采用PCR技术和血清中和抗体试验调查犬携带CDV、PV、RV病原情况和RABV在血清中的抗体水平;犬通过接种犬瘟热、腺病毒2型、副流感和细小病毒病四联活疫苗建立保护区犬瘟热等病毒的免疫隔离带。结果显示:瓦屋山和大相岭大熊猫自然保护区潜在风险区域内,共有犬178只,其中51.7%的犬(92/178)为自由散养状态,且以中小型犬(86.0%,153/178)为主;犬携带的RV为大熊猫源RV(GPRV),阳性率为76.9%(60/78);未检测到CDV和PV;12.7%的犬(7/55)RABV血清抗体阳性;犬疫苗免疫率为88.8%(158/178)。研究结果可为大熊猫保护区潜在风险区犬瘟热等多种病毒病的防控预警提供流行病学数据,并为大熊猫自然保护区周边犬的管理提供科学建议。 展开更多
关键词 大熊猫自然保护区 潜在风险区域 病毒病 免疫隔离带
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大熊猫转录因子Klf4在间充质干细胞中的转录调控作用研究 被引量:1
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作者 吴宏娟 刘玉良 +3 位作者 梁雨桐 沈富军 侯蓉 彭锐 《四川动物》 北大核心 2019年第6期630-637,共8页
大熊猫Ailuropoda melanoleuca是我国特有的濒危物种之一,对其分子及基因功能的研究可以加深对大熊猫的了解以及提供更加有效的保护。Krüppel样因子4(KLF4)是一个重要的锌指转录因子,在细胞周期调控、细胞生长、迁移、分化、凋亡... 大熊猫Ailuropoda melanoleuca是我国特有的濒危物种之一,对其分子及基因功能的研究可以加深对大熊猫的了解以及提供更加有效的保护。Krüppel样因子4(KLF4)是一个重要的锌指转录因子,在细胞周期调控、细胞生长、迁移、分化、凋亡以及正常组织稳态维持等生理过程中发挥重要作用。此外,KLF4也是体细胞重编程为诱导多能干细胞的重要诱导因子之一。为了深入了解大熊猫Klf4基因的结构和功能,以大熊猫间充质干细胞(MSCs)为材料,通过快速扩增cDNA末端的方法克隆得到转录因子Klf4的cDNA全长序列,分析了其结构特点,并利用RNA-seq技术探索KLF4在大熊猫MSCs中的调控作用。结果表明,大熊猫KLF4在进化过程中比较保守,并在细胞增殖、细胞凋亡、RNA转运和蛋白质生物合成等生物过程中发挥着重要的生理作用。本研究结果将为后续大熊猫的分子水平研究及基因资源保护奠定研究基础。 展开更多
关键词 大熊猫 间充质干细胞 Krüppel样因子4
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大熊猫源产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药性和致病性研究 被引量:6
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作者 燕霞 杨梅 +8 位作者 蒋雨林 李林 张东升 李运莉 侯蓉 岳婵娟 嵇晓光 刘颂蕊 苏小艳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期214-218,共5页
为了掌握产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)在圈养大熊猫中的流行、耐药和致病情况,本研究采用碳青霉烯酶Carba NP检测法从178株大熊猫源肺炎克雷伯菌中分离鉴定出8株CRKP(4.5%)。进一步采用纸片扩散法(K-B法)和PCR技术分别对CRKP分离株... 为了掌握产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)在圈养大熊猫中的流行、耐药和致病情况,本研究采用碳青霉烯酶Carba NP检测法从178株大熊猫源肺炎克雷伯菌中分离鉴定出8株CRKP(4.5%)。进一步采用纸片扩散法(K-B法)和PCR技术分别对CRKP分离株进行耐药性和碳青霉烯酶基因型研究,随机选取其中一株CRKP分离株E28研究其对小鼠的致病性。结果显示大熊猫源CRKP对氨曲南、卡那霉素、庆大霉素、氧氟沙星和诺氟沙星敏感,对碳青霉烯类抗生素耐药严重,其中对亚胺培南耐药率(87.5%)高于美罗培南(12.5%);6株CRKP的碳青霉烯酶基因型为blaKPC2-13酶型,2株为bla KPC2-13+bla NDM-1酶型;CRKP分离株E28对小鼠的半数致死量(LD50)为5.6×10^(7)cfu/mL。本研究首次证实CRKP存在于圈养大熊猫中,在大熊猫的临床治疗中应合理使用抗生素,避免CRKP进一步扩散。 展开更多
关键词 大熊猫 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 耐药性 致病性
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大熊猫寄生虫病研究现状 被引量:4
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作者 郭雅旭 苏小艳 燕霞 《动物医学进展》 北大核心 2020年第10期112-116,共5页
随着对大熊猫繁育和健康养护问题的深入研究,以及寄生虫学的发展,大熊猫的寄生虫虫谱愈见丰富,大熊猫寄生虫病亦愈见复杂,给大熊猫寄生虫病的诊断与防治带来了一定的困难。论文综述了大熊猫寄生虫的种类及其危害、诊断与防治措施等,以... 随着对大熊猫繁育和健康养护问题的深入研究,以及寄生虫学的发展,大熊猫的寄生虫虫谱愈见丰富,大熊猫寄生虫病亦愈见复杂,给大熊猫寄生虫病的诊断与防治带来了一定的困难。论文综述了大熊猫寄生虫的种类及其危害、诊断与防治措施等,以期为大熊猫寄生虫病的研究和防控提供参考。 展开更多
关键词 大熊猫 寄生虫病 蠕虫 外寄生虫
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圈养大熊猫个性与应激反应研究进展 被引量:4
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作者 奉永友 李鸣 +8 位作者 黄祥明 兰景超 吴孔菊 杨奎兴 袁博 谢意 彭文培 张晓卉 邓珏 《野生动物学报》 北大核心 2022年第1期210-214,共5页
随着饲养管理模式的逐步完善,圈养大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的繁殖率、幼崽存活率以及福利水平稳步提升。目前,关于动物个性的研究逐渐在行为生态学领域受到重视,且已有研究结果表明大熊猫个体间存在个性特征差异。在此背景下,梳... 随着饲养管理模式的逐步完善,圈养大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的繁殖率、幼崽存活率以及福利水平稳步提升。目前,关于动物个性的研究逐渐在行为生态学领域受到重视,且已有研究结果表明大熊猫个体间存在个性特征差异。在此背景下,梳理了国内外关于圈养大熊猫个性研究、应激反应及相关内容,讨论了个性差异与应激水平的关系,以期为进一步改善圈养大熊猫个体福利状况提供新的方向。 展开更多
关键词 大熊猫 个性 应激反应 福利
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大熊猫精子低渗膨胀试验与其他精子质量评估试验相关性研究
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作者 刘玉良 侯蓉 +4 位作者 鲜红 张志和 王成东 黄祥明 兰景超 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第3期394-396,共3页
利用解冻后的大熊猫冷冻精液,分别进行体外存活试验、顶体反应试验、异种穿卵试验和低渗膨胀试验,并对低渗膨胀试验与其他试验作相关性分析。结果显示:各试验之间存在一定的相关性。精子低渗膨胀率与精子的体外37℃存活时间呈显著正相关... 利用解冻后的大熊猫冷冻精液,分别进行体外存活试验、顶体反应试验、异种穿卵试验和低渗膨胀试验,并对低渗膨胀试验与其他试验作相关性分析。结果显示:各试验之间存在一定的相关性。精子低渗膨胀率与精子的体外37℃存活时间呈显著正相关,r=0.79(P<0.05);与体外异种受精率呈极显著正相关,r=0.90(P<0.01)。说明大熊猫精子的低渗膨胀试验可以作为精子质量评价的重要指标。 展开更多
关键词 大熊猫 精子 质量评估 相关性
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一株大熊猫源唾液联合乳杆菌对DSS诱导小鼠结肠炎的预防作用研究
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作者 杨宇 张沁荣 +5 位作者 谢佶芹 谢军金 王黎明 郑丽君 张文平 岳碧松 《四川动物》 北大核心 2023年第5期519-525,共7页
目的为了评估唾液联合乳杆菌Ligilactobacillus salivarius 103对小鼠结肠炎发生的预防作用。方法将27只小鼠随机均分为对空白对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)模型组和唾液联合乳杆菌处理组,每笼3只,采用菌悬液灌胃14 d、自由饮用DSS溶液7 d... 目的为了评估唾液联合乳杆菌Ligilactobacillus salivarius 103对小鼠结肠炎发生的预防作用。方法将27只小鼠随机均分为对空白对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)模型组和唾液联合乳杆菌处理组,每笼3只,采用菌悬液灌胃14 d、自由饮用DSS溶液7 d的方法诱导小鼠结肠炎。结果唾液联合乳杆菌处理组小鼠症状轻微,结肠缩短程度与病理组织结构变化不明显,炎症因子(IL-6、TNF-α、MPO)的水平也明显低于DSS模型组。结论唾液联合乳杆菌103能够保护结肠,降低小鼠肠道IL-6、TNF-α、MPO的浓度,缓解炎症症状,有效预防小鼠结肠炎的发生,为其在饲料添加剂、微生态制剂等方面的应用提供了有力支持。 展开更多
关键词 大熊猫 唾液联合乳杆菌 结肠炎 DSS诱导 预防
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大熊猫源奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用 被引量:6
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作者 刘圣 郑维超 +12 位作者 黄虹秀 刘颂蕊 杨梅 燕霞 李运莉 岳婵娟 侯蓉 张东升 范雪阳 张洪文 李林 曹立亭 苏小艳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期598-603,共6页
为建立一种快速鉴别检测大熊猫3种病原菌的多重PCR方法,本研究根据NCBI登录的奇异变形杆菌(PM)ureR基因、肺炎克雷伯菌(KPN)phoE基因、大肠杆菌(E.coli)phoA基因,设计3对引物,并对各反应条件优化,初步建立检测大熊猫源PM、KPN和E.coli... 为建立一种快速鉴别检测大熊猫3种病原菌的多重PCR方法,本研究根据NCBI登录的奇异变形杆菌(PM)ureR基因、肺炎克雷伯菌(KPN)phoE基因、大肠杆菌(E.coli)phoA基因,设计3对引物,并对各反应条件优化,初步建立检测大熊猫源PM、KPN和E.coli的多重PCR方法。特异性结果显示,本研究建立的多重PCR方法对PM、KPN和E.coli能够分别扩增到308 bp、456 bp和666 bp的目的条带,而对大熊猫常见的其它20种病原菌均无扩增;敏感性试验结果显示,该方法对PM、KPN和E.coli DNA的检测限分别为2.8×10^(7)拷贝/μL(ureR)、3×10^(7)拷贝/μL(phoE)、6×10^(7)拷贝/μL(phoA)。利用本研究建立的多重PCR方法对100份大熊猫临床样品检测,结果显示:PM、KPN和E.coli的检出率分别为30%(30/100)、90%(90/100)和100%(100/100),均与研究报道的单一PCR检出率相同,对PM和KPN的检出率均高于传统病原分离方法(25%、83%)。本研究建立的大熊猫源PM、KPN、E.coli多重PCR检测方法特异性较强、敏感性较高,且可以同时检测3种病原,为大熊猫细菌性疾病的诊断提供了新的检测手段,极大缩短了检测时间,对临床防控相应细菌性疾病具有重要意义。 展开更多
关键词 大熊猫 奇异变形杆菌 肺炎克雷伯菌 大肠杆菌 多重PCR
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大熊猫脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及miRNAs富集分析 被引量:1
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作者 安俊辉 李媛 +8 位作者 王东辉 陈佳松 李红艳 梁小虎 封同英 蔡志刚 侯蓉 曾长军 刘玉良 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期33-40,共8页
大熊猫脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)通过旁分泌所释放的外泌体在大熊猫保健与疾病治疗方面具有一定的应用前景。本研究旨在建立大熊猫UC-MSCs外泌体分离方法,开展生物学特征分析和分子鉴定,并研究U... 大熊猫脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)通过旁分泌所释放的外泌体在大熊猫保健与疾病治疗方面具有一定的应用前景。本研究旨在建立大熊猫UC-MSCs外泌体分离方法,开展生物学特征分析和分子鉴定,并研究UC-MSCs外泌体中miRNAs的种类与功能。采用超速离心法从大熊猫UCMSCs培养上清中成功分离外泌体,通过透射电子显微镜进行形态学观察,纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径大小,蛋白免疫印迹法检测特异性分子标记表达。采用Small RNA测序技术对UC-MSCs外泌体中的miRNAs进行鉴定,并对其靶基因进行了预测与功能分析。结果显示,大熊猫UC-MSCs外泌体呈圆形杯托状结构,直径为(79.15±4.81)nm,外泌体标志蛋白CD81与TSG101呈阳性表达而CALNEXIN呈阴性表达。大熊猫UC-MSCs外泌体中的miRNA主要为miR-148-3p(30.28%)与miR-21-5p(21.72%)。本研究首次从大熊猫UC-MSCs培养上清中分离出外泌体,并对其所含的miRNAs进行富集分析及功能预测,为大熊猫UC-MSCs外泌体后续的功能研究及应用奠定基础。 展开更多
关键词 大熊猫 脐带间充质干细胞 外泌体 MIRNA
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一例大熊猫肺炎克雷伯菌与奇异变形杆菌感染的诊断 被引量:9
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作者 陈垚焱 刘颂蕊 +5 位作者 苏小艳 耿毅 黄文俊 陈欣 白明焕 程子瑄 《野生动物学报》 北大核心 2020年第4期1013-1019,共7页
在四川某自然保护区发现1只死亡大熊猫,为明确其死因,对其进行了病理学与病因学分析,病理剖检发现其体表多处外伤,肌肉坏死;淋巴结肿大,呈暗紫色;肺出血;脾萎缩;肝、肾与胰肿胀。病理组织学上,多组织器官表现为变性、坏死与炎性细胞浸润... 在四川某自然保护区发现1只死亡大熊猫,为明确其死因,对其进行了病理学与病因学分析,病理剖检发现其体表多处外伤,肌肉坏死;淋巴结肿大,呈暗紫色;肺出血;脾萎缩;肝、肾与胰肿胀。病理组织学上,多组织器官表现为变性、坏死与炎性细胞浸润,同时在心、肝、肺与淋巴结等组织中发现大量细菌入侵。从肝、心与淋巴结等器官分离到2株优势菌,经16S rDNA序列分析鉴定其分别为肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)和奇异变形杆菌(Proteus mirabilis),而犬瘟热病毒与轮状病毒RT-PCR检测阴性。综上,该只大熊猫是因外伤继发肺炎克雷伯菌与奇异变形杆菌感染致全身多组织器官功能障碍而死亡。 展开更多
关键词 大熊猫 菌血症 肺炎克雷伯菌 奇异变形杆菌 病理损伤
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基于高分辨率网络的大熊猫姿态估计方法 被引量:3
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作者 漆愚 苏菡 +4 位作者 侯蓉 刘鹏 陈鹏 臧航行 张志和 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期451-460,共10页
对圈养大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)开展长期行为监测能及时了解其所处生理周期和健康状况,有助于繁殖饲养机构迅速采取相应繁育保护措施提高饲养管理水平,但目前无法对大熊猫进行24 h监控并及时地获得相应的行为信息。准确的动物姿... 对圈养大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)开展长期行为监测能及时了解其所处生理周期和健康状况,有助于繁殖饲养机构迅速采取相应繁育保护措施提高饲养管理水平,但目前无法对大熊猫进行24 h监控并及时地获得相应的行为信息。准确的动物姿态估计是动物行为研究的关键,也是诸多下游应用的基础。了解大熊猫的姿态可以促进大熊猫行为研究并提升保护管理水平。为了提高复杂环境下大熊猫姿态估计的准确率,本文以高分辨率网络(High resolution net,HRNet)为基础网络架构提出了一种大熊猫姿态估计方法:针对大熊猫不同部位尺度差异较大的问题,在HRNet-32中引入了空洞空间金字塔池化(Atrous spatial pyramid pooling,ASPP)模块,在提升特征感受野的同时捕获多尺度信息;同时对大熊猫身体关键点进行分组,引入基于部位的多分支结构来学习特定于每个部位组的表征。多次对比实验结果表明本文所用模型具有较高的检测精度:在PCK@0.05中所用模型精度达到了81.51%。本文提出的方法可为大熊猫的行为分析和健康评估提供技术支撑。 展开更多
关键词 大熊猫 姿态估计 图像分析 深度学习
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圈养大熊猫催产素水平与母性行为之间关系 被引量:3
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作者 王子叶 毕温磊 +5 位作者 吴蔚 余姣姣 周延山 侯蓉 向左甫 齐敦武 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期721-730,共10页
催产素(oxytocin,OT)是能够对社会关系和共情能力产生重要影响的肽类激素,通过与其受体(oxytocin receptor,OTR)结合而发挥作用(Crockford et al.,2013)。对抚育幼体的啮齿类雌性动物,分娩时子宫的收缩会刺激下丘脑处的催产素神经元释... 催产素(oxytocin,OT)是能够对社会关系和共情能力产生重要影响的肽类激素,通过与其受体(oxytocin receptor,OTR)结合而发挥作用(Crockford et al.,2013)。对抚育幼体的啮齿类雌性动物,分娩时子宫的收缩会刺激下丘脑处的催产素神经元释放催产素,从而影响母性行为的产生,母性攻击行为可能表现得更明显(Pedersen and Boccia,2003)。 展开更多
关键词 大熊猫 母性行为 催产素
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基于双模型融合的大熊猫头部图像分割 被引量:1
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作者 周章玉 侯佳萍 +2 位作者 刘鹏 陈鹏 段昶 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期82-88,共7页
在大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的迁地保护和种群饲养管理中,及时、快速地进行个体识别和行为监测,对其健康管理具有至关重要的作用。圈养大熊猫健康状况通常由专门的饲养人员肉眼观测,人力成本高、效率低并且缺乏时效性。基于图像... 在大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的迁地保护和种群饲养管理中,及时、快速地进行个体识别和行为监测,对其健康管理具有至关重要的作用。圈养大熊猫健康状况通常由专门的饲养人员肉眼观测,人力成本高、效率低并且缺乏时效性。基于图像的动物个体识别与行为分析技术效率高、时间成本低,已经成为新的监测发展趋势。已有研究提出,通过大熊猫面部图像的检测和分析,可实现个体识别和行为分类。但该方法依然存在检测精度不足导致识别准确率难以提升的问题。本文提出一种基于YOLOv3和Mask R-CNN的双模型融合方法,实现了大熊猫头部图像分割和精准检测。包含3个部分:YOLOv3完成头部检测,Mask R-CNN完成大熊猫轮廓分割,然后将两个模型的输出进行交并比融合。结果显示,头部检测准确率为82.6%,大熊猫轮廓分割准确率为95.2%,总体头部轮廓分割准确率为87.1%。该方法对大熊猫头部图像的识别率和分割准确率高,为大熊猫的个体识别、性别分类提供了帮助,为行为分析提供了技术参考。 展开更多
关键词 大熊猫 YOLOv3 Mask R-CNN 双模型融合 图像分割
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圈养大熊猫幼仔的早期体重变化 被引量:4
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作者 黄祥明 奉永友 +8 位作者 兰景超 吴孔菊 杨奎兴 彭文培 袁博 谢意 王树群 陈敏 邓陶 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期224-234,共11页
大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)幼仔快速生长发育是在进化过程中形成的有利于种群长期保存的生存策略(胡锦矗,2001)。大熊猫幼仔的体重是衡量其生长发育的重要指标之一,也是调整圈养大熊猫饲养管理的重要参考依据。在圈养条件下,大熊... 大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)幼仔快速生长发育是在进化过程中形成的有利于种群长期保存的生存策略(胡锦矗,2001)。大熊猫幼仔的体重是衡量其生长发育的重要指标之一,也是调整圈养大熊猫饲养管理的重要参考依据。在圈养条件下,大熊猫幼仔在0和1年龄级的死亡率分别为12.89%和18.37%(赵素芬等,2019),在30日龄内更高达22%(谢钟,2019)。 展开更多
关键词 性别 初生体重 减重 增长
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