目的通过Smad3特异性抑制剂(specific inhibitor of Smad3,SIS3)干预博来霉素肺纤维化大鼠,观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达情况,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中的作用。方法选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为4...目的通过Smad3特异性抑制剂(specific inhibitor of Smad3,SIS3)干预博来霉素肺纤维化大鼠,观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达情况,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中的作用。方法选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组:生理盐水对照组(NS组),博来霉素组(BLM组),SIS3干预组(SIS3组),二甲基亚砜溶媒组(DMSO组),每组15只。BLM组、SIS3组和DMSO组气管内注射博来霉素溶液(5mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型;NS组以同样方法注入等量生理盐水;SIS3组大鼠腹腔内注射SIS3(2.5μg/g)干预处理,BLM组注射等量生理盐水,DMSO组注射等量DMSO。各组于造模后第7、14、28天分别处死5只大鼠,行Masson染色观察各组肺组织胶原纤维差异。免疫组化检测各组TGF-β1、Smad3表达情况。结果与NS组比较,BLM组、DMSO组大鼠肺组织出现明显纤维化,TGF-β1、Smad3表达明显增高;与BLM组、DMSO组相比,SIS3组大鼠肺纤维化程度减轻,TGF-β1、Smad3表达减少。结论 SIS3干预肺纤维化大鼠,能够减轻大鼠肺泡炎,降低肺纤维化程度;TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中可能起到重要作用。展开更多
目的探讨姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)损伤的保护作用,以及β-catenin/p300相互作用与姜黄素保护AEC2的关系。方法采用分离培养的AEC2建立高氧诱导的细胞损伤模型。培养AEC2细胞,随机分为对照组、高氧组、姜黄素组(分为高、...目的探讨姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)损伤的保护作用,以及β-catenin/p300相互作用与姜黄素保护AEC2的关系。方法采用分离培养的AEC2建立高氧诱导的细胞损伤模型。培养AEC2细胞,随机分为对照组、高氧组、姜黄素组(分为高、中、低剂量3个亚组)、IQ-1(β-catenin/p300相互作用抑制剂)组、p300 siRNA组、siRNA阴性对照组。药物处理24 h后,CCK-8 法和细胞计数板检测AEC2细胞增殖活力和细胞总数,定量PCR检测AEC2、肺泡Ⅰ型上皮细胞(AEC1)的标记基因SP-C和AQP5 mRNA表达量,流式细胞仪检测AQP5、SP-C阳性细胞百分比,Western blot 检测β-catenin、p300蛋白表达量。结果与对照组比较,高氧组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显减少( P <0.01),而AEC1标记基因AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、AEC2向AEC1转分化的中间型细胞百分比则明显增加( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显增加( P <0.01)。姜黄素组、IQ-1组和p300 siRNA组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显增加( P <0.01),而AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、转分化中间型细胞百分比均减少( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显减小( P <0.01)。结论姜黄素对高氧诱导培养AEC2损伤具有保护作用,其机制与抑制β-catenin/p300相互作用有关。展开更多
文摘目的通过Smad3特异性抑制剂(specific inhibitor of Smad3,SIS3)干预博来霉素肺纤维化大鼠,观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达情况,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中的作用。方法选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组:生理盐水对照组(NS组),博来霉素组(BLM组),SIS3干预组(SIS3组),二甲基亚砜溶媒组(DMSO组),每组15只。BLM组、SIS3组和DMSO组气管内注射博来霉素溶液(5mg/kg)建立大鼠肺纤维化模型;NS组以同样方法注入等量生理盐水;SIS3组大鼠腹腔内注射SIS3(2.5μg/g)干预处理,BLM组注射等量生理盐水,DMSO组注射等量DMSO。各组于造模后第7、14、28天分别处死5只大鼠,行Masson染色观察各组肺组织胶原纤维差异。免疫组化检测各组TGF-β1、Smad3表达情况。结果与NS组比较,BLM组、DMSO组大鼠肺组织出现明显纤维化,TGF-β1、Smad3表达明显增高;与BLM组、DMSO组相比,SIS3组大鼠肺纤维化程度减轻,TGF-β1、Smad3表达减少。结论 SIS3干预肺纤维化大鼠,能够减轻大鼠肺泡炎,降低肺纤维化程度;TGF-β1/Smad3信号通路在肺纤维化中可能起到重要作用。
文摘目的探讨姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)损伤的保护作用,以及β-catenin/p300相互作用与姜黄素保护AEC2的关系。方法采用分离培养的AEC2建立高氧诱导的细胞损伤模型。培养AEC2细胞,随机分为对照组、高氧组、姜黄素组(分为高、中、低剂量3个亚组)、IQ-1(β-catenin/p300相互作用抑制剂)组、p300 siRNA组、siRNA阴性对照组。药物处理24 h后,CCK-8 法和细胞计数板检测AEC2细胞增殖活力和细胞总数,定量PCR检测AEC2、肺泡Ⅰ型上皮细胞(AEC1)的标记基因SP-C和AQP5 mRNA表达量,流式细胞仪检测AQP5、SP-C阳性细胞百分比,Western blot 检测β-catenin、p300蛋白表达量。结果与对照组比较,高氧组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显减少( P <0.01),而AEC1标记基因AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、AEC2向AEC1转分化的中间型细胞百分比则明显增加( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显增加( P <0.01)。姜黄素组、IQ-1组和p300 siRNA组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显增加( P <0.01),而AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、转分化中间型细胞百分比均减少( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显减小( P <0.01)。结论姜黄素对高氧诱导培养AEC2损伤具有保护作用,其机制与抑制β-catenin/p300相互作用有关。
