高校研究型中心实验室建设与管理的新探索 被引量：6

1

作者 李敏惠 杨平 邹强 《实验技术与管理》 CAS 2008年第3期103-104,128,共3页

在实验室管理体制的改革探索过程中，建立具有多功能技术平台的中心实验室，是当前高校研究型实验室改进管理弊端的必由之路。文章以成都医学院院级实验室——科研实验中心为例，详细介绍了该中心“开放、共享”的特点，以及“共建、共... 在实验室管理体制的改革探索过程中，建立具有多功能技术平台的中心实验室，是当前高校研究型实验室改进管理弊端的必由之路。文章以成都医学院院级实验室——科研实验中心为例，详细介绍了该中心“开放、共享”的特点，以及“共建、共管、共用”的人性化管理模式。 展开更多

关键词 实验室 管理 高校

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吴茱萸碱抑制活化T细胞增殖作用的研究 被引量：1

2

作者 唐佳楠 罗兴燕 +3 位作者 何晶晶 曾晓鑫 刘阳 赖翼 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期524-530,共7页

目的探究吴茱萸碱(EVO)对活化T细胞增殖的抑制特性。方法采用密度梯度离心法从健康供体中提取外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠法纯化T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。以不同浓度的EVO(0.37、1.11、3.33、10)μmol/L作用于T细胞... 目的探究吴茱萸碱(EVO)对活化T细胞增殖的抑制特性。方法采用密度梯度离心法从健康供体中提取外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠法纯化T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。以不同浓度的EVO(0.37、1.11、3.33、10)μmol/L作用于T细胞。流式细胞术测定T细胞增殖率、凋亡率、存活率、CD25表达水平以及细胞周期分布。ELISA分析细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-17A、IL-4和IL-10的表达水平。结果(1.11、3.33、10)μmol/L EVO能有效抑制活化T细胞增殖,其半数抑制浓度(IC 50)为(1.5±0.3)μmol/L。EVO不诱导活化T细胞凋亡,且不影响静息T细胞的存活率。EVO不影响活化T细胞CD25的表达及IL-2的分泌。EVO阻滞T细胞周期于G2/M期,使G2/M期细胞增加,且具有浓度-效应关系。EVO不影响活化T细胞分泌IL-4、IL-10,但显著抑制IL-17A的分泌。结论EVO对T细胞的活化过程无显著影响,但可通过阻滞细胞周期于G2/M期,从而抑制T细胞的增殖,并显著抑制促炎因子IL-17A的分泌。提示EVO有望作为先导物,促进低毒高效性免疫抑制剂的研发,并有助于阐释传统中药吴茱萸在抗炎及免疫调节中的作用机制。 展开更多

关键词 吴茱萸碱(EVO) 免疫抑制剂 细胞周期 细胞因子 流式细胞术

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大叶性肺炎及其诊疗虚拟仿真实验项目建设 被引量：11

3

作者 李敏惠 冯军 +4 位作者 邓峰美 胡晓松 林友胜 张奇兰 杨平 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2019年第9期96-99,共4页

为提升呼吸系统实践教学效果,提出大叶性肺炎及其诊疗虚拟仿真实验教学项目建设方案。基于成都医学院在虚拟动物及虚拟标准化病人方面的技术与软件系统积累,开展呼吸系统虚拟动物及虚拟标准化病人实验。该项目建设包括资源建设、流程建... 为提升呼吸系统实践教学效果,提出大叶性肺炎及其诊疗虚拟仿真实验教学项目建设方案。基于成都医学院在虚拟动物及虚拟标准化病人方面的技术与软件系统积累,开展呼吸系统虚拟动物及虚拟标准化病人实验。该项目建设包括资源建设、流程建设、内容建设、平台建设和共享服务建设,充分发挥虚拟仿真实验在基础医学教学中的作用,促进基础与临床有效衔接,开辟了临床思维训练虚拟仿真教学资源新途径。 展开更多

关键词 大叶性肺炎 虚拟仿真实验 标准化病人 实验项目建设

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极限门静脉结扎后增生肝脏组织中NF-κB和IL-6表达变化的实验研究 被引量：2

4

作者 代雪梅 李可洲 +2 位作者 姚豫桐 杨淑霞 张晓 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1366-1370,共5页

目的:探讨核转录因子(Nuclearfactor-kappaB,NF-κB)和白介素-6(Interleukin6,IL-6)在90%极限门静脉分支结扎大鼠增生肝脏组织中的表达及其与肝再生的关系。方法:96只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分成假手术对照组和门静脉结扎实验... 目的:探讨核转录因子(Nuclearfactor-kappaB,NF-κB)和白介素-6(Interleukin6,IL-6)在90%极限门静脉分支结扎大鼠增生肝脏组织中的表达及其与肝再生的关系。方法:96只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分成假手术对照组和门静脉结扎实验组。观察术后0.5、1、3、5、7、14、21和28 d保留侧肝脏重量变化,光学显微镜下观察保留侧肝细胞的形态变化,用免疫组化方法检测保留侧肝细胞的增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及NF-κB和IL-6的表达,并进行统计分析。结果:①90%极限门静脉分支结扎后,结扎侧肝叶呈进行性萎缩变小,保留侧肝叶占总肝质重的比例与假手术对照组比较1～5 d升高,7 d达"平台期";②PCNA阳性细胞计数与假手术对照组比较,0.5～7 d表达增强(P<0.05),以后逐渐恢复正常;③保留侧肝叶NF-κB和IL-6的表达量与假手术对照组比较0.5～5 d表达增强,术后7～28 d差异无统计学意义(P>0.05);保留侧肝叶IL-6的表达量0.5 d开始呈显著增加,并迅速达到高峰,随后1～5 d表达逐渐下降,但仍高于正常水平,术后7～28 d与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。④大鼠肝脏PCNA的表达在术后0.5、1、14、21、28 d组与肝内NF-κB表达呈正相关,在术后1、14、21 d组与肝内IL-6表达呈正相关,NF-κB的表达在术后1、7、21、28d组与肝脏IL-6表达呈正相关。结论:NF-κB和IL-6蛋白在90%极限门静脉分支结扎后大鼠肝脏再生过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 肝再生 门静脉 结扎 核转录因子 白介素-6

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医学本科生创新平台的构建与实践 被引量：3

5

作者 吴敏 李敏惠 黄坪 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2014年第1期179-183,共5页

现阶段医学本科教育中高等教育大众化与医学人才质量要求精英化的矛盾突出,存在医学教育模式陈旧、医学生科研能力训练缺失及医学教育缺乏与人文社会科学的有机结合等诸多弊端。成都医学院构建了开放、共享、规范、导师化的创新实践平台... 现阶段医学本科教育中高等教育大众化与医学人才质量要求精英化的矛盾突出,存在医学教育模式陈旧、医学生科研能力训练缺失及医学教育缺乏与人文社会科学的有机结合等诸多弊端。成都医学院构建了开放、共享、规范、导师化的创新实践平台,对于解决大众化教育背景下兼顾医学人才培养质量的问题、提高以创新素制为核心的综合素质、深化医学生的专业与自我认识、形成良好人格与稳定心理以及培养终身学习的能力具有显著的成效。 展开更多

关键词 医学本科生 创新实践平台 人才培养

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毛兰素通过下调CyclinB1蛋白表达抑制活化T细胞增殖

6

作者 敬林 张婷 +2 位作者 罗兴燕 刘阳 赖翼 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第19期2365-2373,共9页

目的毛兰素抑制活化T细胞增殖及其作用机制探究。方法利用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),采用人T细胞MACS磁珠阴性分选试剂盒纯化T细胞,抗人CD3/CD28抗体刺激活化T细胞。采用羧基荧光... 目的毛兰素抑制活化T细胞增殖及其作用机制探究。方法利用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),采用人T细胞MACS磁珠阴性分选试剂盒纯化T细胞,抗人CD3/CD28抗体刺激活化T细胞。采用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE)标记活化T细胞,通过流式细胞术检测毛兰素对活化T细胞增殖、凋亡、活化标志物CD25表达、细胞周期分布以及静息T细胞存活率的影响。采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)定量分析毛兰素处理后的活化T细胞培养上清中IL-2和IL-17的分泌水平。Western blot分析毛兰素对细胞分裂周期蛋白2(cell division cycle protein 2,CDC2)、P-CDC2、以及CyclinB1蛋白表达的影响。观察并分析毛兰素处理组(0.05~0.20μmol/L)与阳性对照组(纯化后仅用抗人CD3/CD28抗体刺激的T细胞)的显著性差异结果。结果CFSE增殖结果表明毛兰素处理组(0.05~0.20μmol/L)的活化T细胞增殖率呈浓度依赖性下降(P<0.0001),其半数抑制浓度(IC_(50))为(0.09±0.10)μmol/L。细胞凋亡和细胞存活率结果表明活化T细胞和静息T细胞经毛兰素处理后,毛兰素处理组与阳性对照组的凋亡率和存活率无显著差异。通过对活化T细胞标志物分析发现,毛兰素不影响CD25的表达和IL-2的分泌。ELISA检测显示毛兰素显著抑制IL-17炎性因子的分泌(P<0.0001)。细胞周期实验表明毛兰素阻滞活化T细胞周期于G2/M期(P<0.05),进一步机制研究发现,毛兰素不影响P-CDC2、CDC2的表达,但显著抑制CyclinB1蛋白的表达(P<0.01)。结论毛兰素具有显著免疫抑制活性且通过下调CyclinB1蛋白表达抑制活化T细胞增殖。 展开更多

关键词 毛兰素 免疫抑制剂 CyclinB1蛋白 活化T细胞 增殖

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开放式综合性实验平台规范化管理的实践与探索 被引量：9

7

作者 李敏惠 邹强 阳泰 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2019年第1期259-261,282,共4页

建立开放式综合性实验平台是充分整合和发挥高校资源优势,保障高校科研工作者有效开展科学研究、培养学生创新意识和综合能力的重要基础。该文结合成都医学院科研实验中心建设开放式综合性实验平台的实践经验,阐述了综合性实验平台科学... 建立开放式综合性实验平台是充分整合和发挥高校资源优势,保障高校科研工作者有效开展科学研究、培养学生创新意识和综合能力的重要基础。该文结合成都医学院科研实验中心建设开放式综合性实验平台的实践经验,阐述了综合性实验平台科学、高效的管理制度的建设思路,探索了"基于SOP的持证上岗"管理和考评激励制度,提出了开放共享、平台多元、管理规范的管理和运行模式。 展开更多

关键词 开放式实验平台 实验室建设 规范化管理

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鸡卵黄抗体IgY的分离纯化及鉴定 被引量：14

8

作者 李敏惠 邹强 +4 位作者 杨淑霞 何建荣 刘阳 黄雅琳 常山 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期80-82,共3页

采用水溶稀释法结合硫酸钠二次盐析沉淀法分离纯化鸡卵黄中蛋白IgY,实验中比较了不同pH值的水溶稀释液对卵黄除脂效果的影响;并采用SDS-PAGE及western blotting对提取产物进行鉴定。结果显示,pH值5.2水溶稀释液除脂效果最好,IgY得率最... 采用水溶稀释法结合硫酸钠二次盐析沉淀法分离纯化鸡卵黄中蛋白IgY,实验中比较了不同pH值的水溶稀释液对卵黄除脂效果的影响;并采用SDS-PAGE及western blotting对提取产物进行鉴定。结果显示,pH值5.2水溶稀释液除脂效果最好,IgY得率最高。实验优化了鸡卵黄抗体IgY分离纯化技术,得到的IgY产量高、纯度高,特异性强;此外,水溶稀释法制备IgY具有利用小体积样品获得大量蛋白及纯化效率高的优点。 展开更多

关键词 IGY 分离纯化 鉴定

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雪胆素甲诱导非小细胞肺癌系NCI-H460和A549的凋亡效应及其作用机制初探 被引量：10

9

作者 陈育林 咸婧 +11 位作者 肖翠 钟月玲 苏小妹 徐丽 罗巧丽 程朋 王涛 刘进 张涛 阳泰 邹强 李华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期922-927,共6页

目的雪胆素甲(CuⅡa)诱导肺癌NCI-H460和A549的凋亡效应及其作用机制初探。方法利用CCK-8检测CuⅡa对肿瘤细胞抑制活性;流式细胞术检测CuⅡa对肿瘤细胞凋亡以及周期的影响;Western blot检测CuⅡa对Aurora A、STAT3以及Cofilin蛋白磷酸... 目的雪胆素甲(CuⅡa)诱导肺癌NCI-H460和A549的凋亡效应及其作用机制初探。方法利用CCK-8检测CuⅡa对肿瘤细胞抑制活性;流式细胞术检测CuⅡa对肿瘤细胞凋亡以及周期的影响;Western blot检测CuⅡa对Aurora A、STAT3以及Cofilin蛋白磷酸化的影响。结果 CuⅡa对肺癌细胞NCI-H460和A549具有明显抑制作用,其IC_(50)分别为224.9和108.3 nmol·L^(-1);CuⅡa能诱导肿瘤细胞凋亡,并阻滞细胞周期于G_2/M期;Western blot实验结果显示CuⅡa对STAT3和Cofilin的磷酸化具有抑制作用,且呈现剂量依赖性,CuⅡa能抑制Aurora A磷酸化,符合Aurora A激酶抑制剂抗肿瘤效应重要特征—阻滞细胞于G_2/M期。结论CuⅡa对非小细胞肺癌细胞系NCI-H460和A549具有明显的抑制作用,CuⅡa可作为抗非小细胞肺癌的先导化合物进行下一步研究。 展开更多

关键词 雪胆素甲 非小细胞肺癌 凋亡 AURORA A COFILIN STAT3

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酯蟾毒配基选择性杀伤肿瘤细胞的研究 被引量：8

10

作者 唐信威 肖洁 +4 位作者 宋健 邹强 汪瑞雪 李晏齐 阳泰 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期196-199,共4页

背景与目的:酯蟾毒配基是我国传统抗肿瘤中药-蟾酥主要成分之一。前期的研究表明,酯蟾毒配基能在不影响静息人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)存活的浓度下杀伤肿瘤细胞,本研究将进一步探讨酯蟾毒配基是否具... 背景与目的:酯蟾毒配基是我国传统抗肿瘤中药-蟾酥主要成分之一。前期的研究表明,酯蟾毒配基能在不影响静息人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)存活的浓度下杀伤肿瘤细胞,本研究将进一步探讨酯蟾毒配基是否具有选择性杀伤肿瘤细胞的作用。方法:分别将酯蟾毒配基作用于Jurkat细胞、Hep3B细胞、PBMC以及PHA活化后PBMC。采用CCK-8显色法对肿瘤细胞生长抑制率进行测定;利用流式细胞术对药物作用PBMC前后细胞数量进行精确计数。结果:酯蟾毒配基对Jurkat和Hep3B肿瘤细胞有明显杀伤作用,而对静息PBMC细胞影响轻微。喜树碱、多柔比星和依托泊苷同酯蟾毒配基相似,对静息的PBMC没有影响,却能杀伤PHA活化后的PBMC。结论:酯蟾毒配基同其他抗肿瘤药物一样,都作用于肿瘤细胞增殖环节,而非选择性杀伤肿瘤细胞;强心苷类化合物选择性杀伤肿瘤细胞的观点不确切。 展开更多

关键词 酯蟾毒配基 强心苷类化合物 选择性杀伤 肿瘤细胞

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转化生长因子-β1基因多态性与结直肠癌相关性的Meta分析 被引量：6

11

作者 李敏惠 袁杰 +3 位作者 李华 邹强 刘阳 杨平 《医学研究生学报》 CAS 2011年第8期803-807,共5页

目的 近年来转化生长因子β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）-509C/T位点与结直肠癌（colorectal cancer,CRC）遗传易感性关系的研究备受关注.但由于遗传和表型上的异质性,不同的研究结果尚不一致.文中探讨转化生长因子-... 目的 近年来转化生长因子β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）-509C/T位点与结直肠癌（colorectal cancer,CRC）遗传易感性关系的研究备受关注.但由于遗传和表型上的异质性,不同的研究结果尚不一致.文中探讨转化生长因子-β1基因-509C/T位点多态性与结直肠癌易感性关系. 方法 以结直肠癌组和健康对照组基因型分布的OR值为效应指标,通过检索PubMed、CNKI和维普等数据库中TGF-β1基因-509C/T位点多态性与结直肠癌易感性关联研究的文献,应用RevMan 5.0软件对各研究结果进行异质性检验和效应值合并,并进行敏感性分析和偏倚评估. 结果 纳入TGF-β1基因-509C/T位点多态性与结直肠癌易感性关联的文献10篇,共计病例2314例,对照4247例,除基因型TC与TT的比较外,各研究结果之间存在显著异质性,故在Meta分析时采用随机效应模型法进行数据合并,结果无统计学意义.在人群分层分析中,亚洲人群的异质性明显降低,基因型TT与(TC+ CC)的比较分析结果显示P=0.08 ＞0.05,因此认为有同质性,可用固定效应模型进行分析,合并的OR值为0.83(0.7 ～0.99),P=0.04,有统计学意义;其漏斗图形基本对称,敏感性分析稳定性较差. 结论 在亚洲人群中,TGF-β1基因-509 TT基因型可能为结直肠癌的保护因素. 展开更多

关键词 结直肠癌 基因多态性 转化生长因子-Β1 META分析

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鸡卵黄抗体Fab′的制备及鉴定 被引量：4

12

作者 邹强 李敏惠 +4 位作者 杨淑霞 何建荣 刘阳 李腾飞 常山 《医学研究生学报》 CAS 2010年第2期133-136,共4页

目的鸡卵黄抗体(immunoglobulin Y,IgY)的活性片段Fab′免疫原性低,可口服用于预防胃肠道感染。文中制备并鉴定IgY Fab′片段。方法采用胃蛋白酶水解法制备Fab′,对酶与IgY混和质量比、pH值、酶解时间进行优化;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电... 目的鸡卵黄抗体(immunoglobulin Y,IgY)的活性片段Fab′免疫原性低,可口服用于预防胃肠道感染。文中制备并鉴定IgY Fab′片段。方法采用胃蛋白酶水解法制备Fab′,对酶与IgY混和质量比、pH值、酶解时间进行优化;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)及Western blot对酶解产物进行鉴定。结果胃蛋白酶∶IgY的质量比为1∶40,缓冲液pH4.2,酶解时间9 h的条件下,可得到无pFc片段的特异性抗体Fab′片段。结论获得制备IgY Fab′的最佳条件,得到的Fab′产量高、纯度高,特异性强,是规模化制备特异性Fab′片段的良好的实验方法。 展开更多

关键词 鸡卵黄抗体 酶解 Fab’

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苯并噻唑衍生物BD960抗T细胞增殖的机制研究 被引量：2

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作者 赖翼 夏超亚 +7 位作者 周宏 吴秀银 樊苗 郭慧杰 莫春芬 邹强 刘阳 罗兴燕 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第2期138-143,共6页

目的细胞高通量筛选发现苯并噻唑衍生物BD960具有免疫抑制活性,文中探讨BD960抑制T细胞增殖的作用机制。方法免疫磁珠纯化人外周血T细胞,Anti-CD3/CD28m Abs或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测BD960对活化T细胞的增殖抑制作用、静... 目的细胞高通量筛选发现苯并噻唑衍生物BD960具有免疫抑制活性,文中探讨BD960抑制T细胞增殖的作用机制。方法免疫磁珠纯化人外周血T细胞,Anti-CD3/CD28m Abs或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测BD960对活化T细胞的增殖抑制作用、静息T细胞的细胞毒性作用、CD25表达及细胞周期。酶联免疫吸附法测定BD960对活化T细胞分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A及IFN-γ等细胞因子的影响。结果 BD960抑制Anti-CD3/CD28 m Abs或同种异型抗原刺激的T细胞增殖,IC50分别为(2.3±0.3)μmol/L和(2.5±0.3)μmol/L,且浓度达100μmol/L也不影响静息T细胞和PBMC的存活。Anti-CD3/CD28 m Abs刺激T细胞72 h表达的CD25比为69.7%,BD960在(0.625、2.5、10)μmol/L均不抑制活化T细胞表达CD25,而0.1μmol/L FK506可抑制CD25表达低至9.4%。活化96 h的T细胞,G0/G1期细胞比为58.5%。BD960能阻滞细胞周期于G0/G1期,并随着浓度的提高G0/G1比例增大。BD960在(0.625、2.5、10)μmol/L能抑制活化T细胞分泌IFN-γ、IL-6和IL-17并呈剂量依赖效应,但不影响IL-2、IL-4和IL-10。结论 BD960抑制作用在T细胞增殖为细胞活化的后期,同时抑制IL-6、IL-17A和IFN-γ等促炎细胞因子的分泌,抑制作用不同于FK506。BD960有望作为先导化合物开发新型免疫抑制剂。 展开更多

关键词 苯并噻唑衍生物 T细胞增殖 免疫抑制剂

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二硫苏糖醇和β-巯基乙醇在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应 被引量：2

14

作者 杨平 李敏惠 +4 位作者 常山 何建荣 罗兴艳 刘阳 邹强 《医学研究生学报》 CAS 2009年第9期916-919,共4页

目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品... 目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品和未还原蛋白样品间隔上样进行电泳,通过观察未还原样品的电泳条带来判断是否受到邻近泳道还原剂的扩散影响。结果:还原剂DTT或2-ME可扩散到邻近泳道,使未还原蛋白样品发生部分还原,扩散效应的强弱与还原剂的含量成正相关。结论:SDS-PAGE电泳过程中DTT和2-ME均存在扩散效应,在同一块凝胶上同时分离还原蛋白和未还原蛋白时,至少应该在2个泳道间设置一空白泳道,以规避扩散效应。 展开更多

关键词 还原剂 扩散效应 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳

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小分子化合物BD691抑制活化T细胞增殖的机制研究 被引量：1

15

作者 孙海 莫春芬 +7 位作者 罗兴燕 郭慧杰 胡松 唐信威 樊苗 赖翼 刘阳 邹强 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第7期677-682,共6页

目的 T细胞的异常增殖在自身免疫疾病的发生发展中起重要作用。文中探究小分子化合物BD691抑制T细胞增殖的机制。方法免疫磁珠纯化人外周血T细胞,anti-CD3/CD28抗体或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测BD691对活化T细胞的增殖抑制... 目的 T细胞的异常增殖在自身免疫疾病的发生发展中起重要作用。文中探究小分子化合物BD691抑制T细胞增殖的机制。方法免疫磁珠纯化人外周血T细胞,anti-CD3/CD28抗体或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测BD691对活化T细胞的增殖抑制作用、静息T细胞的细胞毒性作用以及对T细胞活化标志CD25表达的影响,双抗夹心法酶联免疫吸附试验检测BD691对T细胞分化相关的细胞因子分泌的影响。结果 BD691抑制anti-CD3/CD28抗体或同种异型抗原刺激的T细胞增殖,IC50分别为(8.5±1.5)、(7.2±1.3)μmol/L,BD691对人静息初始T细胞和人静息PBMC均无显著细胞毒性。在未经anti-CD3/CD28抗体活化的T细胞中,CD25+表达的细胞仅占细胞总数的1.6%,而活化后CD25+细胞比例增加到68.0%。同时,0、3.3、10、30μmol/LBD691处理活化的T细胞,却未观察到CD25的表达有明显的改变,而免疫抑制剂FK506(0.1μmol/L)则显著降低活化T细胞中CD25的表达(14.9%)。T细胞活化后G0/G1期细胞比例为57.7%,当BD691作用于活化的T细胞后此比例升高,呈剂量依赖效应。BD691对IFN-γ、IL-6和IL-17的抑制呈剂量依赖效应。结论BD691不影响T细胞活化,但通过阻滞细胞周期于G0/G1期抑制活化T细胞的增殖。BD691对与Th1和Th17细胞分化密切相关的关键细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17有显著抑制作用,提示BD691有望作为先导化合物开发抑制T细胞异常增殖和分化的新型免疫抑制剂。 展开更多

关键词 T细胞增殖 苯并噻唑衍生物 T细胞分化

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草果挥发油诱导鼻咽癌6-10B细胞凋亡的机制研究 被引量：10

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作者 高鸣乡 蒋佩文 +2 位作者 李敏惠 杨平 代敏 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第6期992-997,共6页

研究草果挥发油对鼻咽癌6-10B细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的机制。采用CCK-8法测定草果挥发油对6-10B细胞的增殖抑制效应;倒置显微成像法观察草果挥发油对6-10B细胞的形态改变;Annexin V/PI双染法检测草果挥发油对6-10B细胞的凋亡... 研究草果挥发油对鼻咽癌6-10B细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的机制。采用CCK-8法测定草果挥发油对6-10B细胞的增殖抑制效应;倒置显微成像法观察草果挥发油对6-10B细胞的形态改变;Annexin V/PI双染法检测草果挥发油对6-10B细胞的凋亡诱导效应;JC-1染色法检测草果挥发油诱导6-10B细胞的线粒体膜电位改变情况;Western blot检测草果挥发油对6-10B细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果显示,草果挥发油抑制6-10B细胞增殖,且呈剂量依赖性,其24 h的IC_(50)为0.14 mg/mL。形态学结果显示草果挥发油可诱导6-10B细胞呈典型的凋亡形态。Annexin V/PI双染和JC-1染色结果显示,草果挥发油诱导6-10B细胞凋亡并引起细胞线粒体膜电位(MMP)下降。Western blot结果表明,草果挥发油作用6-10B细胞24 h后线粒体途径促凋亡蛋白Bax和Bim表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL表达降低。综上说明草果挥发油抑制鼻咽癌6-10B细胞增殖,线粒体凋亡途径可能参与了草果挥发油诱导的鼻咽癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 草果挥发油 鼻咽癌 细胞凋亡

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苯并恶唑衍生物PO-291抑制活化T细胞增殖与功能的机制研究 被引量：3

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作者 王思雨 熊静 +3 位作者 周宏 罗兴燕 刘阳 赖翼 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期925-933,共9页

目的探究PO-291抑制活化T细胞增殖与功能的机制。方法免疫磁珠法纯化人外周血T细胞,抗CD3/CD28抗体或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测细胞增殖、细胞凋亡、细胞活力、CD25和CD69表达以及细胞周期;ELISA检测细胞因子IL-2、IL-4、I... 目的探究PO-291抑制活化T细胞增殖与功能的机制。方法免疫磁珠法纯化人外周血T细胞,抗CD3/CD28抗体或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测细胞增殖、细胞凋亡、细胞活力、CD25和CD69表达以及细胞周期;ELISA检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17和IFN-γ的分泌水平;蛋白免疫印迹检测STAT5与p70S6K的表达和磷酸化。结果 PO-291抑制抗CD3/CD28抗体或同种异型抗原活化的T细胞增殖,IC_(50)分别为(8.09±1.04)μmol·L^(-1)、(8.01±0.95)μmol·L^(-1)。在完全抑制活化T细胞增殖的浓度下,PO-291不诱导T细胞凋亡,且在浓度达到160μmol·L^(-1)时,不影响静息T细胞和PBMC的细胞存活。PO-291不影响活化T细胞表达CD25、CD69和分泌IL-2,但阻滞T细胞周期于G_0/G_1期。PO-291不影响IL-2、IL-4、IL-10,但明显抑制IFN-γ、IL-6、IL-17的分泌。PO-291不影响STAT5和p70S6K表达,但抑制STAT5磷酸化,且可增强p70S6K磷酸化。结论 PO-291通过阻断JAK3/STAT5信号通路,抑制活化T细胞增殖,提示PO-291有望成为先导化合物,为开发用于器官移植以及自身免疫性疾病的新型药物提供新的方向。 展开更多

关键词 PO-291 免疫抑制剂 T细胞增殖 细胞因子 流式细胞术 JAK3

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氮网球花定碱盐酸盐对活化T细胞增殖的抑制作用 被引量：2

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作者 邓弘仙 吴利红 +7 位作者 张云惠 范诗逸 黄玲 蒋海静 赖翼 杨淑霞 刘阳 罗兴燕 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期43-50,共8页

目的探究氮网球花定碱盐酸盐(NMHC)抑制活化T细胞增殖的作用机制。方法Ficoll法提取分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠法纯化出PBMC中的T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化纯化后的静息T细胞。NMHC 0.125,0.5,2和8μmol·L^(-1)... 目的探究氮网球花定碱盐酸盐(NMHC)抑制活化T细胞增殖的作用机制。方法Ficoll法提取分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠法纯化出PBMC中的T细胞,抗人CD3/CD28抗体活化纯化后的静息T细胞。NMHC 0.125,0.5,2和8μmol·L^(-1)与静息T细胞作用,用流式细胞术检测细胞毒性(96 h)、活化T细胞增殖(96 h)、T细胞表面活化标志CD25表达(24 h)和活化T细胞细胞周期(72 h)。NMHC 0.125,0.5,2和8 pmol·L^(-1)与活化T细胞作用24或48 h,用ELISA测定培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-6、IL-17A和干扰素γ(IFN-γ)水平。结果NMHC 0.125,0.5,2和8μmol·L^(-1)抑制抗CD3/CD28抗体活化的T细胞增殖,IC_(50)为(0.28±0.04)μmol·L^(-1),且与静息T细胞作用96 h无显著细胞毒性。NMHC显著抑制CD25表达,具有浓度效应关系(r=-0.980,P<0.05)。NMHC 2和8μmol·L^(-1)作用72 h可调节细胞周期,G_(0)/G_(1)期细胞增加(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05),具有浓度-效应关系(r=0.920,P<0.05);细胞上清液中IL-2,IL-6,IL-17A和IFN-γ水平显著降低(P<0.05)。结论NMHC可抑制T细胞活化标志分子CD25的表达和IL-2的分泌,阻滞细胞周期于G_(0)/G_(1)期,同时抑制炎性细胞因子IL-6,IL-17A和IFN-γ的分泌,这可能是其抑制T细胞增殖的作用机制之一。 展开更多

关键词 氮网球花定碱盐酸盐 T细胞 细胞增殖 免疫抑制

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α-倒捻子素通过激活ROS/p38 MAPK/Bax级联反应诱导B淋巴瘤Ramos细胞凋亡的机制研究

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作者 蔡紫微 孙毅松 +5 位作者 汪林 廖玉娇 余欢 黄敏 李润滋 李敏惠 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2022年第11期1832-1837,共6页

本文以B淋巴瘤Ramos细胞为研究对象,探讨α-倒捻子素(α-mangostin,α-Ma)对B淋巴瘤的增殖抑制作用并初步阐释其分子机制。首先通过CCK-8法探究α-Ma对Ramos细胞的增殖抑制作用;再利用倒置显微镜成像法观察α-Ma对Ramos细胞形态的影响;... 本文以B淋巴瘤Ramos细胞为研究对象,探讨α-倒捻子素(α-mangostin,α-Ma)对B淋巴瘤的增殖抑制作用并初步阐释其分子机制。首先通过CCK-8法探究α-Ma对Ramos细胞的增殖抑制作用;再利用倒置显微镜成像法观察α-Ma对Ramos细胞形态的影响;随后利用DCFH-DA、JC-1、Annexin V-FITC/PI荧光染色和流式细胞术检测α-Ma对Ramos细胞活性氧水平、线粒体膜电位、凋亡的影响;并通过蛋白免疫印迹技术测定α-Ma作用Ramos后细胞凋亡相关蛋白及信号通路蛋白的表达情况。CCK-8分析结果显示,α-Ma以药物浓度依赖和时间依赖的方式抑制Ramos细胞增殖,其24 h和48 h的IC值分别为14.84μmol/L和8.087μmol/L;倒置显微镜成像法发现α-Ma能减少Ramos细胞数量并诱导细胞形态发生凋亡样改变;流式细胞术检测发现,α-Ma能增加Ramos细胞内活性氧水平、降低细胞线粒体膜电位,同时诱导细胞凋亡;蛋白免疫印迹结果显示,α-Ma下调caspase-3/9的表达,上调cleaved caspase-3/9、cleaved PARP、Bax、Bim和p-p38 MAPK的表达。综上所述,α-Ma对B淋巴瘤Ramos细胞具有增殖抑制作用,其可能机制是α-Ma活化ROS/p38 MAPK/Bax级联反应诱导B淋巴瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 α-倒捻子素 B淋巴瘤 ROS p38 MAPK 线粒体途径

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