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题名小檗碱通过抑制肝星状细胞自噬改善小鼠肝纤维化
被引量：8
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作者
谭悦浩
李灿
邓峰美
张嫔
刘漪沦
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机构
四川护理职业学院
四川大学
成都医学院
雅安市名山区人民医院
成都医学院临床医学院第一附属医院四川省老年医学临床医学研究中心
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出处
《成都医学院学报》
CAS
2023年第1期33-38,共6页
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基金
雅安市科学技术局应用技术研究与开发项目(No:2020yyjskf05)
成都医学院研究生科研创新基金(No:YCX2020-14,No:YCX2020-25)。
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文摘
目的 研究小檗碱(BBR)对肝星状细胞(HSC)自噬与活化的调控及其抗肝纤维化作用。方法分别采用不同质量浓度BBR(0、2、5、10、20、50μmol/L)干预血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB,20μg/L)处理的LX-2细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力;采用不同质量浓度BBR(0、2、5、10μmol/L)干预PDGF-BB(20μg/L)处理的LX-2细胞24 h或48 h,使用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)方法检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移率。实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫印迹法检测小檗碱(5μmol/L)对LX-2细胞α-SMA,COL1A1 mRNA及蛋白表达的影响;检测Atg5、 Becn1、 Atg7、 LC3、p62的表达。动物实验共18只小鼠,随机分为3组,对照组[橄榄油(Oil)+磷酸盐缓冲液(PBS)]、模型组[四氯化碳(CCl4)+PBS]和药物干预组(CCl4+BBR),每组6只小鼠,造模5周,2次/周。第3周开始给与BBR干预,2次/周,连续给药3周。造模5周后处死小鼠,检测各组小鼠肝脏组织中的羟脯胺酸水平,苏木素-伊红(HE)和天狼星红染色观察肝脏组织炎性细胞浸润及胶原沉积情况。结果 BBR作用LX-2细胞24 h的半数抑制浓度(IC50)为(31.51±2.66)μmol/L;BBR可呈剂量依赖性地抑制LX-2细胞的增殖及迁移(P<0.05)。BBR(5μmol/L)下调LX-2细胞的α-SMA、COL1A1 mRNA和蛋白表达水平,抑制细胞活化(P<0.05)。BBR(5μmol/L)下调LX-2细胞的Atg5 mRNA和蛋白表达水平,上调p62蛋白表达水平及减少LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,抑制细胞自噬(P<0.05)。CCl4+BBR与CCl4+PBS组小鼠肝脏比较,BBR干预后,肝细胞脂肪变性坏死和炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维沉积减少,羟脯胺酸含量减少(P<0.05)。结论 BBR在小鼠体内具有抗肝纤维化的作用,在体外可抑制LX-2细胞的增殖、迁移及活化,这可能与BBR抑制HSC自噬水平有关。
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关键词
小檗碱
自噬
肝星状细胞
肝纤维化
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Keywords
Berberine
Autophagy
Hepatic stellate cells
Liver fibrosis
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分类号
R575
[医药卫生—消化系统]
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