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高糖及糖基化终末产物对视网膜Müller细胞缺氧诱导因子-1α介导缺氧信号通路的影响 被引量：11
1
作者 宋明霞 谢学军 +2 位作者 万李 方杨 张梅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第12期1101-1105,共5页
目的探讨高糖以及糖基化终末产物(advanced glycationend products,AGEs)对体外培养的视网膜Müller细胞低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α介导缺氧信号通路的影响。方法采用改进的酶消化法培养新生5-7 d SD大鼠视网... 目的探讨高糖以及糖基化终末产物(advanced glycationend products,AGEs)对体外培养的视网膜Müller细胞低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α介导缺氧信号通路的影响。方法采用改进的酶消化法培养新生5-7 d SD大鼠视网膜Müller细胞,纯化培养至第2代后,以2×106mL-1密度接种于48孔培养板中,根据培养液中葡萄糖及AGEs含量不同,分为正常组、模拟高糖组(葡萄糖终浓度为50 mmol·L-1)、低AGEs及高AGEs组(培养液AGEs终浓度分别为50 mg·L-1、100 mg·L-1),每组设6个复孔,干预48 h后,以ELISA法测定细胞培养上清液中HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达量以及脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain,PHD)1、2、3的活性;以RT-PCR测定Müller细胞HIF-1αmRNA及VEGF mRNA相对内参的表达量。结果高AGEs组HIF-1α蛋白表达量为(3.248±0.404)μg·L-1,明显高于正常组的(2.577±0.158)μg·L-1及高糖组的(2.600±0.131)μg·L-1,差异均有统计学意义(均为P<0.05);低AGEs组HIF-1αmRNA相对表达量为3.205±0.865,明显高于高糖组的2.438±0.444及高AGEs组的1.935±0.191,差异均有统计学意义(均为P<0.05);正常组VEGF蛋白含量和VEGF mRNA的相对表达量分别为(532.249±19.922)μg·L-1和1.348±0.314,均低于高糖组的(566.661±24.979)μg·L-1和2.265±0.677、低AGEs组的(590.565±29.725)μg·L-1和2.001±0.574及高AGEs组的(593.646±16.339)μg·L-1和2.063±0.759,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常组PHD1活性为(99.969±11.066)μg·L-1,高于高糖组的(80.987±5.910)μg·L-1、低AGEs组的(88.809±6.303)μg·L-1及高AGEs组的(75.519±4.914)μg·L-1,而低AGEs组PHD1活性高于高AGEs组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);PHD2活性正常组为(131.266±2.614)μg·L-1,低于低AGEs组的(142.896±8.323)μg·L-1及高AGEs组的(149.998±15.013)μg·L-1,差异均有统计学意义(均为P<0.05);PHD3在各组之间差异均无统计学意义(P=0.066)。结论 AGEs比高糖更能诱导视网膜Müller细胞HIF-1α的高表达,且HIF-1α的表达强度与AGEs浓度有关。 展开更多
关键词 糖基化终末产物 视网膜MÜLLER细胞 低氧诱导因子-1Α 血管内皮生长因子 脯氨酸羟化酶
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凝血酶对体外培养的视网膜色素上皮细胞生长的影响 被引量：3
2
作者 郑燕林 王万杰 +3 位作者 袁晓辉 李晟 黄映红 曾洁萍 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期489-490,共2页
目的 探讨凝血酶对视网膜色素上皮细胞的影响。 方法 利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,观察不同浓度的凝血酶对视网膜色素上皮细胞的影响。 结果 各浓度的凝血酶对体外培养的视网膜色素上皮细胞具有促进增殖的作用,且40 U/ml尤为明显... 目的 探讨凝血酶对视网膜色素上皮细胞的影响。 方法 利用体外培养的视网膜色素上皮细胞,观察不同浓度的凝血酶对视网膜色素上皮细胞的影响。 结果 各浓度的凝血酶对体外培养的视网膜色素上皮细胞具有促进增殖的作用,且40 U/ml尤为明显。结论凝血酶对体外培养的视网膜色素上皮细胞具有促进增殖的作用,这为探讨增生性玻璃体视网膜病变的发病机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 凝血酶 视网膜色素上皮细胞 增殖 体外培养 增生性玻璃体视网膜病变
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补肾活血剂对高糖和(或)缺氧状态下视网膜神经节细胞活力及谷氨酰胺合成酶活性的影响 被引量：10
3
作者 马殿伟 谢学军 +1 位作者 张梅 万李 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第6期510-514,共5页
目的观察补肾活血中药对高糖和(或)缺氧状态下体外共同培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)和Müller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)的影响,并对其作用机制进行探讨。方法以中药血清药理学... 目的观察补肾活血中药对高糖和(或)缺氧状态下体外共同培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)和Müller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)的影响,并对其作用机制进行探讨。方法以中药血清药理学方法获得补肾活血复方中药含药血清。建立RGC与视网膜Müller细胞共同培养模型,在体外共同培养细胞的培养液中加入葡萄糖(终浓度为50 mmol·L-1)/连二亚硫酸钠(终浓度为1.0 mmol·L-1)造成细胞高糖(缺氧)模型(高糖/缺氧组),仅加入终浓度为50 mmol·L-1葡萄糖造成细胞高糖模型(高糖组),仅加入终浓度为1.0 mmol·L-1连二亚硫酸钠造成细胞缺氧模型(缺氧组);在此基础上加入体积分数20%中药含药血清进行中药血清干预。在实验干预24 h、48 h及72 h 3个时间段分别以酶联免疫吸附法(ELISA)测定体外共同培养细胞外液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量和GS活性。结果高糖组、缺氧组及高糖/缺氧组共同培养的细胞LDH漏出量在24 h、72 h比正常对照组均明显增加(均为P<0.05),缺氧组视网膜Müller细胞GS活性在48 h比正常对照组明显降低(P<0.05);高糖组视网膜Müller细胞GS活性在24 h、48 h和72 h三个时间点均比正常对照组增高(均为P<0.05),补肾活血中药血清能够增加缺氧条件下及高糖缺氧条件下视网膜Müller细胞GS活性,并且该作用随着时间的延长其作用逐渐加强。结论补肾活血中药血清可能通过降低高糖和(或)缺氧状态下共同培养的RGC与Müller细胞细胞膜的通透性,提高细胞活力。同时提高视网膜Müller细胞和RGC共同培养时视网膜Müller细胞GS活性,转化Glu,减轻Glu的兴奋性毒性,从而起到细胞保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 补肾活血剂 高糖 缺氧 视网膜神经节细胞
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水蛭素对血小板源性生长因子及受体的影响 被引量：2
4
作者 郑燕林 王毅 +4 位作者 武文忠 王明芳 袁小辉 李晟 王万杰 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期476-478,共3页
目的 通过观察水蛭素对血小板源性生长因子(PDGF)及受体(PDGF-R)的影响,深入探讨水蛭素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)形成的机制。方法 利用穿孔性眼外伤的动物模型,分别给予10U/ml和20U/ml的水蛭素于玻璃体腔内,用酶联免疫法(ELISA... 目的 通过观察水蛭素对血小板源性生长因子(PDGF)及受体(PDGF-R)的影响,深入探讨水蛭素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)形成的机制。方法 利用穿孔性眼外伤的动物模型,分别给予10U/ml和20U/ml的水蛭素于玻璃体腔内,用酶联免疫法(ELISA)测定玻璃体中PDGF的含量,用免疫组织化学法观察玻璃体腔内细胞增殖相关抗原(Ki-67)、白介素1β转换酶(interlukin 1-β converting enzyme,ICE)和PDGFR的表达。结果 造模后3d和28dPDGF的检测结果显示生理盐水对照组(434.88±56,75,457.17±74.39)与剂量Ⅰ组之间(285.95±54.04,322.50±106.93)差异有显著性(P<0.01);PDGF-R的检测结果显示生理盐水对照组(147.82±14.95,141.05±19.03)与剂量Ⅰ组(87.27±20.80,2.57±16.75)和剂量Ⅱ组(97.67±11.37,68.26±5.6)之间差异有显著性(P<0.01);ICE的检测结果显示生理盐水对照组(38.51±3.04,39.74±3.78)与剂量Ⅰ组(57.01±10.02,57.61±9.04)和剂量Ⅱ组(56.22±4.95,57.45±8.25)之间差异有显著性(P<0.01)。Ki-67检测结果显示造模后28d生理盐水对照组(127.83±128.72)与剂量Ⅰ组(51.67±18.61)和剂量Ⅱ组(51.50±31.55)之间差异有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论 展开更多
关键词 水蛭素 血小板源性生长因子 血小板源性生长因子受体 增生性玻璃体视网膜病变 预防 治疗
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补肾活血剂对高糖和(或)缺氧状态下共同培养视网膜神经节细胞和Müller细胞谷氨酸代谢的影响 被引量：7
5
作者 马殿伟 谢学军 +1 位作者 张梅 万李 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第5期419-423,共5页
目的应用中药血清药理学方法探讨补肾活血中药复方对体外共同培养的视网膜神经节细胞和Müller细胞谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法氨基酸分析仪检测共同培养细胞外液中Glu释放量,[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断共同培养细胞的... 目的应用中药血清药理学方法探讨补肾活血中药复方对体外共同培养的视网膜神经节细胞和Müller细胞谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法氨基酸分析仪检测共同培养细胞外液中Glu释放量,[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断共同培养细胞的Glu摄取功能测定中药血清干预高糖和(或)缺氧状态下体外共同培养细胞外液中Glu的释放氉量和摄入量。结果在48 h时段,缺氧组及高糖缺氧组共同培养细胞的Glu释放量均比正常对照组明显增加(均为P<0.05),而高糖组Glu释放量比正常对照组明显减少(P<0.05);补肾活血中药血清能明显降低正常条件下(24 h、48 h、72 h)、缺氧及高糖缺氧条件下(48 h、72 h)共同培养细胞的释放量(均为P<0.05)。在24 h、48 h、72 h时段缺氧组及高糖缺氧组共同培养细胞的Glu摄入量均比正常对照组明显降低(均为P<0.05);高糖组共同培养细胞的Glu摄取功能在24 h和72 h时段均比正常对照组增强(均为P<0.05),但48 h时段Glu摄入比正常对照组降低(P<0.05);补肾活血中药血清能明显提高正常及缺氧条件下24 h、48 h时段、高糖条件下48 h时段以及高糖和(或)缺氧条件下72 h时段共同培养细胞的Glu摄入量(均为P<0.05)。结论高糖和(或)缺氧能够引起体外共同培养的视网膜神经节细胞和视网膜Müller细胞的Glu代谢障碍,这可能是补肾活血法对高糖和(或)缺氧状态下视网膜神经节细胞的保护作用机制之一。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 补肾活血剂 视网膜MÜLLER细胞 视网膜神经节细胞
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补肾活血剂对TGF-β_2干预缺氧状态下视网膜Müller细胞谷氨酸代谢的影响 被引量：2
6
作者 马殿伟 谢学军 +1 位作者 张梅 万李 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第9期804-807,共4页
目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行... 目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行视网膜Müller细胞培养。根据[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断体外培养第2代视网膜Müller细胞的Glu的摄入功能;以酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定体外培养细胞外液中谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活性。结果与正常对照组比较,12 h、24 h、48 h时缺氧组、TGF-β2+缺氧组的Glu摄入量增加(均为P<0.05),而24 h、48h时GS活性明显下降(均为P<0.05);与缺氧组比较,TGF-β2+缺氧组12 h、48 h时Glu摄入量减少,48 h时GS活性下降(P<0.05)。24 h、48 h时TGF-β2干预组较正常对照组Glu摄入量增加(均为P<0.05),12 h时GS活性增加(P<0.05)。与TGF-β2+缺氧组比较,中药血清+TGF-β2+缺氧组12 h、24 h时Glu摄入量减少(均为P<0.05),但GS的活性增加(均为P<0.05)。结论缺氧使视网膜Müller细胞的Glu摄入功能明显增强,GS活性明显降低,而TGF-β2加重缺氧条件下Müller细胞GS活性的降低;在缺氧和TGF-β2同时存在条件下,补肾活血中药血清下调视网膜Müller细胞的Glu摄入能力,增加GS的活性。 展开更多
关键词 补肾活血 转化生长因子-Β2 缺氧 视网膜MÜLLER细胞 谷氨酸 谷氨酰胺合成酶
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视网膜神经纤维层检测在诊断青光眼及近视合并青光眼中的价值 被引量：1
7
作者 蔡东梅 段俊国 +2 位作者 张日新 郑丽凤 张雪梅 《眼科新进展》 CAS 2008年第12期950-952,共3页
视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度的现代检测手段主要有海德堡视网膜断层扫描仪、光学相干断层成像术和偏振激光扫描仪等。检测RNFL厚度可以对青光眼的早期诊断提供依据。与青光眼一样,近视眼的RNFL也会变薄。所... 视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度的现代检测手段主要有海德堡视网膜断层扫描仪、光学相干断层成像术和偏振激光扫描仪等。检测RNFL厚度可以对青光眼的早期诊断提供依据。与青光眼一样,近视眼的RNFL也会变薄。所以近视合并青光眼时经常容易被误诊而延误青光眼的治疗时机。因此我们必须将单纯近视眼与近视合并青光眼区别开来。对RNFL的检测能否将单纯近视眼及近视合并青光眼区别开,国内外学者存在不同观点,现综述如下。 展开更多
关键词 视网膜神经纤维层 青光眼 近视眼
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