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γ射线引起HLA-B8表达缺失黑色素瘤细胞株的克隆研究
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作者 邓卫文 谢弘 +3 位作者 GianniMelioli BarociSergio GiulianaCangemi ClaudiaSemino 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期340-342,共3页
用700radγ射线照射HLA-B8+黑色素瘤细胞,于照射后第3天用抗HLA-B8IgM型单抗及补体做免疫选择。存活细胞培养1w后,进行第2次免疫选择。存活细胞继续培养1w,然后用有限稀释法在96孔平底细胞培养板内进... 用700radγ射线照射HLA-B8+黑色素瘤细胞,于照射后第3天用抗HLA-B8IgM型单抗及补体做免疫选择。存活细胞培养1w后,进行第2次免疫选择。存活细胞继续培养1w,然后用有限稀释法在96孔平底细胞培养板内进行克隆。从5×106个受诱变的细胞中共获得6个细胞克隆,其中1个克隆经流式细胞仪表型分析显示HLA-B8无表达,此细胞的RNA经RT-PCR电泳分析表明HLA-B各亚型基因的总表达量减弱,提示克隆到HLA-B8表达缺失的突变株。本研究方法的建立及此突变株的获得,为进一步制备广谱型黑色素瘤“瘤苗”以及研究HLAclassⅠ各亚型分子在肿瘤免疫中的作用提供了有力工具。 展开更多
关键词 Γ射线 HLA-B8 黑色素瘤 细胞株 克隆 瘤苗
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