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强骨康疏方通过抑制HIF-1α/BNIP3自噬信号通路减少类风湿性关节炎大鼠的破骨细胞分化
1
作者
李玮怡
江露
+4 位作者
张宗星
陈丹
包卓玛
黄丽
袁林
《南方医科大学学报》
北大核心
2025年第7期1389-1396,共8页
目的研究强骨康疏方(QGKSF)对HIF-1α/BNIP3自噬信号通路的调控作用及其改善类风湿关节炎的作用机制。方法制备含药血清,RAW264.7细胞体外培养,低氧+RANKL诱导破骨细胞。分别设置对照组、模型组、甲氨蝶呤组(MTX)、QGKSF低剂量组(QGKSF...
目的研究强骨康疏方(QGKSF)对HIF-1α/BNIP3自噬信号通路的调控作用及其改善类风湿关节炎的作用机制。方法制备含药血清,RAW264.7细胞体外培养,低氧+RANKL诱导破骨细胞。分别设置对照组、模型组、甲氨蝶呤组(MTX)、QGKSF低剂量组(QGKSF-L)、QGKSF高剂量组(QGKSF-H)。CCK-8法检测细胞活力;TRAP染色观察各组TRAP阳性多核细胞的数量;鬼笔环肽染色检测F-肌动蛋白环形成情况;MDC染色观察自噬泡;透射电镜观察自噬小体;ELISA检测炎症细胞因子(IL-6、TNF-α)水平;Western blotting检测HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、P62、TRAP的蛋白水平;RT-qPCR检测HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3、P62、TRAP的mRNA水平。结果与对照组比较,模型组可见大量TRAP阳性细胞,F-肌动蛋白环形成增多,自噬荧光强度增加,自噬小体增多(P<0.001);与模型组比较,MTX组、QGKSF-L组和QGKSF-H组的TRAP阳性细胞数量和F-肌动蛋白环形成减少,自噬荧光强度减弱,自噬小体减少(P<0.01)。与对照组相比,模型组IL-6、TNF-α水平升高(P<0.001);经过MTX和QGKSF治疗后IL-6、TNF-α水平有所降低(P<0.001)。与对照组相比,模型组HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3、TRAP蛋白及mRNA水平升高,P62蛋白及mRNA水平降低(P<0.01);经MTX及QGKSF治疗后,HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3、TRAP蛋白及mRNA水平降低,P62蛋白及mRNA水平升高(P<0.05)。结论低氧条件下,QGKSF可能通过抑制HIF-1α/BNIP3自噬信号通路来减少RANKL诱导的RAW264.7向破骨细胞分化,从而发挥治疗RA骨破坏的作用。
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关键词
强骨康疏方
类风湿关节炎骨破坏
自噬
HIF-1α/BNIP3信号通路
破骨细胞
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题名
强骨康疏方通过抑制HIF-1α/BNIP3自噬信号通路减少类风湿性关节炎大鼠的破骨细胞分化
1
作者
李玮怡
江露
张宗星
陈丹
包卓玛
黄丽
袁林
机构
湖北民族大学
风湿
性疾病发生与干预湖北省重点实验室
湖北民族大学医学部
石柱县中
医院
全
科
医学
科
恩施慧宜中西医结合风湿医院风湿病科
出处
《南方医科大学学报》
北大核心
2025年第7期1389-1396,共8页
基金
国家自然科学基金(82460827)
湖北省科技计划项目(2021CSA069)
风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室2024年度开放基金(PT022406)。
文摘
目的研究强骨康疏方(QGKSF)对HIF-1α/BNIP3自噬信号通路的调控作用及其改善类风湿关节炎的作用机制。方法制备含药血清,RAW264.7细胞体外培养,低氧+RANKL诱导破骨细胞。分别设置对照组、模型组、甲氨蝶呤组(MTX)、QGKSF低剂量组(QGKSF-L)、QGKSF高剂量组(QGKSF-H)。CCK-8法检测细胞活力;TRAP染色观察各组TRAP阳性多核细胞的数量;鬼笔环肽染色检测F-肌动蛋白环形成情况;MDC染色观察自噬泡;透射电镜观察自噬小体;ELISA检测炎症细胞因子(IL-6、TNF-α)水平;Western blotting检测HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、P62、TRAP的蛋白水平;RT-qPCR检测HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3、P62、TRAP的mRNA水平。结果与对照组比较,模型组可见大量TRAP阳性细胞,F-肌动蛋白环形成增多,自噬荧光强度增加,自噬小体增多(P<0.001);与模型组比较,MTX组、QGKSF-L组和QGKSF-H组的TRAP阳性细胞数量和F-肌动蛋白环形成减少,自噬荧光强度减弱,自噬小体减少(P<0.01)。与对照组相比,模型组IL-6、TNF-α水平升高(P<0.001);经过MTX和QGKSF治疗后IL-6、TNF-α水平有所降低(P<0.001)。与对照组相比,模型组HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3、TRAP蛋白及mRNA水平升高,P62蛋白及mRNA水平降低(P<0.01);经MTX及QGKSF治疗后,HIF-1α、BNIP3、Bcl-2、Beclin1、LC3、TRAP蛋白及mRNA水平降低,P62蛋白及mRNA水平升高(P<0.05)。结论低氧条件下,QGKSF可能通过抑制HIF-1α/BNIP3自噬信号通路来减少RANKL诱导的RAW264.7向破骨细胞分化,从而发挥治疗RA骨破坏的作用。
关键词
强骨康疏方
类风湿关节炎骨破坏
自噬
HIF-1α/BNIP3信号通路
破骨细胞
Keywords
Qianggu Kangshu Formula
rheumatoid arthritis bone destruction
autophagy
HIF-1α/BNIP3 signaling pathway
osteoclasts
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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作者
出处
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1
强骨康疏方通过抑制HIF-1α/BNIP3自噬信号通路减少类风湿性关节炎大鼠的破骨细胞分化
李玮怡
江露
张宗星
陈丹
包卓玛
黄丽
袁林
《南方医科大学学报》
北大核心
2025
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