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副鸡嗜血杆菌贵州株的分离鉴定 被引量:2
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作者 林汉卿 温贵兰 +6 位作者 汪德生 张升波 徐丽 李昌红 文明 周碧君 程振涛 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期194-198,共5页
为查明贵州省某规模化养鸡场患病鸡的病原,从患病鸡内脏及眶下窦处采集病料,分离到1株细菌,对其进行革兰染色镜检、生化试验及16SrRNA序列比对。序列比对表明,该分离株16SrRNA与GenBank中各亚型副鸡嗜血杆菌株16SrRNA的核苷酸同源性在93... 为查明贵州省某规模化养鸡场患病鸡的病原,从患病鸡内脏及眶下窦处采集病料,分离到1株细菌,对其进行革兰染色镜检、生化试验及16SrRNA序列比对。序列比对表明,该分离株16SrRNA与GenBank中各亚型副鸡嗜血杆菌株16SrRNA的核苷酸同源性在93.6%~99.4%之间,证实其为副鸡嗜血杆菌,将其命名为HPG-GZ-2017。遗传进化树分析表明,HPG-GZ-2017与C型标准菌株CAPM 5111(GenBank:M75056)处于同一小分支,亲缘关系较近,核苷酸同源性也较高。动物感染试验表明其致病性较低。药敏试验表明,HPG-GZ-2017对头孢克洛高敏,对红霉素中敏,对四环素、环丙沙星、卡那霉素、青霉素、诺氟沙星、头孢拉定低敏,对复方新诺明、链霉素耐药。研究结果可为副鸡嗜血杆菌病的防治提供依据。 展开更多
关键词 副鸡嗜血杆菌 分离 鉴定
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应用间接竞争ELISA检测山羊痘抗体方法的建立 被引量:2
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作者 何光志 周颖 +6 位作者 田维毅 王平 王文佳 韩洁 安永如 简昌友 崔小东 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第35期20125-20127,共3页
[目的]为山羊痘疫苗接种山羊后产生的抗体效价检测和山羊痘的诊断奠定基础。[方法]采用Vero-E6传代细胞分离山羊痘病毒抗原,建立检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA方法。[结果]检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA的最佳工作条件:最佳抗原包被... [目的]为山羊痘疫苗接种山羊后产生的抗体效价检测和山羊痘的诊断奠定基础。[方法]采用Vero-E6传代细胞分离山羊痘病毒抗原,建立检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA方法。[结果]检测山羊痘抗体的间接竞争ELISA的最佳工作条件:最佳抗原包被浓度为1μg/ml,兔抗高免血清最佳稀释度为1∶16 000,待检血清的工作浓度为1∶400,阳性血清的临界值为45.19%,阴性血清的临界值为38.89%。用该试验建立的ELISA方法检测3 000份接种山羊痘疫苗的山羊血清,阳性检出率为83.33%,琼脂扩散试验检出率为77.33%,竞争抑制ELISA方法较琼脂扩散试验方法敏感。[结论]该方法具有特异性高、快速、敏感等特点,适合检测山羊痘抗体。 展开更多
关键词 山羊痘 间接竞争ELISA 山羊痘抗体
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重组AS16蛋白抗原检测猪蛔虫抗体间接ELISA方法的建立 被引量:1
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作者 何光志 安永如 +3 位作者 周颖 简昌友 张太华 崔小东 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第31期17710-17712,共3页
[目的]建立检测猪蛔虫抗体的间接ELISA方法。[方法]用猪蛔虫重组AS16蛋白作为包被抗原,通过方阵滴定试验确定ELISA的最佳工作条件,包括抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度、最佳包被液、抗原封闭时间、血清反应时间、酶标二抗工作时间和... [目的]建立检测猪蛔虫抗体的间接ELISA方法。[方法]用猪蛔虫重组AS16蛋白作为包被抗原,通过方阵滴定试验确定ELISA的最佳工作条件,包括抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度、最佳包被液、抗原封闭时间、血清反应时间、酶标二抗工作时间和间接ELISA判定标准,并通过交叉试验现场对1 200份猪血清样本采用该试验建立的ELISA和AGP同时进行蛔虫抗体的检测。[结果]ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为10μg/ml,37℃1 h,4℃过夜;血清稀释度为18∶0;酶标SPA稀释度为1∶10 000,37℃孵育45 min。该试验制备的ELISA酶标板的临界值为0.196。交叉试验检测表明,ELISA方法阳性检出率为45%,而AGP阳性检出率为30%。该方法具有特异高、快速、敏感等特点。[结论]研究结果证实重组AS16蛋白具有良好的反应原性,可以用来建立ELISA方法诊断猪蛔虫病。 展开更多
关键词 猪蛔虫:重组ASl6蛋白 EHSA
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