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中华猕猴桃果仁油非饱和脂肪酸(果王素)上调含EH结构域蛋白2(EHD2)抑制肺腺癌小鼠移植瘤生长和转移 被引量:8
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作者 刘理静 周美玲 +1 位作者 陈智魁 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期622-627,共6页
目的观察含EH结构域蛋白2(EHD2)在中华猕猴桃果仁油非饱和脂肪酸(果王素)抑制肺腺癌移植瘤生长和转移中的作用。方法按随机数字表法将32只接种Lewis肺腺癌细胞的C57BL/6J小鼠分为对照组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组,每组8只。接... 目的观察含EH结构域蛋白2(EHD2)在中华猕猴桃果仁油非饱和脂肪酸(果王素)抑制肺腺癌移植瘤生长和转移中的作用。方法按随机数字表法将32只接种Lewis肺腺癌细胞的C57BL/6J小鼠分为对照组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组,每组8只。接种后第4天起,对照组小鼠予以9 g/L氯化钠溶液灌胃,果王素处理组小鼠分别给予(60、120、240)mg/kg果王素灌胃。测量移植瘤体积,第24天将小鼠断颈处死。取肺组织观察肿瘤转移情况,分离移植瘤并称量瘤体质量,计算转移抑制率与肿瘤抑制率;实时荧光定量PCR测定EHD2 mRNA水平,Western blot法检测移植瘤组织EHD2蛋白水平,免疫组织化学染色检测移植瘤组织EHD2表达。结果与对照组比较,(60、120、240)mg/kg果王素处理组皮下移植瘤的生长速度、体积、质量和肺转移结节数明显降低,而肿瘤抑制率和肺转移抑制率显著增加,皮下移植瘤组织EHD2的表达及其mRNA和蛋白水平增高。与60 mg/kg果王素处理组相比,(120、240)mg/kg果王素处理组上述指标变化更明显且呈剂量依赖性。结论果王素能上调EHD2表达,抑制肺腺癌小鼠移植瘤的生长和转移。 展开更多
关键词 中华猕猴桃果仁油非饱和脂肪酸(果王素) 含EH结构域蛋白2(EHD2) 肺腺癌 肿瘤转移 肿瘤治疗
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LncRNA GAS5通过miR-21/ADAMTS-1途径抑制大鼠肺纤维化 被引量:5
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作者 刘理静 钱红 +3 位作者 王乐 胡柯 贺兼斌 田玉梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1737-1743,共7页
目的探讨生长阻滞特异性转录本5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肺纤维化的影响及分子机制。方法采用生物信息学、荧光素酶报告基因分析GAS5、miR-21、ADAMTS-1间的竞争性内源RNA(ceRNA)关系。SD大鼠分为对照组、LV-GAS5... 目的探讨生长阻滞特异性转录本5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肺纤维化的影响及分子机制。方法采用生物信息学、荧光素酶报告基因分析GAS5、miR-21、ADAMTS-1间的竞争性内源RNA(ceRNA)关系。SD大鼠分为对照组、LV-GAS5组和LV-GAS5+miR-21 agomir组,经气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型后,分别给予尾静脉注射0.2 mL的PBS、LV-GAS5、LV-GAS5+miR-21 agomir。d 28,处死大鼠,收集血液,采用ELISA分析血清PICP和PⅢNP水平,提取肺组织,HE染色和Masson染色观察病理改变,并用qRT-PCR检测GAS5、miR-21、ADAMTS-1表达,Western blot检测ADAMTS-1、ColⅠ、ColⅢ表达。结果GAS5、miR-21、ADAMTS-1之间存在ceRNA调控模式。与对照组比较,GAS5过表达减轻肺组织病理改变,降低血清PICP、PⅢNP水平,上调肺组织GAS5、ADAMTS-1表达,降低肺组织miR-21、ColⅠ、ColⅢ水平(P <0.01)。此外,miR-21agomir处理逆转了GAS5过表达对肺纤维化大鼠肺组织病理改变、胶原沉积和ADAMTS-1表达的影响(P <0.01)。结论GAS5通过内源性吸附miR-21,上调ADAMTS-1表达,促进ColⅠ、ColⅢ降解,减轻肺纤维化病变。 展开更多
关键词 肺纤维化 GAS5 MIR-21 ADAMTS-1 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸(果王素)在大鼠放射性肺损伤中的防治作用及其机制探索 被引量:4
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作者 贺立洋 魏文婕 +5 位作者 尹勤 刘理静 钟柏英 刘存根 周美玲 贺兼斌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第2期154-162,共9页
目的:观察中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸(果王素)在大鼠放射性肺损伤中的防治作用,并通过检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)和转化生长因子-β1(TGF-β1)探讨其机制。方法:将90只Sprague-Daw... 目的:观察中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸(果王素)在大鼠放射性肺损伤中的防治作用,并通过检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)和转化生长因子-β1(TGF-β1)探讨其机制。方法:将90只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、果王素组(60、120、240 mg/kg),每组18只。除空白组外,其余组大鼠予以6MV-X线全胸部放射(3Gy/次,2次/周,总剂量18Gy)构建放射性肺损伤大鼠模型,各果王素组在放射前一周分别按60、120、240 mg/kg果王素剂量加入0.9%氯化钠1 mL每日灌胃1次,空白组、模型组在同一时间予以0.9%氯化钠1 mL灌胃1次。各组分别于放射后14 d、28 d、56 d随机处死动物6只,取肺组织行HE染色、Masson染色观察病理学改变,并检测肺组织SOD、GSH-Px、MPO含量及TGF-β1的表达。结果:与模型组相比,60、120、240 mg/kg果王素可显著减轻肺泡炎和放射性肺纤维化程度,降低肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,增加抗氧化酶SOD、GSH-Px含量及减少氧化酶MPO含量,下调TGF-β1的表达,且剂量越高效果越明显。结论:果王素对放射性肺损伤具有防治作用,其机制可能与减少氧化应激损伤、下调TGF-β1表达有关。 展开更多
关键词 中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸(果王素) 放射性肺损伤 氧化应激 转化生长因子-Β1
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中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸通过下调CTGF抑制胶原蛋白合成抗大鼠肺纤维化 被引量:2
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作者 刘理静 贺立洋 +3 位作者 魏文婕 周美玲 贺彬 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1011-1017,共7页
目的观察结缔组织生长因子(CTGF)及胶原蛋白合成在果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸)抗大鼠肺纤维化(PF)中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组... 目的观察结缔组织生长因子(CTGF)及胶原蛋白合成在果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸)抗大鼠肺纤维化(PF)中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组大鼠以9 g/L氯化钠溶液气管内注射,后5组大鼠则气管内注射博莱霉素A5构建PF模型,建模后次日,后4组大鼠分别以(60、120、240)mg/kg果王素和5 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,而前2组予9 g/L氯化钠溶液灌胃,均每天1次。处理后第28天,处死大鼠取肺组织,HE和Masson染色评价PF病变程度,测定羟脯氨酸(HYP)含量,实时荧光定量PCR检测CTGF、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,Western blot法测定CTGF、α-SMA、1型胶原蛋白(Col1)、Col3的蛋白水平,免疫组织化学染色分析CTGF表达情况。结果与模型组相比,(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组肺泡炎及PF程度显著减轻,肺组织HYP含量减少,CTGF、α-SMA mRNA与蛋白表达下调,Col1、Col3蛋白水平降低。上述指标的改变在(60、120、240)mg/kg果王素处理组之间有剂量依赖性。此外,(60、120)mg/kg果王素处理组上述指标较5 mg/kg醋酸泼尼松组升高,而240 mg/kg果王素处理组与后者相比差异不明显。结论果王素下调肺组织CTGF表达,降低α-SMA水平,进而减少Col1、Col3合成,发挥抗PF作用。 展开更多
关键词 果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸) 结缔组织生长因子 肺纤维化 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 1型胶原蛋白(Col1) 3型胶原蛋白(Col3)
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LncRNA GAS5通过吸附miR-21促进ADAMTS-1介导的肺成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原降解 被引量:2
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作者 刘理静 钱红 +3 位作者 王乐 贺兼斌 胡柯 田玉梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1449-1455,共7页
目的观察生长阻滞特异性转录本5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肺成纤维细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)表达的影响,并探讨其机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,用GAS5慢病毒过表达载体(LV-GAS5)处理,荧光实时... 目的观察生长阻滞特异性转录本5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肺成纤维细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)表达的影响,并探讨其机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,用GAS5慢病毒过表达载体(LV-GAS5)处理,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测GAS5、miR-21水平,qRT-PCR和Western blot测定I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-1(ADAMTS-1)、ColⅠ、ColⅢ表达。生物信息学、双荧光素酶报告基因分析GAS5、ADAMTS-1 3′-非翻译区与miR-21的靶向结合情况。以miR-21模拟物(mimic)或ADAMTS-1 siRNA转染MRC-5细胞48 h,再用LV-GAS5处理细胞相同时间,qRT-PCR和Western blot检测ADAMTS-1、ColⅠ、ColⅢ表达。结果过表达GAS5降低miR-21水平,抑制ColⅠ、ColⅢ蛋白表达,增加ADAMTS-1 mR NA与蛋白水平(P <0.01)。GAS5、miR-21、ADAMTS-1之间存在竞争性内源RNA (ceR NA)作用模式。miR-21 mimic或ADAMTS-1 siR NA预处理几乎完全逆转过表达GAS5对ColⅠ、ColⅢ降解的促进作用(P <0.01)。结论 GAS5作为ceR NA竞争性结合miR-21,上调ADAMTS-1表达,从而促进MRC-5细胞ColⅠ、ColⅢ降解。 展开更多
关键词 生长阻滞特异性转录本5 MIR-21 ADAMTS-1 竞争性内源RNA Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原
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果王素下调肿瘤坏死因子α和血小板源性生长因子B减轻大鼠放射性肺损伤 被引量:1
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作者 刘理静 钱红 +3 位作者 贺立洋 魏文婕 周美玲 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期332-338,共7页
目的观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血小板源性生长因子B(PDGF-B)在果王素减轻大鼠放射性肺损伤(RILI)中的作用.方法96只雄性健康SD大鼠,随机分为空白对照组、模型组、(60、240 mg/kg)果王素处理组,各组24只.后3组大鼠利用6 MV的X射线18... 目的观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血小板源性生长因子B(PDGF-B)在果王素减轻大鼠放射性肺损伤(RILI)中的作用.方法96只雄性健康SD大鼠,随机分为空白对照组、模型组、(60、240 mg/kg)果王素处理组,各组24只.后3组大鼠利用6 MV的X射线18 Gy分次照射全肺,构建RILI动物模型,照射后次日,后2组大鼠分别给予60 mg/kg、240 mg/kg果王素灌胃,而以9 g/L氯化钠溶液灌胃前2组大鼠,每天均1次.后3组分别于第14、28、56天随机处死8只大鼠,空白对照组在第56天全部处死作为总体对照.收集血液并分离,ELISA检测血清中TNF-α和PDGF-B含量.留取肺组织,HE和Masson染色评价肺泡炎及肺纤维化(PF)情况,测定羟脯氨酸(HYP)含量,实时定量PCR和免疫组织化学染色法分别检测肺组织中TNF-α、PDGF-B mRNA及蛋白表达.结果与同期模型组相比,(60、240)mg/kg果王素处理组14 d、28 d肺泡炎和28 d、56 d PF病变显著减轻.与空白对照组比较,模型组28 d、56 d肺组织HYP含量增加,而各时间点血清及肺组织TNF-α和PDGF-B表达升高.与模型组同期相比,(60、240)mg/kg果王素处理组14 d、28 d血清和肺组织TNF-α表达下调,28 d、56 d肺组织HYP含量以及血清和肺组织PDGF-B表达降低.并且,240 mg/kg果王素处理组同期上述指标较60 mg/kg果王素处理组下降.结论果王素能减轻大鼠RILI,与其早期下调TNF-α表达和中晚期降低PDGF-B水平有关. 展开更多
关键词 果王素 放射性肺损伤 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 血小板源性生长因子B(PDGF-B) 羟脯氨酸 放射性肺炎
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青藤碱激活Keap1/Nrf2信号通路抑制氧化应激和肺纤维化 被引量:12
7
作者 刘理静 钱红 +4 位作者 孟庆欣 张翔 贺彬 贺兼斌 魏英民 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第9期979-987,共9页
目的:探讨青藤碱(SIN)对氧化应激损伤、肺纤维化的保护作用及与Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)信号通路的关系。方法:通过过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导MRC-5细胞建立氧化应激损伤模型,并予SIN处理,采用CCK-8法检... 目的:探讨青藤碱(SIN)对氧化应激损伤、肺纤维化的保护作用及与Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)信号通路的关系。方法:通过过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导MRC-5细胞建立氧化应激损伤模型,并予SIN处理,采用CCK-8法检测细胞活力,生化试剂盒检测丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,Western blot检测Keap1、Nrf2蛋白表达。将30只SD大鼠随机分为对照组、博莱霉素A5(BLM)组和BLM+SIN组,每组包含10只动物,BLM组、BLM+SIN组气管内注射BLM建立大鼠肺纤维化模型,对照组气管内注射等体积9 g/L氯化钠溶液,造模后次日,BLM+SIN组以SIN灌胃,其余两组给予9 g/L氯化钠溶液灌胃,第28天处死大鼠,分离肺组织,通过HE和Masson染色观察肺组织病理学改变,测定肺组织MDA含量及SOD、GSH-Px、CAT活性,Western blot检测Keap1、Nrf2蛋白表达。结果:相对于H_(2)O_(2)组,SIN干预后MRC-5细胞活力增加,MDA含量降低,SOD、GSH-Px和CAT活性升高,下调Keap1表达,促进Nrf2核移位。与BLM组相比,SIN给药降低大鼠肺泡炎、肺纤维化病变和评分及肺组织MDA含量,增加肺组织SOD、GSH-Px和CAT活性,下调肺组织Keap1表达,升高胞核Nrf2水平。结论:SIN可能通过激活Keap1/Nrf2信号通路抑制氧化应激损伤,减轻大鼠肺纤维化。 展开更多
关键词 青藤碱 肺纤维化 氧化应激 Kelch样ECH相关蛋白1 核因子E2相关因子2
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青藤碱阻断miR-21/ADAMTS-1信号通路改善博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化
8
作者 刘理静 钱红 +3 位作者 孟庆欣 张翔 魏英民 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期721-728,共8页
目的 探讨青藤碱对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法 培养MRC-5细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以确定青藤碱最佳处理浓度与时间,选取80μmol/L青藤碱处理MRC-5细胞48 h,或者miR-21模拟物(miR-21 mimic... 目的 探讨青藤碱对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法 培养MRC-5细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以确定青藤碱最佳处理浓度与时间,选取80μmol/L青藤碱处理MRC-5细胞48 h,或者miR-21模拟物(miR-21 mimic)或1型血小板应答蛋白基序的解整联蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)小干扰RNA转染MRC-5细胞后,再用青藤碱处理,采用实时荧光定量PCR, Western blot法分别检测miR-21、 ADAMTS-1、 1型胶原蛋白(Col1)和3型胶原蛋白(Col3)表达。将SD大鼠随机分为对照组、青藤碱组和青藤碱联合miR-21激动剂(miR-21 agomir)组,每组10只。通过博莱霉素A5一次性注入大鼠气管内构建PF模型,分别给予9 g/L氯化钠溶液、青藤碱、青藤碱联合miR-21 agomir处理,28 d处死大鼠,分离肺组织行HE和Masson染色,实时荧光定量PCR、 Western blot法检测ADAMTS-1、 Col1和Col3表达,ELISA测定血清1型前胶原羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原氨基端前肽(P3NP)水平。结果 青藤碱下调MRC-5细胞miR-21表达,升高ADAMTS-1水平,促进Col1和Col3降解,干扰miR-21/ADAMTS-1信号通路部分逆转青藤碱对Col1、 Col3降解的促进作用。青藤碱减少SD大鼠肺泡炎与PF评分,降低血清P1CP、 P3NP水平,上调肺组织ADAMTS-1表达,下调Col1、 Col3表达,这些作用被miR-21 agomir逆转。结论 青藤碱阻断miR-21/ADAMTS-1途径促进Col1和Col3降解,抑制大鼠PF。 展开更多
关键词 青藤碱 肺纤维化 微小RNA21(miR-21) 1型血小板应答蛋白基序的解整联蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1) 1型胶原蛋白(Col1) 3型胶原蛋白(Col3)
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