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铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测
被引量:
1
1
作者
宋若楠
刘春草
+9 位作者
李航
王真真
贾楠楠
朱杰
李传峰
程松
梁留存
刘光清
王金泉
孟春春
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第4期91-96,共6页
为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物,本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板,通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游,并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中,获得重组质...
为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物,本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板,通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游,并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中,获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE),蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定,获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后,使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性,效价确定为8×104 IU/mg,显示出良好的应用前景。
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关键词
铁蛋白
犬α干扰素
融合表达
抗病毒活性
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职称材料
题名
铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测
被引量:
1
1
作者
宋若楠
刘春草
李航
王真真
贾楠楠
朱杰
李传峰
程松
梁留存
刘光清
王金泉
孟春春
机构
新疆农业大学
中国
农业科学院上海兽医研究所
德国纳博科临中国检测实验室
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第4期91-96,共6页
基金
中国农业科学院青年英才培育工程专项经费。
文摘
为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物,本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板,通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游,并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中,获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE),蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定,获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后,使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性,效价确定为8×104 IU/mg,显示出良好的应用前景。
关键词
铁蛋白
犬α干扰素
融合表达
抗病毒活性
Keywords
Ferritin
canine interferonα
fusion expression
antiviral activity
分类号
S859.79 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测
宋若楠
刘春草
李航
王真真
贾楠楠
朱杰
李传峰
程松
梁留存
刘光清
王金泉
孟春春
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024
1
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