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慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达
被引量：
10
1
作者
王露
翟玮玮
+4 位作者
杨向荣
王芳
李见
张强
李玉云
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1475-1480,共6页
目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点...
目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点,设计4组靶向Fas的shRNA序列,合成寡核苷酸,与经过BamHI、EcoRI双酶切后的LV3载体连接获得重组慢病毒,通过感染293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定。体外培养人UC-MSCs,使用包装好的慢病毒感染UCMSCs,应用Real time-PCR和Western blotting检测感染后细胞中Fas mRNA及蛋白的表达情况。结果经酶切以及基因测序鉴定证明慢病毒载体构建成功,病毒悬液滴度为3×108TU/ml。Real time-PCR和Western blotting结果显示干扰组细胞的Fas表达水平较对照组显著降低。结论慢病毒介导的SiRNA能有效沉默UC-MSCs中Fas基因的表达。
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关键词
慢病毒
SIRNA
FAS
脐带间充质干细胞
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职称材料
题名
慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达
被引量：
10
1
作者
王露
翟玮玮
杨向荣
王芳
李见
张强
李玉云
机构
蚌埠医学院临床
检验
诊断学实验中心
徐州市第四人民医院检验科
蚌埠医学院第一附属
医院
检验
科
蚌埠医学院临床
检验
诊断学教研室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1475-1480,共6页
基金
安徽省教育厅自然科学基金(Kj2012A198)
蚌埠医学院研究生科研创新计划(Byycx1317)
文摘
目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点,设计4组靶向Fas的shRNA序列,合成寡核苷酸,与经过BamHI、EcoRI双酶切后的LV3载体连接获得重组慢病毒,通过感染293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定。体外培养人UC-MSCs,使用包装好的慢病毒感染UCMSCs,应用Real time-PCR和Western blotting检测感染后细胞中Fas mRNA及蛋白的表达情况。结果经酶切以及基因测序鉴定证明慢病毒载体构建成功,病毒悬液滴度为3×108TU/ml。Real time-PCR和Western blotting结果显示干扰组细胞的Fas表达水平较对照组显著降低。结论慢病毒介导的SiRNA能有效沉默UC-MSCs中Fas基因的表达。
关键词
慢病毒
SIRNA
FAS
脐带间充质干细胞
Keywords
lentiviral vector small interferiing RNA Fas umbilical cord mesenchymal stem cells
分类号
R556.5 [医药卫生—血液循环系统疾病]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达
王露
翟玮玮
杨向荣
王芳
李见
张强
李玉云
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
10
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