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霍乱毒素B亚单位对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响 被引量:2
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作者 李向阳 杨莹 +4 位作者 张励才 颜超 孔凡运 郑葵阳 汤仁仙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期585-589,共5页
目的探讨侧脑室注射霍乱毒素B亚单位(CTB)对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响。方法 C57雌性小鼠侧脑室注射CTB,运用流式细胞术检测外周血免疫细胞亚群变化;流式微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中细胞因子及趋化因子的变化。结果 CTB能够明... 目的探讨侧脑室注射霍乱毒素B亚单位(CTB)对小鼠免疫细胞及细胞因子的影响。方法 C57雌性小鼠侧脑室注射CTB,运用流式细胞术检测外周血免疫细胞亚群变化;流式微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中细胞因子及趋化因子的变化。结果 CTB能够明显升高单核巨噬细胞、CD4^+T细胞及B细胞的比例;炎症因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-9(IL-9)及趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、B淋巴细胞趋化因子(BLC)、γ干扰素诱导的单核因子(Mig)、调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)也相应升高。结论侧脑室注射CTB能够明显改变小鼠免疫应答状态。 展开更多
关键词 霍乱毒素B亚单位 趋化因子 细胞因子
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日本血吸虫感染对小鼠肝脏脂代谢影响机制的初步研究 被引量:1
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作者 张波 郑葵阳 +1 位作者 吴忠道 张蓓蓓 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期108-114,共7页
目的探讨日本血吸虫感染对小鼠肝脏肝细胞脂质沉积的影响及作用机制。方法10只Balb/c小鼠随机分为正常组、感染组,每组5只,感染组小鼠经皮肤感染日本血吸虫尾蚴(15±1)条/只,饲养6周。HE染色观察肝脏病理改变,油红O染色观察肝脏脂... 目的探讨日本血吸虫感染对小鼠肝脏肝细胞脂质沉积的影响及作用机制。方法10只Balb/c小鼠随机分为正常组、感染组,每组5只,感染组小鼠经皮肤感染日本血吸虫尾蚴(15±1)条/只,饲养6周。HE染色观察肝脏病理改变,油红O染色观察肝脏脂质沉积,外周血检测肝功能和血脂水平,实时定量PCR检测肝脏脂代谢相关基因表达水平。可溶性虫卵抗原SEA刺激LO2肝细胞系,Nile red染色观察细胞脂质变化情况,实时定量PCR检测LO2细胞脂质合成相关基因表达水平。结果与正常组比,小鼠感染日本血吸虫后,肝脏出现明显的虫卵肉芽肿和纤维化,外周血中的ALT、AST含量显著升高(t_(ALT)=6.432,P<0.01;t_(AST)=3.259,P<0.05)。感染后肝脏中脂滴明显减少;外周血TG、CHOL的水平显著降低(t_(TG)=7.154,P<0.01;t_(CHOL)=8.749,P<0.001);肝脏中脂质合成相关基因Acly、Accs、Fasn表达水平明显降低(t_(Acly)=3.765,P<0.05;t_(Accs)=2.859,P<0.05;t_(Fasn)=3.888,P<0.05),脂质转运相关基因CD36以及脂质氧化分解相关基因Cpt 1表达水平明显升高(t_(CD36)=8.250,P<0.01;t_(Cpt1)=1.297,P<0.05);细胞水平结果显示,SEA组与DMEM组比,SEA刺激后LO2细胞脂质含量明显减少,脂质合成相关基因SREBP-1C、ACLY、ACC、FASN以及甘油三酯合成相关基因DGAT和GPAT的表达水平显著降低(均P<0.05)。结论日本血吸虫感染通过抑制肝细胞脂质合成和促进脂质分解下调肝脏脂质沉积水平。 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂质代谢 肝脏 肝细胞 日本血吸虫可溶性虫卵抗原
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二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003抗戊型肝炎病毒的研究
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作者 刘丹 张继凯 +2 位作者 丁晓慧 郭虹波 王文世 《动物医学进展》 北大核心 2024年第2期70-74,共5页
研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣... 研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣壳蛋白表达的抑制作用,细胞毒性试验和间接免疫荧光计算ASLAN003的半数毒性浓度(CC_(50))和半数抑制浓度(IC_(50))。结果表明,ASLAN003在0.2~50μmol/L浓度范围内能显著抑制HEV复制子在HEK 293T和Huh7细胞内的复制;ASLAN003在1μmol/L浓度能有效抑制HEV RNA复制,使其下降50%;在0.4μmol/L的浓度能够显著抑制衣壳蛋白ORF2的表达。通过对ASLAN003的细胞毒性和抑制HEV效果进行研究发现,其CC_(50)为294μmol/L,而IC_(50)为0.231μmol/L。说明ASLAN003能够有效抑制HEV复制,提示其可作为潜在抗病毒药物。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 二氢乳清酸脱氢酶抑制剂 病毒复制 抗病毒药物
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NLRP3炎症小体在肝疾病中的作用 被引量:10
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作者 孔德龙 崔洁 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期129-134,共6页
NLRP3炎症小体是一种多蛋白复合物,能识别来自损伤细胞和病原生物释放的信号分子,介导caspase-1活化,从而剪切活化细胞因子IL-1β和IL-18。IL-1β是一种正反馈式促炎因子,可放大炎症反应。与其他炎症反应不同,NLRP3炎症小体活化需要两... NLRP3炎症小体是一种多蛋白复合物,能识别来自损伤细胞和病原生物释放的信号分子,介导caspase-1活化,从而剪切活化细胞因子IL-1β和IL-18。IL-1β是一种正反馈式促炎因子,可放大炎症反应。与其他炎症反应不同,NLRP3炎症小体活化需要两种信号参与,因而具有较高的激活阈值。NLRP3炎症小体活化与肝疾病发病机制有密切关系,在不同病因诱导的肝疾病及实验动物模型研究中已证明,NLRP3炎症小体活化在肝细胞损伤、细胞活化以及促进肝纤维化中发挥重要作用。这些研究有助于转化应用到临床治疗实践中,为肝疾病的治疗提供理论依据和新的药物作用靶点。本文主要探讨了炎症小体的功能、活化机制及其不同肝损伤过程中的活化及生物学功能效应,并根据国内外最新相关研究报道,对NLRP3炎症小体在酒精性肝病、非酒精性肝病、慢性HCV感染和肝纤维化中的作用进行综述。 展开更多
关键词 肝脏疾病 NLRP3炎症小体 信号通路
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鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白的截短表达及其兔抗血清制备
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作者 孙芬芬 高玉龙 +1 位作者 潘伟 王笑梅 《江苏农业科学》 2018年第17期175-177,共3页
通过制备原核表达鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白(VP1),以进行抗VP1蛋白兔源血清制备。首先以CIAV M9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增N末端截短129个氨基酸的VP1基因片段(VP1Nd129),经EcoRⅠ/SalⅠ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的p ET28a... 通过制备原核表达鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白(VP1),以进行抗VP1蛋白兔源血清制备。首先以CIAV M9905株基因组DNA为模板,通过PCR扩增N末端截短129个氨基酸的VP1基因片段(VP1Nd129),经EcoRⅠ/SalⅠ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的p ET28a(+)载体连接,获得阳性重组子p ET-28a-VP1Nd129,将其转化入E.coli BL21(DE3)菌,经IPTG诱导,表达出VP1Nd129蛋白;后者通过Ni-NTA树脂纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗血清,用间接免疫荧光试验和Western blot试验检测该血清的特异性,用酶联免疫吸附试验(ELISA)滴定其效价。结果显示,CAV VP1Nd129基因在大肠杆菌中正确表达,并主要以包涵体形式存在;纯化后免疫兔获得的抗血清可与真核细胞表达的全长VP1蛋白特异性反应。表明本试验成功对VP1蛋白进行截短表达,制备的兔抗血清反应性好,为深入开展CIAV的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 VP1蛋白 原核表达 纯化 兔抗血清
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华支睾吸虫来源的分子伴侣rCsHscB对小鼠慢性溃疡性结肠炎有治疗作用 被引量:3
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作者 华慧 董昕 +6 位作者 张雨钊 方凡 张蓓蓓 李向阳 于倩 郑葵阳 颜超 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期664-670,共7页
目的研究华支睾吸虫来源的分子伴侣rCsHscB对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠慢性溃疡性结肠炎的作用。方法诱导大肠杆菌表达体外获得高纯度重组rCsHscB蛋白。将C57BL/6雄性小鼠随机分为NC组(n=10)、rCsHscB组(n=10)、DSS组(n=15)和DSS+rCs... 目的研究华支睾吸虫来源的分子伴侣rCsHscB对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠慢性溃疡性结肠炎的作用。方法诱导大肠杆菌表达体外获得高纯度重组rCsHscB蛋白。将C57BL/6雄性小鼠随机分为NC组(n=10)、rCsHscB组(n=10)、DSS组(n=15)和DSS+rCsHscB组(n=15),采用2%的DSS常规建立小鼠慢性溃疡性结肠炎模型。rCsHscB组和DSS+rCsHscB组在给予DSS同一周的第4、7天腹腔注射125μg/mL rCsHscB,NC组和DSS组注射无内毒素PBS。第84天处死小鼠后对结肠组织进行HE和Masson染色,并采用流式细胞术检测外周血和小肠固有层淋巴细胞中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞的表达,ELISA检测结肠匀浆上清中IL-6、IL-10和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)含量,Westernblot检测结肠组织中MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、JNK和P38的磷酸化和非磷酸化水平。结果与NC组相比,rCsHscB组小鼠未出现不良反应。DSS组小鼠结肠组织病理损伤显著,胶原纤维沉积加重,外周血及小肠固有层淋巴细胞中CD4^(+)T细胞比例升高、CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞比值明显上升。结肠匀浆上清中IL-6和MCP-1水平显著升高,IL-10分泌没有明显变化(P=0.11),ERK1/2、JNK和P38的磷酸化水平显著升高;与DSS组比较,DSS+rCsHscB组小鼠结肠组织病理损伤缓解、胶原纤维沉积减少,外周血及小肠固有层淋巴细胞中CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞比值明显降低,结肠匀浆上清中IL-6及MCP-1水平显著下降,IL-10水平显著上升(P=0.003),ERK1/2、JNK和P38磷酸化水平显著降低。结论rCsHscB对小鼠慢性溃疡性结肠炎具有一定的预防改善作用,其可能是通过MAPK抑制促炎因子产生并调控CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞平衡来发挥作用的。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 rCsHscB 溃疡性结肠炎 炎症反应
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GANT61通过减缓滑膜细胞增殖抑制Balb/c小鼠关节炎发展 被引量:1
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作者 李向阳 秦苏萍 +5 位作者 程万鹏 华慧 于倩 颜超 郑葵阳 汤仁仙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第9期1389-1393,共5页
目的探讨GANT61对小鼠关节炎的影响。方法 Balb/c小鼠随机分为3组:正常对照组、胶原诱导的关节炎(CIA)组和GANT61组。CIA组和GANT61组运用牛Ⅱ型胶原诱发小鼠关节炎模型,GANT61组于二次免疫后第0、3、6、9、12、15、18、21天尾静脉注射G... 目的探讨GANT61对小鼠关节炎的影响。方法 Balb/c小鼠随机分为3组:正常对照组、胶原诱导的关节炎(CIA)组和GANT61组。CIA组和GANT61组运用牛Ⅱ型胶原诱发小鼠关节炎模型,GANT61组于二次免疫后第0、3、6、9、12、15、18、21天尾静脉注射GANT61。同时观察四肢关节及脚掌情况,并进行临床评分。于初免后第39天,处死小鼠,收集外周血及血清,检测中性粒细胞及细胞因子变化,收集一侧关节,病理学检查,收集另一侧关节滑膜组织,培养滑膜成纤维细胞。流式细胞术及CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 GANT61能够减轻关节肿胀程度,降低关节临床评分,同时关节炎症细胞浸润程度降低。中性粒细胞数量降低,细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量也低于CIA组。滑膜细胞增殖程度降低,凋亡数量增加。结论 GANT61能够通过抑制滑膜细胞增殖,减轻Balb/c小鼠关节炎病理进程。 展开更多
关键词 GANT61 滑膜成纤维细胞 关节炎
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