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异补骨脂甲素调控miR-124对小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的影响
被引量：
1
1
作者
王贝
袁晨燕
姚瑞芹
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1110-1116,共7页
目的探讨异补骨脂甲素(isobavachin,IBA)调控微小RNA-124(miR-124)对小鼠J1胚胎干细胞向神经细胞分化的影响。方法采用qRT-PCR和免疫荧光染色分别检测IBA干预或抑制miR-124表达的J1细胞中miR-124、八聚体转录因子4(octamer transcriptio...
目的探讨异补骨脂甲素(isobavachin,IBA)调控微小RNA-124(miR-124)对小鼠J1胚胎干细胞向神经细胞分化的影响。方法采用qRT-PCR和免疫荧光染色分别检测IBA干预或抑制miR-124表达的J1细胞中miR-124、八聚体转录因子4(octamer transcription factor-4,OCT4)和神经微丝H(neurofilament-H, NFH)的表达。使用Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因和Western blot实验验证miR-124和锌指蛋白18(zinc finger and BTB domain containing 18, ZBTB18)的靶向关系。在J1细胞中转染pcDNA-ZBTB18或miR-124 mimics、ZBTB18 shRNA,免疫荧光染色检测细胞中OCT4和NFH的表达。结果 IBA可显著抑制J1细胞中OCT4蛋白表达,并上调miR-124和NFH表达;而抑制miR-124表达后所得结果相反。miR-124可靶向调控ZBTB18蛋白表达。在J1细胞中过表达ZBTB18,OCT4阳性表达率升高而NFH阳性表达率降低;敲减ZBTB18可在一定程度上减弱miR-124对IBA干预J1细胞OCT4和NFH表达的促进或抑制作用。结论 IBA能够促进J1细胞中miR-124表达,而miR-124可靶向调控ZBTB18,从而调节OCT4和NFH蛋白表达,这可能是IBA促进小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞的作用机制。
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关键词
异补骨脂甲素
微小RNA-124
锌指蛋白18
小鼠胚胎干细胞
神经细胞
细胞分化
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职称材料
纹状体GDNF调控Glu兴奋性毒性影响PD运动症状
被引量：
1
2
作者
陈静
徐娜娜
高殿帅
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第12期1858-1864,共7页
目的探讨纹状体胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)含量降低,加重帕金森病(PD)运动症状的机制。方法雄性C57/BL小鼠(6~8周龄),纹状体立体定位注射(PBS、AAV-GDNF、AAV-shGDNF),联合亚急性PD模型,腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(...
目的探讨纹状体胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)含量降低,加重帕金森病(PD)运动症状的机制。方法雄性C57/BL小鼠(6~8周龄),纹状体立体定位注射(PBS、AAV-GDNF、AAV-shGDNF),联合亚急性PD模型,腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)30 mg/(kg·d),连续5 d,随机分为PBS组、阴性对照组(NC组)、AAV-shGDNF组、MPTP组、MPTP+AAV-GDNF组、MPTP+AAV-shGDNF组;采用行为学实验(转棒、爬杆和旷场)评估小鼠运动能力,ELISA试剂盒检测纹状体谷氨酸(Glu)含量,Western blot等技术检测GLAST、GLT-1、GluN2B等表达及分布,TUNEL染色观察纹状体神经元凋亡。结果与NC组比较,AAV-shGDNF组小鼠纹状体GDNF表达下调,小鼠运动能力下降,Glu含量升高、Glu转运体(GLAST、GLT-1)表达分布减少。与PBS组比较,MPTP组小鼠纹状体Glu含量升高、GluN2B表达降低。与MPTP组比较,MPTP+AAV-GDNF组小鼠运动能力提高、纹状体Glu含量降低、GluN2B表达升高、神经元凋亡减少;而MPTP+AAV-shGDNF组小鼠运动能力下降、纹状体Glu含量升高、GluN2B表达降低、神经元凋亡增多。结论PD病理进程中,纹状体GDNF表达降低可能通过下调Glu转运体的表达,促进Glu对神经元的兴奋性毒性损伤,加重运动症状。
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关键词
帕金森病
胶质细胞系源性神经营养因子
谷氨酸
纹状体
运动症状
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职称材料
华支睾吸虫排泄分泌抗原McAb的制备及双抗夹心ELISA的初步建立
被引量：
1
3
作者
朱慕春
刘劲峰
+1 位作者
陆忠奎
孔德龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期873-877,共5页
目的以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效...
目的以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效价单克隆抗体并鉴定;单抗经HRP标记和配对筛选,建立双抗夹心ELISA并分析其特异性及灵敏度。结果成功制备出抗华支睾吸虫ESA McAb:B7、F1;抗体类型均为IgG1,抗体滴度高,特异性好,以筛选到的两株单抗建立双抗夹心ELISA法,最佳线性范围为0.014~0.248μg/mL(R2=0.996 9),最低检出限为0.014μg/mL。结论初步建立了检测华支睾吸虫ESA的免疫诊断方法。
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关键词
华支睾吸虫
单克隆抗体
ELISA
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职称材料
题名
异补骨脂甲素调控miR-124对小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的影响
被引量：
1
1
作者
王贝
袁晨燕
姚瑞芹
机构
东南
大学
附属中大医院检验科
徐州医科大学生物学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1110-1116,共7页
文摘
目的探讨异补骨脂甲素(isobavachin,IBA)调控微小RNA-124(miR-124)对小鼠J1胚胎干细胞向神经细胞分化的影响。方法采用qRT-PCR和免疫荧光染色分别检测IBA干预或抑制miR-124表达的J1细胞中miR-124、八聚体转录因子4(octamer transcription factor-4,OCT4)和神经微丝H(neurofilament-H, NFH)的表达。使用Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因和Western blot实验验证miR-124和锌指蛋白18(zinc finger and BTB domain containing 18, ZBTB18)的靶向关系。在J1细胞中转染pcDNA-ZBTB18或miR-124 mimics、ZBTB18 shRNA,免疫荧光染色检测细胞中OCT4和NFH的表达。结果 IBA可显著抑制J1细胞中OCT4蛋白表达,并上调miR-124和NFH表达;而抑制miR-124表达后所得结果相反。miR-124可靶向调控ZBTB18蛋白表达。在J1细胞中过表达ZBTB18,OCT4阳性表达率升高而NFH阳性表达率降低;敲减ZBTB18可在一定程度上减弱miR-124对IBA干预J1细胞OCT4和NFH表达的促进或抑制作用。结论 IBA能够促进J1细胞中miR-124表达,而miR-124可靶向调控ZBTB18,从而调节OCT4和NFH蛋白表达,这可能是IBA促进小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞的作用机制。
关键词
异补骨脂甲素
微小RNA-124
锌指蛋白18
小鼠胚胎干细胞
神经细胞
细胞分化
Keywords
isobavachin
microRNA-124
zinc finger and BTB domain containing 18
mouse embryonic stem cells
neurons
cell differentiation
分类号
R322.8 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.21 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
纹状体GDNF调控Glu兴奋性毒性影响PD运动症状
被引量：
1
2
作者
陈静
徐娜娜
高殿帅
机构
徐州
医科
大学
形态学实验教学中心
徐州
医科
大学
神经
生物学
教研室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第12期1858-1864,共7页
基金
国家自然科学基金(编号:81971006)
徐州市推动科技创新项目(编号:KC19016)
徐州医科大学校课题(编号:2018KJ06)。
文摘
目的探讨纹状体胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)含量降低,加重帕金森病(PD)运动症状的机制。方法雄性C57/BL小鼠(6~8周龄),纹状体立体定位注射(PBS、AAV-GDNF、AAV-shGDNF),联合亚急性PD模型,腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)30 mg/(kg·d),连续5 d,随机分为PBS组、阴性对照组(NC组)、AAV-shGDNF组、MPTP组、MPTP+AAV-GDNF组、MPTP+AAV-shGDNF组;采用行为学实验(转棒、爬杆和旷场)评估小鼠运动能力,ELISA试剂盒检测纹状体谷氨酸(Glu)含量,Western blot等技术检测GLAST、GLT-1、GluN2B等表达及分布,TUNEL染色观察纹状体神经元凋亡。结果与NC组比较,AAV-shGDNF组小鼠纹状体GDNF表达下调,小鼠运动能力下降,Glu含量升高、Glu转运体(GLAST、GLT-1)表达分布减少。与PBS组比较,MPTP组小鼠纹状体Glu含量升高、GluN2B表达降低。与MPTP组比较,MPTP+AAV-GDNF组小鼠运动能力提高、纹状体Glu含量降低、GluN2B表达升高、神经元凋亡减少;而MPTP+AAV-shGDNF组小鼠运动能力下降、纹状体Glu含量升高、GluN2B表达降低、神经元凋亡增多。结论PD病理进程中,纹状体GDNF表达降低可能通过下调Glu转运体的表达,促进Glu对神经元的兴奋性毒性损伤,加重运动症状。
关键词
帕金森病
胶质细胞系源性神经营养因子
谷氨酸
纹状体
运动症状
Keywords
Parkinson′s disease
glial cell line-derived neurotrophic factor
glutamic acid
striatum
motor symptom
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
华支睾吸虫排泄分泌抗原McAb的制备及双抗夹心ELISA的初步建立
被引量：
1
3
作者
朱慕春
刘劲峰
陆忠奎
孔德龙
机构
徐州
医科
大学
病原
生物学
教研室
江苏省病原
生物学
重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期873-877,共5页
基金
高等学校大学生实践创新训练计划立项项目(No.2012JSSPITP1850)
徐州医科大学科研课题(No.2012KJ13)~~
文摘
目的以华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)免疫小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并建立一种可检测ESA的双抗体夹心酶联免疫吸附试验的方法。方法用ESA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选杂交瘤细胞株,制备高效价单克隆抗体并鉴定;单抗经HRP标记和配对筛选,建立双抗夹心ELISA并分析其特异性及灵敏度。结果成功制备出抗华支睾吸虫ESA McAb:B7、F1;抗体类型均为IgG1,抗体滴度高,特异性好,以筛选到的两株单抗建立双抗夹心ELISA法,最佳线性范围为0.014~0.248μg/mL(R2=0.996 9),最低检出限为0.014μg/mL。结论初步建立了检测华支睾吸虫ESA的免疫诊断方法。
关键词
华支睾吸虫
单克隆抗体
ELISA
Keywords
Clonorchis sinensis
McAb
ELISA
分类号
R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
异补骨脂甲素调控miR-124对小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的影响
王贝
袁晨燕
姚瑞芹
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
纹状体GDNF调控Glu兴奋性毒性影响PD运动症状
陈静
徐娜娜
高殿帅
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
华支睾吸虫排泄分泌抗原McAb的制备及双抗夹心ELISA的初步建立
朱慕春
刘劲峰
陆忠奎
孔德龙
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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职称材料
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