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脂多糖和肿瘤坏死因子α对人牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响
1
作者 刘岩 刘昕昕 +2 位作者 石刘 李婉怡 费立崑 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第3期340-346,共7页
目的探讨脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法体外分离培养hDPSCs,分别用不同浓度LPS(0,0.1,1,10μg/mL)和TNF-α(0,1,10,100 ng/mL)培养细胞。培养24,48,72 h,应用细胞计数试剂盒-8(CCK... 目的探讨脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法体外分离培养hDPSCs,分别用不同浓度LPS(0,0.1,1,10μg/mL)和TNF-α(0,1,10,100 ng/mL)培养细胞。培养24,48,72 h,应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测hDPSCs增殖活性变化;培养7,14,21 d应用茜素红(AR)染色试剂盒和5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)碱性磷酸酯酶(ALP)显色试剂盒检测hDPSCs肉眼观AR染色变化、钙结节定量、ALP染色和ALP活性等成骨分化指标。结果①CCK-8实验显示1,10,100 ng/mL TNF-α作用于hDPSCs 24,48,72 h后细胞增殖活力降低(P<0.05)。AR成骨诱导染色结果显示培养7,14 d,TNF-α各浓度组肉眼观AR染色无明显差异;培养21 d,10 ng/mL和100 ng/mL TNF-α组矿化程度相比0 ng/mL组低(P<0.05)。ALP染色和ALP活性试剂盒分析显示诱导培养7,14,21 d后,相比0 ng/mL组,1 ng/mL,10 ng/mL和100 ng/mL TNF-α组ALP染色变浅,且ALP活性降低(P<0.05)。②CCK-8实验显示不同浓度LPS作用hDPSCs 24 h和48 h后细胞增殖活性没有明显差异,而1μg/mL和10μg/mL组LPS作用hDPSCs 72 h后OD_(450)值大于0μg/mL组(P<0.05)。ALP成骨诱导染色显示培养7,14,21 d,不同浓度LPS作用后ALP染色和ALP活性变化不明显。AR成骨诱导染色显示培养7 d,LPS各浓度组的矿化程度不明显;10μg/mL LPS培养14,21 d矿化程度较0μg/mL低(P<0.05)。结论LPS对hDPSCs成骨分化的影响取决于LPS浓度和作用时间,高浓度LPS促进hDPSCs增殖。TNF-α抑制hDPSCs的增殖和成骨分化。 展开更多
关键词 脂多糖 肿瘤坏死因子Α 人牙髓干细胞 牙髓炎 成骨分化
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促炎细胞因子IL-1β和IL-6对人牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响
2
作者 胡嘉怡 杨屹城 +3 位作者 韦庄 魏迎迎 吴翠 刘岩 《山西医科大学学报》 2024年第12期1535-1542,共8页
目的 探讨白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)对体外培养的人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法 体外分离培养hDPSCs,设置对照组(0 ng/mL IL-1β)和IL-1β组(0.1,1,10,100 ng/mL IL-1β);同理设置对照组(0 ng/mL IL-6)和... 目的 探讨白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)对体外培养的人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法 体外分离培养hDPSCs,设置对照组(0 ng/mL IL-1β)和IL-1β组(0.1,1,10,100 ng/mL IL-1β);同理设置对照组(0 ng/mL IL-6)和IL-6组(0.1,1,10,100 ng/mL IL-6)。培养24,48,72 h时,应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测hDPSCs增殖活性;培养7,14,21 d时,应用5-溴-4氯-3-吲哚-磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)碱性磷酸酯酶(ALP)显色试剂盒和茜素红(AR)显色试剂盒分别检测hDPSCs ALP染色、ALP活性、AR染色变化和钙结节定量。结果 CCK-8结果显示,不同浓度IL-1β组培养48 h细胞增殖活性均小于对照组(P<0.05),72 h时仅100 ng/mL IL-1β组增殖活性小于对照组(P<0.05)。成骨诱导第14,21天时,与对照组比较,1,10,100 ng/mL IL-1β组肉眼观ALP和AR染色变浅,ALP活性和钙结节OD450降低(P<0.05)。CCK-8结果显示,不同浓度IL-6组在48 h时细胞增殖活性均小于对照组(P<0.05),72 h时仅100 ng/mL IL-6组增殖活性小于对照组(P<0.05)。成骨诱导第21天,与对照组相比,肉眼观100 ng/mL IL-6组ALP染色较浅,ALP活性降低(P<0.05),0.1,1,10 ng/mL IL-6组在成骨诱导第7,14,21天,ALP染色、AR染色、ALP活性和钙结节OD450均无明显变化。结论 IL-1β和IL-6对hDPSCs增殖活性的影响均取决于其浓度和作用时间。高浓度的IL-1β抑制hDPSCs的成骨分化;IL-6对hDPSCs的成骨分化无明显影响。 展开更多
关键词 白细胞介素1Β 白细胞介素6 人牙髓干细胞 牙髓炎 增殖 成骨分化
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