白藜芦醇抑制结肠癌干细胞增殖并增强MICA/B的表达 被引量：14

1

作者 杨君 刘军权 +1 位作者 吕小婷 费素娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期889-893,共5页

目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合... 目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测Res对CCSC凋亡的影响;流式细胞术检测Res对CCSC生长周期及主要组织相容性复合体Ⅰ类分子相关链A/B(MICA/B)表达的影响。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长。球形细胞中CD133+细胞占91.07%±1.79%,CD44+细胞占90.33%±1.78%。与对照组相比,Res能明显抑制CCSC增殖,并且呈时间、剂量依赖性;Res作用48 h后,CCSC细胞周期G0/G1期比例显著升高,S期下降,呈剂量依赖性;随着药物浓度增加,CCSC的凋亡率增加,MICA/B的表达增强。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导培养出CCSC,Res能剂量依赖性地抑制CCSC的增殖,与阻滞细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡有关;Res能增强CCSC中MICA/B的表达,增强其免疫原性。 展开更多

关键词 白藜芦醇 结肠癌干细胞 凋亡 细胞周期 主要组织相容性复合体I类分子相关链A/B(MICA/B)

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根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及机制探讨 被引量：9

2

作者 刘刚 陈复兴 +2 位作者 刘军权 吕小婷 费素娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期602-606,615,共6页

目的：探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法：IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PF... 目的：探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法：IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PFP及GraB的表达;LDH释放法检测γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;Western blot检测γδT细胞中Wnt3a的表达情况。结果：IPP作用10天后,γδT细胞比例由3.12%增加到79.6%。与对照组比较,浓度2.3518.75μg/ml的根皮素作用后γδT细胞的增殖率显著提高（P〈0.05）,75μg/ml根皮素对SGC-7901细胞生长抑制率显著提高（P〈0.05）,且2.3575μg/ml根皮素作用后的γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性明显增强（P〈0.05）,γδT细胞中PFP、GraB及Wnt3a的表达较对照组显著增加（P〈0.05）。结论：根皮素能够增强γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤作用,其机制可能与根皮素促进γδT细胞的增殖,提高γδT细胞PFP、GraB表达及活化Wnt信号通路有关。 展开更多

关键词 根皮素 ΓΔT细胞 胃癌 杀伤活性

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COX-2 iNOS及VEGF在胃不典型增生胃癌中的表达及其意义 被引量：9

3

作者 刘莹 朱祖安 费素娟 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期428-430,共3页

目的:探讨COX-2、iNOS及VEGF在胃不典型增生及胃癌中的表达、相互关系及在胃癌中的作用。方法:采用免疫组化PowervisionTM两步法对84例胃癌和54例胃不典型增生组织中COX-2、iNOS及VEGF的表达进行检测。结果:COX-2、iNOS及VEGF在胃癌中... 目的:探讨COX-2、iNOS及VEGF在胃不典型增生及胃癌中的表达、相互关系及在胃癌中的作用。方法:采用免疫组化PowervisionTM两步法对84例胃癌和54例胃不典型增生组织中COX-2、iNOS及VEGF的表达进行检测。结果:COX-2、iNOS及VEGF在胃癌中表达的阳性率分别为66.67%、77.38%、61.90%,均高于胃不典型增生组织(P<0.05)。COX-2、iNOS及VEGF表达与肿瘤的大小、淋巴结转移呈正相关,COX-2、VEGF表达与肿瘤浸润深度呈正相关,VEGF与COX-2、iNOS的表达呈正相关(P<0.05)。结论:COX-2、iNOS及VEGF与胃癌的发生、浸润转移相关,COX-2、iNOS通过增强VEGF的表达而促进肿瘤血管生成及转移。 展开更多

关键词 胃癌 胃不典型增生 血管内皮生长因子 环氧化酶2诱导型一氧化氮合酶

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4E-BP1、p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中作用的实验研究 被引量：5

4

作者 刘莹 朱祖安 崔涛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期504-507,共4页

目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western-blo... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western-blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况。结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-8724h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72h,抑制作用逐渐增强。流式细胞术结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0～G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感。Western-blot结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化。结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用。 展开更多

关键词 mTOR MKN-28 N-87 P70S6K p-p70S6k 4E—-BP1 p-4EBP1

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羽扇豆醇对人共刺激细胞及结肠癌细胞株SW480的影响 被引量：3

5

作者 毕亭亭 刘军权 +2 位作者 陈复兴 刘岩 朱炳喜 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第10期1047-1051,共5页

目的：共刺激细胞是一种对肿瘤细胞有杀伤作用的 NK样T细胞，既往研究表明羽扇豆醇作为一种天然植物提取物，能改变NK细胞、γδT细胞的生长及其对肿瘤细胞的作用。文中主要探讨羽扇豆醇对人共刺激细胞杀伤结肠癌细胞株 SW480的影响。... 目的：共刺激细胞是一种对肿瘤细胞有杀伤作用的 NK样T细胞，既往研究表明羽扇豆醇作为一种天然植物提取物，能改变NK细胞、γδT细胞的生长及其对肿瘤细胞的作用。文中主要探讨羽扇豆醇对人共刺激细胞杀伤结肠癌细胞株 SW480的影响。方法取健康人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子诱导为共刺激细胞；不同浓度的羽扇豆醇在作用于共刺激细胞及结肠癌细胞株不同时间段后，甲基偶唑蓝（ MTT）法检测羽扇豆醇对共刺激细胞及结肠癌细胞株 SW480生长的影响；乳酸脱氢酶（ LDH）法检测共刺激细胞对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性。结果羽扇豆醇浓度在0．1～200.0μg/mL时对共刺激细胞的生长有促进作用，对结肠癌细胞株SW480有抑制作用；羽扇豆醇诱导后，共刺激细胞对SW480的杀伤活性增强，浓度为12．5 mg/L时与空白对照比较的差异有统计学意义（76％vs 40％， P＜0．05）。结论羽扇豆醇能促进共刺激细胞的增殖，抑制结肠癌细胞株SW480的生长，并能增加SW480对共刺激细胞的敏感性，增强共刺激细胞对SW480细胞株的杀伤能力。 展开更多

关键词 羽扇豆醇 共刺激细胞 结肠癌细胞株SW480 杀伤活性

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NF-κB、COX-2及iNOS在胃癌及胃不典型增生中的表达及其意义 被引量：2

6

作者 刘莹 朱祖安 费素娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期1997-1998,共2页

关键词 胃癌 胃不典型增生 核转录因子-ΚB 环氧合酶-2 诱导型一氧化氮合酶 免疫组化

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SKI-Ⅱ促胃癌SGC7901细胞凋亡的实验研究 被引量：2

7

作者 朱祖安 费素娟 +3 位作者 刘磊 孙旻 张秋月 刘莹 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期463-468,共6页

目的:研究鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)抑制剂SKI-Ⅱ对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响,并探讨其具体作用机制。方法:常规培养人胃癌SGC7901细胞,SKI-Ⅱ单用或联合顺铂(DDP)干预,流式细胞术检测细胞凋亡率;电镜下观察用药后细胞超... 目的:研究鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)抑制剂SKI-Ⅱ对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响,并探讨其具体作用机制。方法:常规培养人胃癌SGC7901细胞,SKI-Ⅱ单用或联合顺铂(DDP)干预,流式细胞术检测细胞凋亡率;电镜下观察用药后细胞超微结构的改变;免疫细胞化学、Western blot检测药物作用后细胞中Sphk1、NF-κB、Bcl-2、Bax的表达。Pearson相关分析检测Sphk1与NF-κB、NF-κB与Bcl-2表达的相关性。结果:SKI-Ⅱ单用或联合DDP干预48 h后,SKI-Ⅱ5μmol/L组、SKI-Ⅱ10μmol/L组、DDP 2.5 mg/L组、DDP 2.5 mg/L+SKI-Ⅱ5μmol/L组和DDP 2.5 mg/L+SKI-Ⅱ10μmol/L组细胞凋亡率分别为(40.39±1.06)%、(45.58±0.75)%、(47.27±1.13)%、(53.64±1.11)%和(66.98±2.32)%。与阴性对照组比,差异均有统计学意义(P<0.05);电镜下观察到SGC7901细胞胞浆内出现凋亡小体;SGC7901细胞中Bax阳性表达率增加,Sphk1、NF-κB、Bcl-2阳性表达率减少。Sphk1与NF-κB、NF-κB和Bcl-2的表达呈正相关。结论:SKI-Ⅱ可以通过抑制细胞中Sphk1的表达从而下调NF-κB的表达,并升高Bax/Bcl-2的比例诱导人胃癌SGC7901细胞的凋亡。 展开更多

关键词 SKI-Ⅱ SGC7901细胞 凋亡

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P-cadherin和HSP27蛋白在胃癌组织的表达及临床意义 被引量：2

8

作者 胡风兰 何秋瑜 +3 位作者 李祥佩 刘清华 刘莹 朱祖安 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期26-30,共5页

目的:探讨P钙黏蛋白(P-cadherin)与热休克蛋白27(HSP27)在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系,进而探讨其作为预后指标的意义。方法:建立组织芯片,通过免疫组化SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和75例正常胃组织中P... 目的:探讨P钙黏蛋白(P-cadherin)与热休克蛋白27(HSP27)在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系,进而探讨其作为预后指标的意义。方法:建立组织芯片,通过免疫组化SP法检测75例无术前放化疗史的胃癌手术标本和75例正常胃组织中P-cadherin、HSP27的表达情况,并对随访患者进行生存分析。结果 :在胃癌组织及正常胃组织中,Pcadherin、HSP27的表达率分别为40.0%、82.7%(P<0.001)和64.0%、30.7%(P<0.001)。P-cadherin低表达和HSP27高表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05),HSP27高表达还与肿瘤大小相关(P<0.05)。Pearson相关分析显示,P-cadherin与HSP27在胃癌中的表达呈负相关(P<0.05)。单因素Kaplan-Meier回归分析显示P-cadherin和HSP27与预后相关(P<0.05)。Cox单因素回归分析显示P-cadherin、HSP27、临床分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移与患者预后相关(P<0.05);Cox多因素回归模型分析显示HSP27、临床分期与患者预后相关(P<0.05)。结论:在胃癌中,P-cadherin低表达、HSP27高表达与胃癌临床病理特征和生物学行为密切相关。P-cadherin与HSP27的表达在胃癌组织中呈负相关。P-cadherin和HSP27可作为判断患者预后的候选指标。 展开更多

关键词 组织芯片 P钙黏素 热休克蛋白27

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mTOR特异性抑制剂RAD001对SGC7901/DDP细胞耐药的逆转作用 被引量：1

9

作者 刘莹 朱祖安 +3 位作者 孔庆兖 刘磊 崔涛 张瑞瑞 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1206-1210,共5页

目的观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂RAD001对胃癌SGC7901/DDP细胞顺铂耐药逆转的作用,并初步探讨其发挥作用的机制。方法常规培养胃癌SGC7901/DDP细胞,单独RAD001、DDP(cisplatin,顺铂)... 目的观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂RAD001对胃癌SGC7901/DDP细胞顺铂耐药逆转的作用,并初步探讨其发挥作用的机制。方法常规培养胃癌SGC7901/DDP细胞,单独RAD001、DDP(cisplatin,顺铂)或联合药物作用后,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学和Western blot技术检测药物作用后细胞中P-gp、MRP1、p27蛋白表达。结果单独DDP组(顺铂组)作用于SGC7901/DDP细胞后,细胞周期无明显改变,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。RAD001组(RAD分别为2.5、5、10 nmol/L)、联合用药组(RAD 2.5 nmol/L+DDP 2.5 mg/L)作用48 h后,处于G1期细胞比例增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);处于S期细胞比例降低,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组效果强于单独用药组(P<0.05);免疫组化检测结果示:顺铂组对细胞中上述蛋白的表达无明显改变作用。RAD预处理后,RAD001组、联合用药组作用48 h后细胞中P-gp和MRP1表达下降,p27表达升高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。联合用药组作用效果强于单独用药组(P<0.05);Western blot检测示:顺铂组对细胞中上述蛋白的表达无明显改变。RAD预处理后,RAD001组、联合用药组作用48 h后细胞中P-gp和MRP1表达均下降,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。p27表达均升高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。联合用药组作用强于各单独药物作用组(P<0.05)。结论 RAD001能够逆转胃癌细胞SGC7901/DDP耐药,其可能通过上调p27表达引起细胞周期阻滞而发挥作用。 展开更多

关键词 RAD001 细胞周期 SGC7901 DDP细胞 耐药逆转

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尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、iNOS表达的抑制作用 被引量：1

10

作者 费素娟 朱祖安 刘莹 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期914-917,F0004,共5页

目的:观察尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用及对COX-2、iNOS表达的影响。方法:MTT法检测不同浓度尼美舒利、舒林酸对SGC-7901细胞的生长抑制作用,免疫组织化学Power visionTM两步法、Western blot方法检测药物作用... 目的:观察尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用及对COX-2、iNOS表达的影响。方法:MTT法检测不同浓度尼美舒利、舒林酸对SGC-7901细胞的生长抑制作用,免疫组织化学Power visionTM两步法、Western blot方法检测药物作用前后细胞COX-2、iNOS表达情况;同时生化方法检测细胞内TNOS、iNOS、NO含量的改变。结果:尼美舒利、舒林酸可以抑制人胃癌SGC-7901细胞生长并具有浓度、时间依赖性;与阴性对照组相比,舒林酸、尼美舒作用48h后,舒林酸0.6、1.2mmol/L组及尼美舒利100、200μmol/L组中COX-2、iNOS蛋白表达率及细胞内iNOS、TNOS、NO含量均明显降低(P<0.05)。结论:尼美舒利、舒林酸可以抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,其机制除了与抑制COX-2有关外还与抑制iNOS的蛋白表达与活性有关。 展开更多

关键词 尼美舒利 舒林酸 人胃癌SGC-7901细胞 环氧化酶-2 诱导型一氧化氮合酶

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尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞凋亡影响的实验研究 被引量：1

11

作者 蔡红星 朱正秋 朱祖安 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1668-1671,1697,共5页

目的:观察尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响并对其机制进行初步研究。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,并给予不同浓度尼美舒利干预,HE染色、电镜观察药物作用后细胞形态学变化;免疫组化、Western blot方法检测药物对人胃癌SGC-... 目的:观察尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响并对其机制进行初步研究。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,并给予不同浓度尼美舒利干预,HE染色、电镜观察药物作用后细胞形态学变化;免疫组化、Western blot方法检测药物对人胃癌SGC-7901细胞COX-2、bcl-2、bax蛋白表达的影响。结果:HE染色检测结果显示随着给药浓度的上升及给药时间的延长,SGC-7901细胞逐渐变得稀疏,光镜及电镜下高浓度组可见核固缩、核碎裂、染色质边集等凋亡及坏死的形态学表现;免疫组化、Western blot结果显示尼美舒利作用48h后人胃癌SGC-7901细胞COX-2、bcl-2表达逐渐下降,bax表达逐渐上升,具有剂量依赖性。COX-2与bcl-2之间蛋白表达率具有相关性(rs=0.8859;P<0.001)。结论:尼美舒利可以促进人胃癌SGC-7901细胞凋亡,其促凋亡机制与促进bax表达及抑制bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 环氧合酶2 胃癌 非甾体抗炎药 尼美舒利 BCL-2 BAX

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尼美舒利舒林酸对人胃癌细胞NF-κBiNOS表达的抑制作用

12

作者 朱祖安 刘莹 费素娟 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期1267-1270,共4页

目的:观察尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞NF-κB、iNOS表达的影响,初步探讨其在NSAIDs抗肿瘤作用中的意义。方法:对人胃癌SGC-7901细胞进行细胞培养,采用免疫组织化学PowervisionTM两步法、westernblot方法检测不同浓度尼美舒利... 目的:观察尼美舒利、舒林酸对人胃癌SGC-7901细胞NF-κB、iNOS表达的影响,初步探讨其在NSAIDs抗肿瘤作用中的意义。方法:对人胃癌SGC-7901细胞进行细胞培养,采用免疫组织化学PowervisionTM两步法、westernblot方法检测不同浓度尼美舒利、舒林酸作用后细胞NF-κB、iNOS表达情况;同时生化方法检测细胞内TNOS、iNOS、NO含量的改变。结果:与阴性对照组相比,药物干预48h后尼美舒利100、200μmol/L组,舒林酸0.6、1.2mmol/L组人胃癌SGC-7901细胞NF-κB、iNOS蛋白表达率及细胞内TNOS、iNOS、NO含量明显降低(P<0.05),并且iNOS,NF-κB之间呈正相关性(P<0.05)。结论:尼美舒利、舒林酸可以通过抑制人胃癌细胞NF-κB、iNOS的蛋白表达而发挥抗肿瘤作用。抑制iNOS的表达对NF-κB的抑制作用有关。 展开更多

关键词 尼美舒利 舒林酸 人胃癌SGC-7901细胞 诱导型一氧化氮合酶 核转录因子-ΚB

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