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Ki67基因RNA干扰腺病毒表达载体的构建及其抗结肠肿瘤作用研究
被引量：
2
1
作者
毛立军
郑骏年
+4 位作者
郑宏祥
刘俊杰
温儒民
陈家存
孙晓青
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期190-193,共4页
目的:构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA(Ki67-siRNA)腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法:设计可形成小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pCA...
目的:构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA(Ki67-siRNA)腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法:设计可形成小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pCA13,构建Ki67-siRNA表达质粒pCA13-Ki67。鉴定正确后,将pCA13-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染至293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒Ad-Ki67。大量扩增Ad-Ki67,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。Ad-Ki67感染人结肠癌细胞,结晶紫染色法检测细胞病理作用,MTT法检测细胞存活,Western印迹法检测Ki67表达。结果:酶切分析、测序鉴定表明pCA13-Ki67构建成功,PCR分析表明Ad-Ki67含有Ki67-siRNA序列。Ad-Ki67可显著抑制Ki67蛋白表达及结肠癌细胞生长。结论:含有Ki67-siRNA的重组腺病毒构建成功,其能抑制人结肠癌细胞Ki67基因表达和生长。
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关键词
KI67基因
RNA干扰
腺病毒载体
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职称材料
细胞因子对肾癌细胞株786-0、GRC-1 Fas、FasL表达的调节及其意义
被引量：
2
2
作者
郑骏年
孙晓青
+2 位作者
陈家存
姜福金
李望
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第11期766-768,共3页
目的 :研究细胞因子对肾癌株Fas、FasL表达的影响及其意义。方法 :单独或联合应用IFNγ ,IFNα ,IL 2 ,TNFα刺激肾癌株 786 0、GRC 1细胞并检测Fas、FasL表达 ,以Fas单克隆抗体 (FasAb)诱导其凋亡 ,以JurkatT细胞共培养试验检测其Fas...
目的 :研究细胞因子对肾癌株Fas、FasL表达的影响及其意义。方法 :单独或联合应用IFNγ ,IFNα ,IL 2 ,TNFα刺激肾癌株 786 0、GRC 1细胞并检测Fas、FasL表达 ,以Fas单克隆抗体 (FasAb)诱导其凋亡 ,以JurkatT细胞共培养试验检测其FasL功能。结果 :1 IFNγ、IFNα均能显著上调 786 0、GRC 1细胞的Fas表达 (P <0 0 1,P <0 0 1) ,并促进FasAb诱导的凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。 2 TNFα、IFNα能分别上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达。IFNγ能显著上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达(P<0 0 1,P <0 0 1) ,并促进JurkatT细胞凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。结论 :IFNγ、IFNα可增强肾癌细胞株的Fas表达 ,并促进FasAb介导的凋亡。但其亦能上调肾癌细胞FasL表达并增强其对淋巴细胞的攻击作用。
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关键词
细胞因子
肾癌
细胞株
786-0
GRC-1
FAS
FASL
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职称材料
题名
Ki67基因RNA干扰腺病毒表达载体的构建及其抗结肠肿瘤作用研究
被引量：
2
1
作者
毛立军
郑骏年
郑宏祥
刘俊杰
温儒民
陈家存
孙晓青
机构
徐州医学院附属医院泌尿外科研究室
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期190-193,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:30570385)
卫生部科研基金资助(编号:WKJ2005-2-026)
文摘
目的:构建针对肿瘤增殖基因Ki67的小干扰RNA(Ki67-siRNA)腺病毒表达载体,体外研究其对人结肠癌细胞株SW620细胞生长影响,为结肠癌的基因治疗提供参考。方法:设计可形成小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pCA13,构建Ki67-siRNA表达质粒pCA13-Ki67。鉴定正确后,将pCA13-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染至293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒Ad-Ki67。大量扩增Ad-Ki67,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。Ad-Ki67感染人结肠癌细胞,结晶紫染色法检测细胞病理作用,MTT法检测细胞存活,Western印迹法检测Ki67表达。结果:酶切分析、测序鉴定表明pCA13-Ki67构建成功,PCR分析表明Ad-Ki67含有Ki67-siRNA序列。Ad-Ki67可显著抑制Ki67蛋白表达及结肠癌细胞生长。结论:含有Ki67-siRNA的重组腺病毒构建成功,其能抑制人结肠癌细胞Ki67基因表达和生长。
关键词
KI67基因
RNA干扰
腺病毒载体
Keywords
Ki67 gene
NA interference
Adenovirus vector
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
细胞因子对肾癌细胞株786-0、GRC-1 Fas、FasL表达的调节及其意义
被引量：
2
2
作者
郑骏年
孙晓青
陈家存
姜福金
李望
机构
徐州医学院附属医院泌尿外科研究室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第11期766-768,共3页
基金
江苏省科学基金资助 (BS983 19)
文摘
目的 :研究细胞因子对肾癌株Fas、FasL表达的影响及其意义。方法 :单独或联合应用IFNγ ,IFNα ,IL 2 ,TNFα刺激肾癌株 786 0、GRC 1细胞并检测Fas、FasL表达 ,以Fas单克隆抗体 (FasAb)诱导其凋亡 ,以JurkatT细胞共培养试验检测其FasL功能。结果 :1 IFNγ、IFNα均能显著上调 786 0、GRC 1细胞的Fas表达 (P <0 0 1,P <0 0 1) ,并促进FasAb诱导的凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。 2 TNFα、IFNα能分别上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达。IFNγ能显著上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达(P<0 0 1,P <0 0 1) ,并促进JurkatT细胞凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。结论 :IFNγ、IFNα可增强肾癌细胞株的Fas表达 ,并促进FasAb介导的凋亡。但其亦能上调肾癌细胞FasL表达并增强其对淋巴细胞的攻击作用。
关键词
细胞因子
肾癌
细胞株
786-0
GRC-1
FAS
FASL
Keywords
Renal cell carcinoma Cytokines Fas FasL Apoptosis
分类号
R737.11 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ki67基因RNA干扰腺病毒表达载体的构建及其抗结肠肿瘤作用研究
毛立军
郑骏年
郑宏祥
刘俊杰
温儒民
陈家存
孙晓青
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
细胞因子对肾癌细胞株786-0、GRC-1 Fas、FasL表达的调节及其意义
郑骏年
孙晓青
陈家存
姜福金
李望
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
2
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