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携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达
1
作者
朱裕华
彭长凌
+3 位作者
陈仁金
袁红花
陈翀
朱孝荣
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期485-490,共6页
目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染...
目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清。分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定。慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达。结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1。质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞。神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达。结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9-IGF-1,并在神经干细胞内获得表达。
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关键词
IGF-1基因
慢病毒
神经干细胞
RT—PCR
小鼠
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职称材料
UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群免疫功能的调节作用
被引量:
4
2
作者
顾健
林传明
+10 位作者
顾蔚
蔡心珍
李邹
任敏敏
孙幸
倪军
沈连军
吴蔚
何斌
孙梅
张育
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期166-170,共5页
本研究旨在观察脐带间充质干细胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC)移植对CIA(collagen typeⅡ-induced Arthritis,CIA)大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、辅助性Th17细胞及中性粒细胞的影响,初步探讨UC-MSC移植对CI...
本研究旨在观察脐带间充质干细胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC)移植对CIA(collagen typeⅡ-induced Arthritis,CIA)大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、辅助性Th17细胞及中性粒细胞的影响,初步探讨UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群的调节作用。大鼠分为3组:CIA组(模型组),UC-MSC治疗组及空白对照组。经尾静脉给CIA大鼠注射UC-MSC,以流式细胞术(FCM)检测大鼠外周血CD4+CD25+细胞比例及中性粒细胞表面NCD11b表达,以酶联免疫吸附试验(ELISA)观察大鼠血清白介素-17(IL-17)水平。结果表明:模型组大鼠外周血NCD11b平均荧光强度(MFI)及IL-17水平均明显高于同期空白对照组,CD4+CD25+细胞比例则显著降低(P<0.05),UC-MSC治疗组大鼠NCD11b及IL-17水平显著低于模型组(P<0.05),而CD4+CD25+Treg比例升高(P<0.05);至第5周UC-MSC治疗组上述指标均接近于空白对照组(P>0.05)。结论:UC-MSC可上调CIA大鼠外周血Treg比例,抑制Th17细胞分泌IL-17及中性粒细胞的活性,减轻机体免疫性炎症反应,减少促炎因子的释放,诱导机体免疫重建。
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关键词
脐带间充质干细胞
CIA大鼠
TREG细胞
IL-17
免疫调节
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职称材料
题名
携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达
1
作者
朱裕华
彭长凌
陈仁金
袁红花
陈翀
朱孝荣
机构
徐州
医学院
实验动物中心
徐州
医学院
神经生物学教研室
徐州医学院血液科
实验室
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期485-490,共6页
基金
江苏省自然科学基金(BK2010180)
徐州市社会发展科学基金(XM09B116)
徐州医学院院长基金(2010KJZ10)
文摘
目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清。分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定。慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达。结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1。质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞。神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达。结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9-IGF-1,并在神经干细胞内获得表达。
关键词
IGF-1基因
慢病毒
神经干细胞
RT—PCR
小鼠
Keywords
IGF-1 gene
lentivirus
NSCs
RT-PCR
mouse
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群免疫功能的调节作用
被引量:
4
2
作者
顾健
林传明
顾蔚
蔡心珍
李邹
任敏敏
孙幸
倪军
沈连军
吴蔚
何斌
孙梅
张育
机构
扬州大学临床
医学院
血液
科
江苏省扬州市
血液
病学研究所
赣南
医学院
附院
血液
科
徐州医学院血液科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期166-170,共5页
基金
国自然基金立项资助(81270590)
江苏省卫生厅2010年立项资助(H201048)
文摘
本研究旨在观察脐带间充质干细胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC)移植对CIA(collagen typeⅡ-induced Arthritis,CIA)大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、辅助性Th17细胞及中性粒细胞的影响,初步探讨UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群的调节作用。大鼠分为3组:CIA组(模型组),UC-MSC治疗组及空白对照组。经尾静脉给CIA大鼠注射UC-MSC,以流式细胞术(FCM)检测大鼠外周血CD4+CD25+细胞比例及中性粒细胞表面NCD11b表达,以酶联免疫吸附试验(ELISA)观察大鼠血清白介素-17(IL-17)水平。结果表明:模型组大鼠外周血NCD11b平均荧光强度(MFI)及IL-17水平均明显高于同期空白对照组,CD4+CD25+细胞比例则显著降低(P<0.05),UC-MSC治疗组大鼠NCD11b及IL-17水平显著低于模型组(P<0.05),而CD4+CD25+Treg比例升高(P<0.05);至第5周UC-MSC治疗组上述指标均接近于空白对照组(P>0.05)。结论:UC-MSC可上调CIA大鼠外周血Treg比例,抑制Th17细胞分泌IL-17及中性粒细胞的活性,减轻机体免疫性炎症反应,减少促炎因子的释放,诱导机体免疫重建。
关键词
脐带间充质干细胞
CIA大鼠
TREG细胞
IL-17
免疫调节
Keywords
UC-MSC
CIA rat
Treg cell
IL-17
immunomodulation
分类号
R457.7 [医药卫生—治疗学]
R392.4 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达
朱裕华
彭长凌
陈仁金
袁红花
陈翀
朱孝荣
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群免疫功能的调节作用
顾健
林传明
顾蔚
蔡心珍
李邹
任敏敏
孙幸
倪军
沈连军
吴蔚
何斌
孙梅
张育
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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