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医学研究生电镜取材实验课教学探讨
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作者 董富兴 于红丽 +2 位作者 刘亚萍 董红燕 姚瑞芹 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期125-126,共2页
在进行电镜科研样品及医院电镜外检标本观察时,常发现最终得不到理想的电镜超微结构图片,究其原因大都是电镜样品取材时出了问题,送检者没有经过规范的电镜取材培训,操作不当,最终导致电镜观察结果不理想甚至失败。
关键词 电镜超微结构 实验课教学 医学研究生 取材 电镜样品 操作不当 电镜观察
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过表达Olig2和Nkx2.2人胚胎干细胞系的建立
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作者 杨丽华 王婷 +4 位作者 马丽 罗梦娇 曲学彬 武秀香 姚瑞芹 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期645-648,共4页
目的:建立过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞(hESCs)系.方法:利用RT-PCR从鼠N2A细胞克隆出Olig2和Nkx2.2的ORF片段,将Olig2和Nkx2.2基因编码序列分别和带有HA及Flag的载体连接,构建Olig2-HA和Nkx2.2-Flag重组载体.将构建的载体分别与2... 目的:建立过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞(hESCs)系.方法:利用RT-PCR从鼠N2A细胞克隆出Olig2和Nkx2.2的ORF片段,将Olig2和Nkx2.2基因编码序列分别和带有HA及Flag的载体连接,构建Olig2-HA和Nkx2.2-Flag重组载体.将构建的载体分别与2种病毒辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,制备并浓缩Olig2-HA和Nkx2.2-Flag慢病毒颗粒,感染hESCs,嘌呤霉素筛选的阳性克隆传代培养10代后鉴定细胞内Olig2和Nkx2.2的表达.结果:PCR扩增得到含Olig2和Nkx2.2基因编码序列的特异性条带;携带有Olig2和Nkx2.2基因的慢病毒能够同时感染hESCs,表达Olig2-HA和Nkx2.2-Flag融合蛋白,并稳定遗传.结论:成功构建了同时过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞系. 展开更多
关键词 OLIG2 Nkx2.2 过表达 人胚胎干细胞 克隆
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