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HBx小鼠肿瘤细胞株的建立及初步鉴定
被引量：
2
1
作者
汤仁仙
尤红娟
+3 位作者
徐龙涛
孙亚峰
王慧
裴冬生
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第3期342-344,共3页
目的建立稳定、高效的HBxAg体外表达细胞株,以便进一步研究HBX基因和HBxAg的致癌作用及机理。方法用RT-PCR技术扩增出了HBX的cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,通过脂质体介导将pcD-NA3.1-HBX转染到小鼠肿瘤细胞株(EL4)中。结果RT-...
目的建立稳定、高效的HBxAg体外表达细胞株,以便进一步研究HBX基因和HBxAg的致癌作用及机理。方法用RT-PCR技术扩增出了HBX的cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,通过脂质体介导将pcD-NA3.1-HBX转染到小鼠肿瘤细胞株(EL4)中。结果RT-PCR及蛋白质印迹的实验结果表明,HBX基因在小鼠肿瘤细胞EL4细胞中得到了表达。结论本研究成功构建了表达HBx的小鼠肿瘤细胞株,为进一步研究HBX基因和HBx的致癌作用及机制奠定了实验基础。
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关键词
HBX
细胞株
基因表达
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职称材料
流体动力学法表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型的建立
2
作者
胡安康
范宝峰
+3 位作者
朱孝荣
汤仁仙
郑葵阳
刘晓梅
《中国比较医学杂志》
CAS
2009年第1期8-10,F0002,共4页
目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织...
目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织,行免疫荧光、RT-PCR和Western blot法从不同水平检测HBX在小鼠肝组织内的表达情况。结果模型组小鼠RT-PCR显示肝组织内有HBX mRNA的存在,免疫荧光和Western blot检测均有HBX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBX表达。结论成功建立了表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型,为进一步探讨HBX蛋白在动物体内的生物学作用提供实验基础。
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关键词
流体动力学法
真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX
小鼠
肝组织
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职称材料
幽门螺杆菌临床菌株主要蛋白抗原表达及其诱导宿主产生抗体差异性的研究
被引量：
3
3
作者
朱莲
汤仁仙
邵健忠
《浙江大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期90-96,共7页
建立了基于幽门螺杆菌重组蛋白抗原rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB的ELISAs,用于检测幽门螺杆菌临床菌株上述抗原表达率和幽门螺杆菌感染病人血清IgG阳性率,另采用PCR检测临床菌株中上述抗原编码基因携带率,以期为...
建立了基于幽门螺杆菌重组蛋白抗原rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB的ELISAs,用于检测幽门螺杆菌临床菌株上述抗原表达率和幽门螺杆菌感染病人血清IgG阳性率,另采用PCR检测临床菌株中上述抗原编码基因携带率,以期为选择幽门螺杆菌基因工程疫苗抗原提供依据.实验结果显示,rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB表达量分别约为细菌总蛋白的35%、32%、15%、23%、56%、25%和20%.各重组抗原均能与商品化幽门螺杆菌抗血清(DAKO)产生阳性Western Bolt结果,免疫家兔能产生特异性抗体.从332例慢性胃炎或消化性溃疡病人胃黏膜活检标本中,分离获得145株幽门螺杆菌,其阳性率为43.8%.所有幽门螺杆菌临床菌株均表达UreB、HpaA、FlaA和FlaB,52.4%、91.7%和93.1%菌株分别表达VacA、CagA和NapA.145例幽门螺杆菌感染的病人血清中,UreB、HpaA、VacA、CagA、NapA、FlaA和FlaB的IgG抗体阳性率分别为100%、86.9%、42.8%、70.3%、89.7%、84.8%和79.3%.此外,不同胃疾病标本中幽门螺杆菌分离率均无显著性(P>0.05),但菌株VacA和NapA表达率与疾病严重程度相关(P<0.05).综合分析实验结果,UreB是研制幽门螺杆菌基因工程疫苗首选抗原,其次是NapA和HpaA;各病种与幽门螺杆菌感染率无关,但与菌株毒力有关.
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关键词
幽门螺杆菌
主要蛋白抗原
表达频率
抗体水平
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职称材料
题名
HBx小鼠肿瘤细胞株的建立及初步鉴定
被引量：
2
1
作者
汤仁仙
尤红娟
徐龙涛
孙亚峰
王慧
裴冬生
机构
徐州医学院病原生物学教研室
齐鲁动物保健品有限公司
徐州
医学院
生物
化学与分子
生物学
研究中心
出处
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第3期342-344,共3页
文摘
目的建立稳定、高效的HBxAg体外表达细胞株,以便进一步研究HBX基因和HBxAg的致癌作用及机理。方法用RT-PCR技术扩增出了HBX的cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,通过脂质体介导将pcD-NA3.1-HBX转染到小鼠肿瘤细胞株(EL4)中。结果RT-PCR及蛋白质印迹的实验结果表明,HBX基因在小鼠肿瘤细胞EL4细胞中得到了表达。结论本研究成功构建了表达HBx的小鼠肿瘤细胞株,为进一步研究HBX基因和HBx的致癌作用及机制奠定了实验基础。
关键词
HBX
细胞株
基因表达
Keywords
HBX
Cell line
Gene expression
分类号
Q813.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
流体动力学法表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型的建立
2
作者
胡安康
范宝峰
朱孝荣
汤仁仙
郑葵阳
刘晓梅
机构
徐州
医学院
实验动物中心
徐州医学院病原生物学教研室
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2009年第1期8-10,F0002,共4页
文摘
目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织,行免疫荧光、RT-PCR和Western blot法从不同水平检测HBX在小鼠肝组织内的表达情况。结果模型组小鼠RT-PCR显示肝组织内有HBX mRNA的存在,免疫荧光和Western blot检测均有HBX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBX表达。结论成功建立了表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型,为进一步探讨HBX蛋白在动物体内的生物学作用提供实验基础。
关键词
流体动力学法
真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX
小鼠
肝组织
Keywords
Hydrodynamic injection
Eukaryon expression vector pcDNA3.1（ ＋ ）-HBX
Mouse
Liver tissue
分类号
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
幽门螺杆菌临床菌株主要蛋白抗原表达及其诱导宿主产生抗体差异性的研究
被引量：
3
3
作者
朱莲
汤仁仙
邵健忠
机构
浙江大学生命科学
学院
徐州医学院病原生物学教研室
出处
《浙江大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期90-96,共7页
文摘
建立了基于幽门螺杆菌重组蛋白抗原rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB的ELISAs,用于检测幽门螺杆菌临床菌株上述抗原表达率和幽门螺杆菌感染病人血清IgG阳性率,另采用PCR检测临床菌株中上述抗原编码基因携带率,以期为选择幽门螺杆菌基因工程疫苗抗原提供依据.实验结果显示,rUreB、rHpaA、rVacAr、CagA1、rNapA、rFlaA和rFlaB表达量分别约为细菌总蛋白的35%、32%、15%、23%、56%、25%和20%.各重组抗原均能与商品化幽门螺杆菌抗血清(DAKO)产生阳性Western Bolt结果,免疫家兔能产生特异性抗体.从332例慢性胃炎或消化性溃疡病人胃黏膜活检标本中,分离获得145株幽门螺杆菌,其阳性率为43.8%.所有幽门螺杆菌临床菌株均表达UreB、HpaA、FlaA和FlaB,52.4%、91.7%和93.1%菌株分别表达VacA、CagA和NapA.145例幽门螺杆菌感染的病人血清中,UreB、HpaA、VacA、CagA、NapA、FlaA和FlaB的IgG抗体阳性率分别为100%、86.9%、42.8%、70.3%、89.7%、84.8%和79.3%.此外,不同胃疾病标本中幽门螺杆菌分离率均无显著性(P>0.05),但菌株VacA和NapA表达率与疾病严重程度相关(P<0.05).综合分析实验结果,UreB是研制幽门螺杆菌基因工程疫苗首选抗原,其次是NapA和HpaA;各病种与幽门螺杆菌感染率无关,但与菌株毒力有关.
关键词
幽门螺杆菌
主要蛋白抗原
表达频率
抗体水平
Keywords
Helicobacter pylori
major protein antigens
expression ferquency
antibody levels
分类号
R37 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HBx小鼠肿瘤细胞株的建立及初步鉴定
汤仁仙
尤红娟
徐龙涛
孙亚峰
王慧
裴冬生
《山东农业大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
流体动力学法表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型的建立
胡安康
范宝峰
朱孝荣
汤仁仙
郑葵阳
刘晓梅
《中国比较医学杂志》
CAS
2009
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
幽门螺杆菌临床菌株主要蛋白抗原表达及其诱导宿主产生抗体差异性的研究
朱莲
汤仁仙
邵健忠
《浙江大学学报（理学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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