外源5-氨基乙酰丙酸对干旱胁迫下甘草种子萌发及幼苗生理特性的影响 被引量：34

1

作者 张春平 何平 +2 位作者 袁凤刚 胡世俊 韦品祥 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1603-1610,共8页

以药用植物甘草种子和幼苗为材料,在20%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,测定了不同浓度外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理甘草种子的发芽势(Gv)、发芽率(Gr)、发芽指数(Gi)和活力指数(Vi)的变化,以及ALA处理幼苗叶片的质膜透性、丙二醛(MDA)含... 以药用植物甘草种子和幼苗为材料,在20%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,测定了不同浓度外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理甘草种子的发芽势(Gv)、发芽率(Gr)、发芽指数(Gi)和活力指数(Vi)的变化,以及ALA处理幼苗叶片的质膜透性、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果显示:(1)在20%PEG-6000胁迫下,甘草种子萌发受到显著抑制,而各项萌发指标经过不同浓度的ALA进行恢复处理后均有明显提高,且均以10 mg.L-1ALA处理的各项指标值最大,其种子发芽势(75%)、发芽率(91%)比干旱胁迫对照显著提高了35%和30%,发芽指数(36.2)和活力指数(709.7)分别提高至干旱胁迫的2.6和3.5倍。(2)各ALA处理较对照均显著提高了干旱胁迫下甘草幼苗总生物量、可溶性糖的含量及脯氨酸含量,却显著降低了甘草叶片的MDA含量和质膜透性,同时显著提高了干旱胁迫下甘草叶片中的SOD、POD和CAT的活性,且以10 mg.L-1ALA处理后的酶活性最强。研究表明,适宜浓度(10 mg.L-1)的ALA能显著提高干旱胁迫下甘草种子的萌发能力,通过调节渗透调节物质含量和保护酶活性来有效减缓干旱胁迫对甘草幼苗的伤害,提高甘草种子及幼苗的抗旱能力。 展开更多

关键词 甘草 ALA 干旱胁迫 种子萌发 生理特性

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银杏内酯A对缺血/再灌注损伤的大鼠心功能的影响 被引量：11

2

作者 郝艳玲 袁凤刚 +4 位作者 孙红 王婷婷 李立文 汤安群 吴世双 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期577-581,共5页

目的探讨银杏内酯A(Ginkgolide A,GA)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的心功能的影响.方法Langendorff灌注离体大鼠心脏,用停灌复灌的方式制备心肌缺血/再灌注损伤模型,记录左心室收缩峰压(LVSP)、左心室舒张... 目的探讨银杏内酯A(Ginkgolide A,GA)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的心功能的影响.方法Langendorff灌注离体大鼠心脏,用停灌复灌的方式制备心肌缺血/再灌注损伤模型,记录左心室收缩峰压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、收缩压和舒张压最大变化速率(±LVdp/dt_(max))和心率(HR)的变化,并测定复灌后冠状动脉流出液中LDH和SOD的含量及心肌梗死面积.分离单个细胞进行GA预处理,模拟缺血/再灌注培养后检测心肌细胞存活率和单个心肌细胞的收缩幅度.结果GA预处理以后,LVSP、-dp/dt_(max)和HR在复灌10 min时较缺血/再灌注组具有明显的改善(P<0.05),并增加心率,减少LDH的生成,增加SOD的活性,降低心肌梗死面积.经GA预处理的心肌细胞存活率明显提高,10μmol·L^(-1)GA能够明显提高缺血后单个心肌细胞的收缩幅度.结论GA对缺血/再灌注损伤的心肌具有一定的改善作用. 展开更多

关键词 银杏内酯A 缺血 再灌注 大鼠 离体心脏 心肌细胞 心功能 收缩功能

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MK801对大鼠全脑缺血／再灌注ASK1信号通路影响以及神经元的保护 被引量：6

3

作者 袁凤刚 郝艳玲 +2 位作者 张春平 陈永刚 朱孝荣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期179-185,共7页

目的探讨MK801(dizocilpine,地佐环平)对全脑缺血/再灌注后神经型一氧化氮合成酶(nNOS)介导的凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)信号通路及海马CA1区细胞凋亡的影响。方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺... 目的探讨MK801(dizocilpine,地佐环平)对全脑缺血/再灌注后神经型一氧化氮合成酶(nNOS)介导的凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)信号通路及海马CA1区细胞凋亡的影响。方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血模型。SD大鼠腹腔注射MK801(30mg·kg-1)。通过"生物素转化法"(Biotin-Swich method)检测蛋白质的S-亚硝基化。然后运用免疫印迹、免疫共沉淀和免疫组织化学等方法对蛋白质的磷酸化以及蛋白质之间的相互作用进行研究;应用焦油紫染色的方法检测脑缺血/再灌注后海马CA1区的细胞凋亡情况。结果脑缺血/再灌注引起了ASK1的S-亚硝基化;MK801明显地抑制了脑缺血/再灌注诱导的ASK1的S-亚硝基化的增加;MK801明显降低了Thr845的磷酸化水平、增加了Ser83位的磷酸化水平,从而降低了ASK1的活性;MK801引起ASK1下游MKK4/7-JNK信号通路及下游凋亡的核通路也产生了相应的变化。结论 MK801能够抑制SD大鼠全脑缺血/再灌注引起ASK1的S-亚硝基化,进而影响ASK1凋亡信号通路,对神经元损伤起到保护作用。 展开更多

关键词 MK801 全脑缺血 再灌注 细胞凋亡 ASK1 信号通路 s 亚硝基化 NNOS

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中国荷斯坦牛Toll样受体4基因的遗传多态性与体细胞评分的关联分析 被引量：8

4

作者 陈仁金 王珍珍 +3 位作者 杨章平 朱孝荣 冀德君 毛永江 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期134-138,共5页

试验旨在研究中国荷斯坦牛Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)基因的遗传多态性及其与体细胞评分(somatic cell score,SCS)的关联性,寻找与乳房炎相关的分子标记,加快中国荷斯坦牛的抗病育种。利用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术对30个公... 试验旨在研究中国荷斯坦牛Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)基因的遗传多态性及其与体细胞评分(somatic cell score,SCS)的关联性,寻找与乳房炎相关的分子标记,加快中国荷斯坦牛的抗病育种。利用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术对30个公牛家系的610头中国荷斯坦牛TLR4基因进行多态性检测,用最小二乘均数法对TLR4基因的多态位点与SCS进行相关分析。结果发现,试验共检测到2个单核苷酸多态(single nucleotide polymorphisms,SNPs),TLR4基因5′侧翼区存在SNP-226G>C突变,经PCR-RFLP检测发现3种基因型:GG、GC和CC,基因型频率分别为0.208、0.482和0.310;外显子3存在SNP 1760C>T突变,经PCR-SSCP检测发现3种基因型:CC、TC和TT,基因型频率分别为0.738、0.225和0.007,以上2位点均偏离Hardy-Weinberg平衡。对于SNP-226G>C位点,基因型个体的SCS差异不显著;对于SNP 1760C>T位点,CC基因型个体的SCS最小二乘均值极显著低于TT和TC基因型个体(P<0.01)。SNP 1760C>T的CC基因型对于中国荷斯坦牛的SCS有较大的遗传效应,可作为分子标记应用于奶牛乳房炎抗性筛选。 展开更多

关键词 中国荷斯坦牛 Toll样受体4基因 PCR—RFLP PCR—SSCP 多态性 体细胞评分

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慢性肾衰竭大鼠模型的建立 被引量：28

5

作者 胡安康 朱孝荣 袁红花 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第1期34-38,94,共6页

目的建立两种慢性肾衰竭大鼠模型,观察瘦素蛋白在大鼠组织、器官中的表达。方法建立两种慢性肾衰竭CRF动物模型:(1)大鼠肾大部分切除诱发肾衰(Platt法)。(2)腺嘌呤诱发大鼠慢性肾衰竭的动物模型(Yokozawa法)。分别测定血清中血尿素氮(BU... 目的建立两种慢性肾衰竭大鼠模型,观察瘦素蛋白在大鼠组织、器官中的表达。方法建立两种慢性肾衰竭CRF动物模型:(1)大鼠肾大部分切除诱发肾衰(Platt法)。(2)腺嘌呤诱发大鼠慢性肾衰竭的动物模型(Yokozawa法)。分别测定血清中血尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)Ca2+、P5+等含量。取肾脏组织,HE染色,行免疫荧光,检测瘦素蛋白在两种慢性肾衰竭大鼠模型中的表达情况。结果模型组大鼠血清中血尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)等含量明显升高,免疫荧光检测显示两种模型大鼠肾脏组织瘦素蛋白的表达。结论成功建立两种慢性肾衰竭CRF动物模型,显示不同模型组织部位的瘦素蛋白的表达。为进一步探讨瘦素蛋白在动物体内的生物学作用提供实验基础。 展开更多

关键词 慢性肾衰竭 瘦素蛋白 免疫荧光

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普瑞巴林对SNL模型大鼠镇痛作用及对脊髓背根神经节p-JNK表达的影响 被引量：8

6

作者 任士飞 张林吉 彭长凌 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2016年第3期178-183,共6页

目的：探究普瑞巴林（pregabalin,PGB）对脊神经结扎（spinal nerve ligation,SNL）模型大鼠的镇痛效果及对脊髓背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）磷酸化氨基末端蛋白激酶（phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK）表达的... 目的：探究普瑞巴林（pregabalin,PGB）对脊神经结扎（spinal nerve ligation,SNL）模型大鼠的镇痛效果及对脊髓背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）磷酸化氨基末端蛋白激酶（phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK）表达的影响。方法：将SD大鼠随机分为5组,假手术C组、SNL组、PGB治疗P1组、P2组和P3组,于术后第11天开始,PGB 3组分别每天一次灌胃PGB 15、30、60 mg/Kg,C组和SNL组给予生理盐水,连续4 d（D11-D14）。于术后第14天,测定给药前、给药后30、60、90、120、180 min各时间点的机械痛阈和热缩足反射潜伏期的变化,测定后每组随机取10只大鼠L_5 DRG,免疫荧光法测定p-JNK在DRG的表达情况。结果：与C组相比,术后第14天,SNL、P1、P2、P3组的机械痛阈值和缩足反射潜伏期明显降低（P〈0.01）,给药后,与SNL组相比,P1、P2、P3组的机械痛阈值和缩足反射潜伏期值逐渐增加,镇痛效果在100 min左右达到最大,并呈剂量依赖。SNL组p-JNK存在高表达现象,P2组和P3组p-JNK表达明显下调。结论：普瑞巴林可以抑制脊神经结扎引起的痛敏现象,镇痛作用在给药后90~120 min达到最大,并呈剂量依赖,其机制可能是通过降低p-JNK在DRG的表达而产生镇痛作用。 展开更多

关键词 普瑞巴林 脊神经结扎 背根神经节 机械痛阈 热痛阈

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ERK1/2信号通路在IGF-1诱导新生小鼠海马神经干细胞增殖分化中的作用 被引量：2

7

作者 朱裕华 胡安康 +4 位作者 陈仁金 彭长凌 吴连连 袁红花 朱孝荣 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期609-614,共6页

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)诱导新生小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化中的作用。方法:取新生C57BL/6J小鼠海马体外分离、培养NSCs,分别... 目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)诱导新生小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化中的作用。方法:取新生C57BL/6J小鼠海马体外分离、培养NSCs,分别加入终浓度100 ng/ml的IGF-1和20μmol/L的抑制剂U0126。CCK-8试剂盒检测IGF-1对NSCs增殖的影响;免疫荧光细胞染色法检测IGF-1对细胞分化的影响;Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达,并对各组进行比较。结果:CCK-8测定细胞增殖,第3 d U0126组相对OD值显著低于IGF-1组,第7 d时IGF-1组OD值则显著高于对照组和U0126组(P<0.05)。倒置荧光显微镜下可观察到IGF-1组βⅢTubulin和GFAP阳性分化率均明显高于对照组和U0126组(P<0.05)。Western blot结果显示:IGF-1组蛋白表达量显著高于对照组和U0126组(P<0.05),IGF-1促进ERK磷酸化,U0126则抑制ERK的活化。结论:IGF-1可显著诱导NSCs的增殖和分化,ERK1/2信号通路可能具有重要作用,同时IGF-1可能参与ERK1/2的活化。 展开更多

关键词 ERK1 2信号通路 胰岛素样生长因子-1 神经干细胞 增殖和分化 小鼠

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Lats1基因敲除小鼠卵巢玻璃化冷冻的研究 被引量：4

8

作者 朱孝荣 刘学 +1 位作者 袁红花 庄明 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第6期359-362,i001,共5页

目的对小鼠卵巢玻璃化冷冻的方法和冷冻液进行研究,摸索出一种简便的小鼠卵巢冻存法。方法用玻璃化冷冻液EFS40对Lats1基因敲除杂合子小鼠卵巢进行玻璃化冷冻,冷冻效果通过解冻后的卵巢肾包膜下易位移植、卵巢囊原位移植和对移植后的成... 目的对小鼠卵巢玻璃化冷冻的方法和冷冻液进行研究,摸索出一种简便的小鼠卵巢冻存法。方法用玻璃化冷冻液EFS40对Lats1基因敲除杂合子小鼠卵巢进行玻璃化冷冻,冷冻效果通过解冻后的卵巢肾包膜下易位移植、卵巢囊原位移植和对移植后的成活卵巢进行组织学检查来判定。对出生的后代进行Lats1基因检测,来判定卵巢原位移植结果的可靠性。结果与结论解冻后的卵巢肾包膜下移植733%成活,并具有正常的功能;卵巢囊移植后卵巢存活率为467%,受体怀孕率为333%,平均产仔数为(37±22)只,后代中能检出Lats1基因;试验中还发现,受体的发情时间普遍提前10d左右。 展开更多

关键词 卵巢 小鼠 移植后 原位移植 受体 敲除 成活 S1基因 玻璃化冷冻 后代

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慢性肾功能衰竭大鼠模型的建立与评价 被引量：2

9

作者 胡安康 朱孝荣 袁红花 《上海畜牧兽医通讯》 2010年第5期12-13,共2页

建立两种慢性肾功能衰竭CRF动物模型:(1)大鼠肾大部分切除诱发肾衰(Platt法);(2)腺嘌呤诱发大鼠慢性肾功能衰竭的动物模型(Yokozawa法)。分别测定血清中血尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)Ca2+、P5+等含量。取肾脏组织,HE染色,观察两种慢性肾功... 建立两种慢性肾功能衰竭CRF动物模型:(1)大鼠肾大部分切除诱发肾衰(Platt法);(2)腺嘌呤诱发大鼠慢性肾功能衰竭的动物模型(Yokozawa法)。分别测定血清中血尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)Ca2+、P5+等含量。取肾脏组织,HE染色,观察两种慢性肾功能衰竭大鼠模型肾脏组织的损伤情况。结果模型组大鼠血清中血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)等含量明显升高,HE染色显示两种模型大鼠肾脏组织不同程度的损伤。通过对两种制备方法的可行性和操作性、制备原理、病变特点以及模型应用范围的对比,寻找建立接近临床实际,适用广泛,统一、简便、稳定的CRF动物模型。制作符合人类CRF的动物模型,对研究CRF的发病机理,探讨组织形态的变化与生化指标及临床表现的相互关系,筛选有效药物,阐明疗效机制均有重要作用。 展开更多

关键词 慢性肾功能衰竭(CRF) 尿素氮(BUN) 血肌酐(Scr) HE染色

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SD大鼠第三脑室室周区的生长抑素样接触液神经元 被引量：1

10

作者 庄明 王健 《中国比较医学杂志》 CAS 2003年第5期273-274,共2页

目的　观察大鼠第三脑室室周区是否存在生长抑素样触液神经元。方法　采用免疫细胞化学方法显示第三脑室室周区的生长抑素阳性神经元。结果　第三脑室室周的室管膜下和室管膜内含有胞体或突起与第三脑室直接接触的生长抑素阳性神经元。... 目的　观察大鼠第三脑室室周区是否存在生长抑素样触液神经元。方法　采用免疫细胞化学方法显示第三脑室室周区的生长抑素阳性神经元。结果　第三脑室室周的室管膜下和室管膜内含有胞体或突起与第三脑室直接接触的生长抑素阳性神经元。结论　大鼠第三脑室室周区存在生长抑素样触液神经元。 展开更多

关键词 SD 大鼠 第三脑室 室周区 生长抑素 接触液神经元 免疫细胞化学

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大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的建立 被引量：1

11

作者 胡安康 查巍巍 +2 位作者 张琦 朱裕华 朱孝荣 《上海畜牧兽医通讯》 2013年第2期20-21,共2页

目的:建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO),改进造模方法,鉴定临床表现,观察模型脑组织中梗死情况。方法:通过改良的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动物模型制作方法,建立不同时间再灌注损伤大鼠模型,观察术后大鼠临床表现,取脑组织,... 目的:建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO),改进造模方法,鉴定临床表现,观察模型脑组织中梗死情况。方法:通过改良的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动物模型制作方法,建立不同时间再灌注损伤大鼠模型,观察术后大鼠临床表现,取脑组织,TTC染色,观察模型脑组织中梗死情况。结果:模型组大鼠临床表现接近脑卒中临床指证,TTC染色显示大鼠脑组织存在部分梗死区域。结论:成功建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动物模型,临床表现、组织染色观察均已证实。这为进一步研究其发病机理,探讨组织形态的变化与生化指标及临床表现的相互关系,筛选有效药物,阐明疗效机制均有重要作用。 展开更多

关键词 局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO) 栓线 TTC染色

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针对HO-2基因的四种RNA干扰序列构建和效应观察

12

作者 王珍珍 张腾业 +5 位作者 陈仁金 袁红花 胡安康 吴连连 朱裕华 朱孝荣 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期161-164,共4页

目的:构建和筛选出血红素氧合酶-2(HO-2)基因的RNA干扰载体,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况。方法:根据小鼠HO-2基因的c DNA序列设计了4个HO-2基因干扰序列,克隆到干扰载体p GPU6-GFP-Neo上,利用电穿孔法将干扰载体对小鼠脑... 目的:构建和筛选出血红素氧合酶-2(HO-2)基因的RNA干扰载体,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况。方法:根据小鼠HO-2基因的c DNA序列设计了4个HO-2基因干扰序列,克隆到干扰载体p GPU6-GFP-Neo上,利用电穿孔法将干扰载体对小鼠脑血管内皮细胞进行转染。Real-time PCR和Western Blot检测小鼠脑血管内皮细胞中HO-2的表达。结果:干扰载体显著抑制小鼠脑血管内皮细胞中HO-2的表达,其中干扰载体p GPU6-GFP-Neo-HO-2-mus-768对HO-2 mRNA的表达抑制达显著水平(P<0.01),蛋白的表达抑制达显著水平(P<0.05)。结论:成功构建并筛选了HO-2表达干扰载体,为下一步的HO-2基因的功能鉴定奠定了基础。 展开更多

关键词 HO-2基因 RNA干扰载体 基因表达 大鼠

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携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达

13

作者 朱裕华 彭长凌 +3 位作者 陈仁金 袁红花 陈翀 朱孝荣 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期485-490,共6页

目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染... 目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-IGF-1。用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清。分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定。慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达。结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1。质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞。神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达。结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9-IGF-1,并在神经干细胞内获得表达。 展开更多

关键词 IGF-1基因 慢病毒 神经干细胞 RT—PCR 小鼠

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流体动力学法表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型的建立

14

作者 胡安康 范宝峰 +3 位作者 朱孝荣 汤仁仙 郑葵阳 刘晓梅 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第1期8-10,F0002,共4页

目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织... 目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织,行免疫荧光、RT-PCR和Western blot法从不同水平检测HBX在小鼠肝组织内的表达情况。结果模型组小鼠RT-PCR显示肝组织内有HBX mRNA的存在,免疫荧光和Western blot检测均有HBX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBX表达。结论成功建立了表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型,为进一步探讨HBX蛋白在动物体内的生物学作用提供实验基础。 展开更多

关键词 流体动力学法 真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX 小鼠 肝组织

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中国荷斯坦牛IL8基因SNP-233(G>A)不同基因型的表达差异研究

15

作者 陈仁金 王珍珍 +3 位作者 杨章平 毛永江 冀德君 朱孝荣 《中国牛业科学》 2013年第6期16-18,共3页

[目的]本研究旨在研究中国荷斯坦牛IL8基因-233(G>A)位点不同基因的表达差异水平,为探讨该位点在抗奶牛乳房炎作用提供理论依据。[方法]本试验运用SYBR Green实时荧光定量PCR技术进行定量测定。[结果]GG基因型个体mRNA的表达量显示高... [目的]本研究旨在研究中国荷斯坦牛IL8基因-233(G>A)位点不同基因的表达差异水平,为探讨该位点在抗奶牛乳房炎作用提供理论依据。[方法]本试验运用SYBR Green实时荧光定量PCR技术进行定量测定。[结果]GG基因型个体mRNA的表达量显示高于GA和AA基因型个体的表达量。[结论]IL8基因-233(G>A)位点对中国荷斯坦牛乳房炎抗性有一定影响,可用于中国荷斯坦牛的抗乳房炎的分子标记辅助选择。 展开更多

关键词 中国荷斯坦牛 IL8基因 基因型 实时PCR

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钙粘附蛋白N-cadherin基因RNAi质粒载体的构建与鉴定 被引量：2

16

作者 孙申 高秀先 +3 位作者 朱圆圆 朱孝先 袁红花 高殿帅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期125-129,共5页

目的:构建有效的小鼠神经型钙粘附蛋白(N-cadherin)基因RNA干扰质粒载体。方法:在小鼠基因库中选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列,然后将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pSilencerTM 3.1-H1 h... 目的:构建有效的小鼠神经型钙粘附蛋白(N-cadherin)基因RNA干扰质粒载体。方法:在小鼠基因库中选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列,然后将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pSilencerTM 3.1-H1 hygro质粒并分别命名为pSicad1、pSicad2、pSicad3、pSi-control。酶切和测序鉴定后,将以上重组质粒转染MN9D细胞,用Western Blot和半定量RT-PCR方法检测N-cadherin基因mR-NA和蛋白的表达水平。结果:酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被准确克隆到pSilencerTM 3.1-H1 hygro质粒,与对照组相比,pSicad2和pSicad3转染MN9D细胞后,N-cadherin mRNA和蛋白水平的表达均受到明显抑制,其中N-cadherin蛋白水平在pSicad3组下降50%(P<0.01)。结论:结果表明已成功构建了小鼠N-cadherin基因RNAi质粒载体,为N-cadherin功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 RNA干扰 神经型钙粘附蛋白 质粒载体

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对存在潜在人畜共患威胁的高致病性家禽病毒病的初步研究

17

作者 胡安康 《上海畜牧兽医通讯》 2009年第5期12-13,共2页

本文对存在潜在人畜共患威胁的高致病性家禽病毒病进行了梳理和调查,临床对感染(NDV)的病鹅进行了微生物学检查与鉴定,根据血清学检测、病毒特性初步对病毒进行鉴别诊断,可为临床诊断和实验室诊断提供一定的理论依据和诊断方法。取病鹅... 本文对存在潜在人畜共患威胁的高致病性家禽病毒病进行了梳理和调查,临床对感染(NDV)的病鹅进行了微生物学检查与鉴定,根据血清学检测、病毒特性初步对病毒进行鉴别诊断,可为临床诊断和实验室诊断提供一定的理论依据和诊断方法。取病鹅肝脏组织处理接种10日龄SPF鸡胚,所接种鸡胚在36～48h之间死亡。收集病毒液进行血凝实验(HA)、血凝抑制实验(HI)。结果:HA为27,HI判断为禽副黏病毒Ⅰ型。结论:此例为典型的鹅源新城疫,但病原体在环境压力和机体免疫压力下,不断发生变异,出现新的变异株和各种血清型,需密切关注,防止类似禽流感的人畜共患疾病的发生。 展开更多

关键词 人畜共患疾病 高致病性 病毒病 家禽 威胁 血凝抑制实验 实验室诊断 SPF鸡胚

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血红素氧合酶-2基因真核表达载体的构建

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作者 张腾业 王珍珍 +6 位作者 陈仁金 袁红花 胡安康 吴连连 朱裕华 冀德君 朱孝荣 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第6期27-30,共4页

为构建血红素氧合酶-2(HO-2)真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况。试验利用PCR技术从C57BL/6小鼠海马组织中扩增出HO-2基因cDNA序列,用双酶切法将此序列克隆到真核表达载体pEF1α-IRES-AcGFP上,构... 为构建血红素氧合酶-2(HO-2)真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况。试验利用PCR技术从C57BL/6小鼠海马组织中扩增出HO-2基因cDNA序列,用双酶切法将此序列克隆到真核表达载体pEF1α-IRES-AcGFP上,构建HO-2的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,重组载体经EcoRI和BamHI双酶切和测序鉴定。电穿孔法转染小鼠脑血管内皮细胞,48h后,实时定量PCR、Western blot检测HO-2在小鼠脑血管内皮细胞中mRNA和蛋白质水平的表达情况。结果表明,pEF1α-HO-2-AcGFP载体构建正确;重组载体转染小鼠脑血管内皮细胞后HO-2在mRNA水平表达量较空载体转染极显著增高(P<0.01),在蛋白水平表达量较空载体转染显著增高(P<0.05)。表明HO-2基因的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP构建成功,为进一步研究其机制和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 HO-2基因 真核表达载体 载体构建 基因表达

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