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大鼠脑源性神经营养因子基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1: 1; 作者欧阳长杰滕大才 +2 位作者曲德伟王德广徐铁军《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期82-85,108,共5页; 构建脑源性神经营养因子（BDNF）基因真核表达载体，检测其转染COS-7细胞后的表达。方法：从大鼠海马组织中提取总RNA，采用RT-PCR方法获得目的基因片段，克隆至pGEM-T载体中。经测序确证后将BDNFcDNA片段与pEGFP-N1载体定向连接。将鉴... 展开更多; 关键词脑源性神经营养因子基因重组质粒基因表达 COS-7细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

加巴喷丁对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节FGF-2表达的影响: 2; 作者孙德旭李向阳 +1 位作者王林秦苏萍《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第47期25-27,共3页; 目的观察加巴喷丁(GBP)对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠背根神经节成纤维细胞生长因子2(FGF-2)蛋白表达的影响,以探讨其镇痛机制。方法将80只SD大鼠随机分为C组、DNP组、SC+DNP组和GBP+DNP组,各20只。除C组外,其他各... 展开更多; 关键词加巴喷丁糖尿病神经病理性痛背根神经节成纤维细胞生长因子2; 在线阅读下载PDF 职称材料

细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建: 3; 作者孙德旭秦苏萍 +2 位作者王晓天李小翠刘志强《山东医药》 CAS 2013年第19期11-14,共4页; 目的构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞。方法分别克隆FGF18基因启动子区域的5'同源臂和3'同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FG... 展开更多; 关键词 FGF18 绿色荧光蛋白细菌人工染色体同源重组; 在线阅读下载PDF 职称材料

免疫金银法检测抗角质蛋白抗体的影响因素: 4; 作者孙德旭秦苏萍杜文平《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期145-148,共4页; 目的：探讨免疫金银法检测抗角质蛋白抗体（AKA）的影响因素.方法：收集AKA阳性的类风湿性关节炎患者血清20份,同时收集20份正常健康者血清作为对照,采用免疫金银法检测上述血清AKA,检测中采用不同的封闭液、不同浓度的金标抗体、不同... 展开更多; 关键词免疫金银法抗角质蛋白抗体类风湿性关节炎; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠脑源性神经营养因子基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1: 1; 作者欧阳长杰滕大才曲德伟王德广徐铁军; 机构徐州医学院人体解剖学教研室; 出处《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期82-85,108,共5页; 基金江苏省自然科学基金项目（BK2009087）徐州医学院科研课题（2010脚17）徐州市科技计划项目（XM098084）; 文摘构建脑源性神经营养因子（BDNF）基因真核表达载体，检测其转染COS-7细胞后的表达。方法：从大鼠海马组织中提取总RNA，采用RT-PCR方法获得目的基因片段，克隆至pGEM-T载体中。经测序确证后将BDNFcDNA片段与pEGFP-N1载体定向连接。将鉴定正确的重组体pEGFP-N1-BDNF以脂质体法转染至COS-7细胞中，用RT-PCR鉴定BDNFmRNA的表达，免疫印迹法检测BDNF蛋白质表达水平。结果：克隆了BDNF的cDNA，并构建了其真核表达载体pEGFP-N1-BDNF，经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了其序列的正确性；免疫印迹法分析显示，转染48h时，COS-7细胞以分泌proBDNF-GFP融合蛋白为主，在96h以分泌成熟BDNF-GFP融合蛋白为主。结论：成功构建pEGFP-N1-BDNF真核表达载体，并且在COS-7细胞中得到高效表达，BDNF前体及成熟体同时分泌到胞外，在不同时间点分泌组合不同。; 关键词脑源性神经营养因子基因重组质粒基因表达 COS-7细胞; Keywords brain-derived neurotrophic factor gene recombinant plasmid gene expression COS-7 cells; 分类号 R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名加巴喷丁对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节FGF-2表达的影响: 2; 作者孙德旭李向阳王林秦苏萍; 机构徐州医学院人体解剖学教研室徐州医学院病原生物学与免疫学教研室; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第47期25-27,共3页; 基金徐州医学院院级科研课题(2014KJ); 文摘目的观察加巴喷丁(GBP)对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠背根神经节成纤维细胞生长因子2(FGF-2)蛋白表达的影响,以探讨其镇痛机制。方法将80只SD大鼠随机分为C组、DNP组、SC+DNP组和GBP+DNP组,各20只。除C组外,其他各组采用腹腔注射STZ建立DNP模型。SC+DNP组和GBP+DNP组在造模第15天开始分别腹腔注射生理盐水、GBP(50 mg/kg),每天1次,连续7 d。在造模前1天及造模后3、7、10、14、21、28天测定各组大鼠的缩足反射机械刺激阈值(PWMT)和缩足反射热辐射潜伏期(PWTL);免疫组织化学法和Western blotting法检测大鼠背根神经节中的FGF-2。结果与C组相比,DNP组、SC+DNP组、GBP+DNP组造模后3、7、10、14、21、28天PWMT和PWTL低(P均<0.05)。与DNP组及SC+DNP组相比,GBP+DNP组造模后21天PWMT和PWTL高(P均<0.05)。造模后21天,DNP组、SC+DNP组和GBP+DNP组背根神经节内FGF-2蛋白含量较C组高,GBP+DNP组较DNP组、SC+DNP组低(P均<0.05)。结论 GBP可通过抑制DNP大鼠背根神经节内FGF-2的表达,从而减轻大鼠神经病理性痛。; 关键词加巴喷丁糖尿病神经病理性痛背根神经节成纤维细胞生长因子2; 分类号 R322.8 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R364.5 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建: 3; 作者孙德旭秦苏萍王晓天李小翠刘志强; 机构徐州医学院人体解剖学教研室徐州医学院病原微生物学教研室 the University of Texas Health Science Center at San Antonio; 出处《山东医药》 CAS 2013年第19期11-14,共4页; 基金 National institites of Health R01(AR053100)(M G Naski); 文摘目的构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞。方法分别克隆FGF18基因启动子区域的5'同源臂和3'同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒。提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区。结果经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC。结论成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产。; 关键词 FGF18 绿色荧光蛋白细菌人工染色体同源重组; Keywords fibroblast growth factor 18 green fluorescent protein bacterial artificial chromosome homologous recombination; 分类号 Q816 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名免疫金银法检测抗角质蛋白抗体的影响因素: 4; 作者孙德旭秦苏萍杜文平; 机构徐州医学院人体解剖学教研室徐州医学院病原生物学与免疫学教研室; 出处《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期145-148,共4页; 文摘目的：探讨免疫金银法检测抗角质蛋白抗体（AKA）的影响因素.方法：收集AKA阳性的类风湿性关节炎患者血清20份,同时收集20份正常健康者血清作为对照,采用免疫金银法检测上述血清AKA,检测中采用不同的封闭液、不同浓度的金标抗体、不同的显色时间,比较分析不同条件下免疫金银法检测AKA的阳性率及结果易判断程度,以确定较合适的检测条件.同时采用免疫荧光法检测AKA,比较2种方法检测AKA的敏感性.结果：以含10％～20％的羊血清及1％BSA的封闭液、1：80～1：320的金标抗体、10～15 min的显色时间为较合适的检测条件.免疫金银法检测AKA较免疫荧光法敏感性高,且差别有统计学意义.结论：免疫金银法检测AKA对类风湿性关节炎具有较高的敏感性和特异性,临床上用于类风湿性关节炎的辅助诊断具有较高的诊断价值.; 关键词免疫金银法抗角质蛋白抗体类风湿性关节炎; Keywords immunogold-silver method anti-keratin antibody rheumatoid arthritis; 分类号 R361 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大鼠脑源性神经营养因子基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达	欧阳长杰滕大才曲德伟王德广徐铁军	《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	加巴喷丁对糖尿病神经病理痛大鼠背根神经节FGF-2表达的影响	孙德旭李向阳王林秦苏萍	《山东医药》 CAS 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建	孙德旭秦苏萍王晓天李小翠刘志强	《山东医药》 CAS	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	免疫金银法检测抗角质蛋白抗体的影响因素	孙德旭秦苏萍杜文平	《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料