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精子相关抗原6(SPAG6)与TCTE3蛋白间相互作用探讨
被引量:
2
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作者
双超凡
柳赟昊
+6 位作者
刘晙玭
闵洁
李梦颖
桂媛
黄金宇
张玲
张志兵
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017年第8期948-952,共5页
目的:探讨精子相关抗原6(sperm associated antigen 6,Spag6)和T复合体相关睾丸表达3(T-complex associated testis expressed 3,TCTE3)之间的相互作用。方法:PCR法观察Tcte3在雄性小鼠各组织中的表达;以小鼠睾丸c DNA为模板,扩增Tcte3...
目的:探讨精子相关抗原6(sperm associated antigen 6,Spag6)和T复合体相关睾丸表达3(T-complex associated testis expressed 3,TCTE3)之间的相互作用。方法:PCR法观察Tcte3在雄性小鼠各组织中的表达;以小鼠睾丸c DNA为模板,扩增Tcte3序列,构建Tcte3/p GADT7、Tcte3/p EGFPN2重组质粒;以Tcte3/p EGFPN2转染CHO细胞和COS-1细胞,免疫荧光染色及Western blot检测TCTE3在细胞中的定位和表达;以Spag6/p GBKT7和Tcte3/p GADT7进行酵母双杂交实验,提取酵母蛋白后采用Western blot检测TCTE3与SPAG6之间是否存在直接的相互作用。结果:Tcte3在睾丸、脑、肝、肾、肺、脾、肌肉中均有表达;酶切和测序鉴定证实Tcte3/p GADT7和Tcte3/p EGFPN2重组质粒均构建成功;体外实验发现TCTE3主要在CHO和COS-1细胞质中表达,当与SPAG6质粒共转染后,TCTE3被募集至细胞微管中表达;酵母双杂交实验显示TCTE3/SPAG6组合后,在缺少SD/-Leu/-Trp/-His的培养板上有菌落生成,Western blot显示菌落中TCTE3、SPAG6蛋白表达显著,分子量正确。结论:精子相关抗原SPAG6与TCTE3之间存在直接的相互作用,SPAG6可募集TCTE3至细胞微管中表达。
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关键词
男性不育
精子相关抗原6
T复合体相关睾丸表达3
酵母双杂交
蛋白表达
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职称材料
题名
精子相关抗原6(SPAG6)与TCTE3蛋白间相互作用探讨
被引量:
2
1
作者
双超凡
柳赟昊
刘晙玭
闵洁
李梦颖
桂媛
黄金宇
张玲
张志兵
机构
武汉科技
大学
医
学
院公共卫生
学
院劳动卫生与环境卫生
学
教研室
弗吉利亚联邦大学妇产科学系
出处
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017年第8期948-952,共5页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(编号:81671514
81571428)
+1 种基金
国家自然科学基金青年资助项目(编号:81300536)
湖北省卫计委资助项目(编号:WJ2015Q026)
文摘
目的:探讨精子相关抗原6(sperm associated antigen 6,Spag6)和T复合体相关睾丸表达3(T-complex associated testis expressed 3,TCTE3)之间的相互作用。方法:PCR法观察Tcte3在雄性小鼠各组织中的表达;以小鼠睾丸c DNA为模板,扩增Tcte3序列,构建Tcte3/p GADT7、Tcte3/p EGFPN2重组质粒;以Tcte3/p EGFPN2转染CHO细胞和COS-1细胞,免疫荧光染色及Western blot检测TCTE3在细胞中的定位和表达;以Spag6/p GBKT7和Tcte3/p GADT7进行酵母双杂交实验,提取酵母蛋白后采用Western blot检测TCTE3与SPAG6之间是否存在直接的相互作用。结果:Tcte3在睾丸、脑、肝、肾、肺、脾、肌肉中均有表达;酶切和测序鉴定证实Tcte3/p GADT7和Tcte3/p EGFPN2重组质粒均构建成功;体外实验发现TCTE3主要在CHO和COS-1细胞质中表达,当与SPAG6质粒共转染后,TCTE3被募集至细胞微管中表达;酵母双杂交实验显示TCTE3/SPAG6组合后,在缺少SD/-Leu/-Trp/-His的培养板上有菌落生成,Western blot显示菌落中TCTE3、SPAG6蛋白表达显著,分子量正确。结论:精子相关抗原SPAG6与TCTE3之间存在直接的相互作用,SPAG6可募集TCTE3至细胞微管中表达。
关键词
男性不育
精子相关抗原6
T复合体相关睾丸表达3
酵母双杂交
蛋白表达
Keywords
male infertility
sperm associated antigen 6
T-complex associated testis expressed 3
yeast two hybrid
protein expression
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
精子相关抗原6(SPAG6)与TCTE3蛋白间相互作用探讨
双超凡
柳赟昊
刘晙玭
闵洁
李梦颖
桂媛
黄金宇
张玲
张志兵
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017
2
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