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miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系
被引量:
4
1
作者
闫利霞
黄晓
+1 位作者
张鑫
郑广瑛
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2021年第5期417-421,共5页
目的探讨微小RNA\|24(miR-24)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of casp...
目的探讨微小RNA\|24(miR-24)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-binding protein with low PI,Smac/Diablo)-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系。方法将HLE-B3细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组。先按照miR-24抑制剂、miR-24 NC试剂盒说明书转染H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞24 h,然后向H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组HLE-B3细胞中加入200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预24 h,收集细胞用于后续实验;将正常培养的HLE-B3细胞设置为对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组HLE-B3细胞miR-24表达情况,CCK-8法检测各组HLE-B3细胞生长情况,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算各组细胞存活率和细胞凋亡率。采用荧光探针JC-1法检测线粒体膜电位变化情况(利用红绿荧光强度比反映线粒体膜电位);采用蛋白免疫印迹法检测各组HLE-B3细胞线粒体和细胞质分级中Smac/Diablo及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达情况。对所得数据进行统计学分析。结果当H_(2)O_(2)浓度大于200μmol·L^(-1)时,细胞存活率均小于50%,本实验以200μmol·L^(-1)作为最适H_(2)O_(2)浓度。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞miR-24相对表达量分别为1.04±0.02、2.73±0.09、2.69±0.07和1.15±0.06;与对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞中miR-24表达升高(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组中miR-24表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组中miR-24表达差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞存活率显著升高、细胞凋亡率显著降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞存活率和细胞凋亡率差异均无统计学意义(均为P>0.05)。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比分别为0.24±0.02、0.12±0.02、0.15±0.03、0.31±0.06。与对照组相比,H_(2)O_(2)组红绿荧光强度比降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比均升高(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组红绿荧光强度比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组线粒体分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP蛋白表达升高(均为P<0.05),细胞质分级中Smac/Diablo、caspase-9和caspase-3蛋白表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组线粒体、细胞质分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论miR-24可能通过抑制线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径,抑制H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞凋亡。
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关键词
微小RNA-24
过氧化氢
人晶状体上皮细胞
胱天蛋白酶激活因子
低等电位点的凋亡抑制蛋白
细胞凋亡
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职称材料
儿童眼外伤120例临床分析
被引量:
3
2
作者
马琳
《中国实用医药》
2012年第32期120-121,共2页
目的通过对儿童眼外伤各相关因素的分析,进一步探讨儿童眼外伤的防治措施。方法回顾性分析120例儿童眼外伤的致伤类型、致伤物、治疗措施等。结果儿童眼外伤常见致伤物:玩具枪、鞭炮烟花、棍棒、刀剪利器、化学物等。致盲最多是穿孔伤,...
目的通过对儿童眼外伤各相关因素的分析,进一步探讨儿童眼外伤的防治措施。方法回顾性分析120例儿童眼外伤的致伤类型、致伤物、治疗措施等。结果儿童眼外伤常见致伤物:玩具枪、鞭炮烟花、棍棒、刀剪利器、化学物等。致盲最多是穿孔伤,钝挫伤次之。治疗前无光感~<0.05者33眼,治疗后2眼,0.05~<0.3者43眼,治疗后13眼,≥0.3者治疗前34眼,治疗后达到92眼。结论强调重视和预防的重要性,及时正确的诊治、手术适应证的把握可以降低眼外伤对视力的损害,提高脱盲率。
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关键词
儿童
眼外伤
临床分析
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职称材料
题名
miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系
被引量:
4
1
作者
闫利霞
黄晓
张鑫
郑广瑛
机构
开封
市中心
医院
小儿
眼科
开封眼病医院小儿眼科
郑州大学第一附属
医院
眼科
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2021年第5期417-421,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(编号:81670836)。
文摘
目的探讨微小RNA\|24(miR-24)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-binding protein with low PI,Smac/Diablo)-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系。方法将HLE-B3细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组。先按照miR-24抑制剂、miR-24 NC试剂盒说明书转染H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞24 h,然后向H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组HLE-B3细胞中加入200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预24 h,收集细胞用于后续实验;将正常培养的HLE-B3细胞设置为对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组HLE-B3细胞miR-24表达情况,CCK-8法检测各组HLE-B3细胞生长情况,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算各组细胞存活率和细胞凋亡率。采用荧光探针JC-1法检测线粒体膜电位变化情况(利用红绿荧光强度比反映线粒体膜电位);采用蛋白免疫印迹法检测各组HLE-B3细胞线粒体和细胞质分级中Smac/Diablo及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达情况。对所得数据进行统计学分析。结果当H_(2)O_(2)浓度大于200μmol·L^(-1)时,细胞存活率均小于50%,本实验以200μmol·L^(-1)作为最适H_(2)O_(2)浓度。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞miR-24相对表达量分别为1.04±0.02、2.73±0.09、2.69±0.07和1.15±0.06;与对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞中miR-24表达升高(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组中miR-24表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组中miR-24表达差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞存活率显著升高、细胞凋亡率显著降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞存活率和细胞凋亡率差异均无统计学意义(均为P>0.05)。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比分别为0.24±0.02、0.12±0.02、0.15±0.03、0.31±0.06。与对照组相比,H_(2)O_(2)组红绿荧光强度比降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比均升高(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组红绿荧光强度比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组线粒体分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP蛋白表达升高(均为P<0.05),细胞质分级中Smac/Diablo、caspase-9和caspase-3蛋白表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组线粒体、细胞质分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论miR-24可能通过抑制线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径,抑制H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞凋亡。
关键词
微小RNA-24
过氧化氢
人晶状体上皮细胞
胱天蛋白酶激活因子
低等电位点的凋亡抑制蛋白
细胞凋亡
Keywords
microRNA-24
hydrogen peroxide
human lens epithelial cells
activator of caspase
direct IAP-blinding protein with low PI
apoptosis
分类号
R776 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
儿童眼外伤120例临床分析
被引量:
3
2
作者
马琳
机构
河南省
开封眼病医院小儿眼科
出处
《中国实用医药》
2012年第32期120-121,共2页
文摘
目的通过对儿童眼外伤各相关因素的分析,进一步探讨儿童眼外伤的防治措施。方法回顾性分析120例儿童眼外伤的致伤类型、致伤物、治疗措施等。结果儿童眼外伤常见致伤物:玩具枪、鞭炮烟花、棍棒、刀剪利器、化学物等。致盲最多是穿孔伤,钝挫伤次之。治疗前无光感~<0.05者33眼,治疗后2眼,0.05~<0.3者43眼,治疗后13眼,≥0.3者治疗前34眼,治疗后达到92眼。结论强调重视和预防的重要性,及时正确的诊治、手术适应证的把握可以降低眼外伤对视力的损害,提高脱盲率。
关键词
儿童
眼外伤
临床分析
分类号
R779.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系
闫利霞
黄晓
张鑫
郑广瑛
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2021
4
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职称材料
2
儿童眼外伤120例临床分析
马琳
《中国实用医药》
2012
3
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职称材料
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