目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进...目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进一步将HepG2细胞分为对照(Control)组、阴性对照(NC)组和沉默CKAP2(siCKAP2)组。NC组和siCKAP2组细胞分别转染siControl和siCKAP2。采用CKK-8法检测细胞活性,BrdU掺入法检测细胞增殖,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法检测cleavedcaspase 3,Bax,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin以及磷酸化的Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和磷酸化的信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白质表达水平。结果:与正常肝细胞L02比较,CKAP2在肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721中的表达显著上调(均P<0.05)。与NC组比较,siCKAP2组细胞活性和增殖率显著下降(均P<0.05);细胞凋亡率升高,cleaved-caspase 3和Bax的蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);细胞迁移和侵袭显著减少(均P<0.05);E-cadherin蛋白质表达水平显著上调,Vimentin,Ncadherin,磷酸化的JAK2和磷酸化的STAT3的蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默CKAP2基因抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,JAK2/STAT3信号通路可能参与这些过程。展开更多
文摘目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进一步将HepG2细胞分为对照(Control)组、阴性对照(NC)组和沉默CKAP2(siCKAP2)组。NC组和siCKAP2组细胞分别转染siControl和siCKAP2。采用CKK-8法检测细胞活性,BrdU掺入法检测细胞增殖,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法检测cleavedcaspase 3,Bax,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin以及磷酸化的Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和磷酸化的信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白质表达水平。结果:与正常肝细胞L02比较,CKAP2在肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721中的表达显著上调(均P<0.05)。与NC组比较,siCKAP2组细胞活性和增殖率显著下降(均P<0.05);细胞凋亡率升高,cleaved-caspase 3和Bax的蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);细胞迁移和侵袭显著减少(均P<0.05);E-cadherin蛋白质表达水平显著上调,Vimentin,Ncadherin,磷酸化的JAK2和磷酸化的STAT3的蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默CKAP2基因抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,JAK2/STAT3信号通路可能参与这些过程。
