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miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系
被引量:
4
1
作者
闫利霞
黄晓
+1 位作者
张鑫
郑广瑛
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2021年第5期417-421,共5页
目的探讨微小RNA\|24(miR-24)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of casp...
目的探讨微小RNA\|24(miR-24)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-binding protein with low PI,Smac/Diablo)-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系。方法将HLE-B3细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组。先按照miR-24抑制剂、miR-24 NC试剂盒说明书转染H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞24 h,然后向H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组HLE-B3细胞中加入200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预24 h,收集细胞用于后续实验;将正常培养的HLE-B3细胞设置为对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组HLE-B3细胞miR-24表达情况,CCK-8法检测各组HLE-B3细胞生长情况,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算各组细胞存活率和细胞凋亡率。采用荧光探针JC-1法检测线粒体膜电位变化情况(利用红绿荧光强度比反映线粒体膜电位);采用蛋白免疫印迹法检测各组HLE-B3细胞线粒体和细胞质分级中Smac/Diablo及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达情况。对所得数据进行统计学分析。结果当H_(2)O_(2)浓度大于200μmol·L^(-1)时,细胞存活率均小于50%,本实验以200μmol·L^(-1)作为最适H_(2)O_(2)浓度。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞miR-24相对表达量分别为1.04±0.02、2.73±0.09、2.69±0.07和1.15±0.06;与对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞中miR-24表达升高(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组中miR-24表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组中miR-24表达差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞存活率显著升高、细胞凋亡率显著降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞存活率和细胞凋亡率差异均无统计学意义(均为P>0.05)。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比分别为0.24±0.02、0.12±0.02、0.15±0.03、0.31±0.06。与对照组相比,H_(2)O_(2)组红绿荧光强度比降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比均升高(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组红绿荧光强度比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组线粒体分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP蛋白表达升高(均为P<0.05),细胞质分级中Smac/Diablo、caspase-9和caspase-3蛋白表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组线粒体、细胞质分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论miR-24可能通过抑制线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径,抑制H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞凋亡。
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关键词
微小RNA-24
过氧化氢
人晶状体上皮细胞
胱天蛋白酶激活因子
低等电位点的凋亡抑制蛋白
细胞凋亡
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职称材料
水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗斜视伴下斜肌功能亢进的效果
被引量:
3
2
作者
闫利霞
马琳
张鑫
《河南医学研究》
CAS
2020年第31期5848-5850,共3页
目的观察水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗斜视伴下斜肌功能亢进患儿的效果。方法选取2017年6月至2019年6月开封市中心医院收治的88例斜视伴下斜肌功能亢进患儿为研究对象,根据手术方案分为对照组和观察组,各44例。对照组接受...
目的观察水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗斜视伴下斜肌功能亢进患儿的效果。方法选取2017年6月至2019年6月开封市中心医院收治的88例斜视伴下斜肌功能亢进患儿为研究对象,根据手术方案分为对照组和观察组,各44例。对照组接受水平肌加强减弱术治疗,观察组接受水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗。比较两组手术效果、下斜肌功能亢进有效率、手术前后水平斜视度情况及视近、视远斜视度。结果观察组总有效率为95.45%,高于对照组的81.82%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组下斜肌功能亢进有效率为90.91%(40/44),高于对照组的72.73%(32/44),差异有统计学意义(P<0.05)。术前,观察组水平斜视度[(26.58±4.10)°]与对照组[(26.11±4.87)°]比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后,观察组水平斜视度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术前,两组视近、视远斜视度比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后3、6个月,两组视近、视远斜视度均低于术前,且观察组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术可有效治疗斜视,降低斜视度数,恢复下斜肌正常功能。
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关键词
斜视
下斜肌功能亢进
水平肌加强减弱术
下斜肌切断减弱术
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职称材料
题名
miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系
被引量:
4
1
作者
闫利霞
黄晓
张鑫
郑广瑛
机构
开封市中心医院小儿眼科
开封
眼病
医院
小儿
眼科
郑州大学第一附属
医院
眼科
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2021年第5期417-421,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(编号:81670836)。
文摘
目的探讨微小RNA\|24(miR-24)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响,分析其与线粒体中第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活因子/低等电位点的凋亡抑制蛋白的直接结合蛋白(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-binding protein with low PI,Smac/Diablo)-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系。方法将HLE-B3细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组。先按照miR-24抑制剂、miR-24 NC试剂盒说明书转染H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞24 h,然后向H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组HLE-B3细胞中加入200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预24 h,收集细胞用于后续实验;将正常培养的HLE-B3细胞设置为对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组HLE-B3细胞miR-24表达情况,CCK-8法检测各组HLE-B3细胞生长情况,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算各组细胞存活率和细胞凋亡率。采用荧光探针JC-1法检测线粒体膜电位变化情况(利用红绿荧光强度比反映线粒体膜电位);采用蛋白免疫印迹法检测各组HLE-B3细胞线粒体和细胞质分级中Smac/Diablo及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达情况。对所得数据进行统计学分析。结果当H_(2)O_(2)浓度大于200μmol·L^(-1)时,细胞存活率均小于50%,本实验以200μmol·L^(-1)作为最适H_(2)O_(2)浓度。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞miR-24相对表达量分别为1.04±0.02、2.73±0.09、2.69±0.07和1.15±0.06;与对照组相比,H_(2)O_(2)组细胞中miR-24表达升高(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组中miR-24表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组中miR-24表达差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组细胞存活率显著升高、细胞凋亡率显著降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组细胞存活率和细胞凋亡率差异均无统计学意义(均为P>0.05)。对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+miR-24 NC组和H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比分别为0.24±0.02、0.12±0.02、0.15±0.03、0.31±0.06。与对照组相比,H_(2)O_(2)组红绿荧光强度比降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组红绿荧光强度比均升高(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组红绿荧光强度比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与H_(2)O_(2)组和H_(2)O_(2)+miR-24 NC组相比,H_(2)O_(2)+miR-24抑制剂组线粒体分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP蛋白表达升高(均为P<0.05),细胞质分级中Smac/Diablo、caspase-9和caspase-3蛋白表达降低(均为P<0.05),但H_(2)O_(2)组与H_(2)O_(2)+miR-24 NC组线粒体、细胞质分级中Smac/Diablo蛋白及细胞质分级中XIAP、caspase-9和caspase-3蛋白表达相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论miR-24可能通过抑制线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径,抑制H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞凋亡。
关键词
微小RNA-24
过氧化氢
人晶状体上皮细胞
胱天蛋白酶激活因子
低等电位点的凋亡抑制蛋白
细胞凋亡
Keywords
microRNA-24
hydrogen peroxide
human lens epithelial cells
activator of caspase
direct IAP-blinding protein with low PI
apoptosis
分类号
R776 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗斜视伴下斜肌功能亢进的效果
被引量:
3
2
作者
闫利霞
马琳
张鑫
机构
开封市中心医院小儿眼科
出处
《河南医学研究》
CAS
2020年第31期5848-5850,共3页
文摘
目的观察水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗斜视伴下斜肌功能亢进患儿的效果。方法选取2017年6月至2019年6月开封市中心医院收治的88例斜视伴下斜肌功能亢进患儿为研究对象,根据手术方案分为对照组和观察组,各44例。对照组接受水平肌加强减弱术治疗,观察组接受水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗。比较两组手术效果、下斜肌功能亢进有效率、手术前后水平斜视度情况及视近、视远斜视度。结果观察组总有效率为95.45%,高于对照组的81.82%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组下斜肌功能亢进有效率为90.91%(40/44),高于对照组的72.73%(32/44),差异有统计学意义(P<0.05)。术前,观察组水平斜视度[(26.58±4.10)°]与对照组[(26.11±4.87)°]比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后,观察组水平斜视度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术前,两组视近、视远斜视度比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后3、6个月,两组视近、视远斜视度均低于术前,且观察组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术可有效治疗斜视,降低斜视度数,恢复下斜肌正常功能。
关键词
斜视
下斜肌功能亢进
水平肌加强减弱术
下斜肌切断减弱术
分类号
R779.6 [医药卫生—眼科]
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miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系
闫利霞
黄晓
张鑫
郑广瑛
《眼科新进展》
CAS
北大核心
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水平肌加强减弱术联合下斜肌切断减弱术治疗斜视伴下斜肌功能亢进的效果
闫利霞
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《河南医学研究》
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