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题名大豆过氧化氢酶同源基因在大肠杆菌中融合表达
被引量：2
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作者
陈金峰
胡斌杰
王宫南
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机构
开封大学化学工程学院生物技术实验室
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出处
《中国油料作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期384-388,共5页
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基金
河南省教育厅科技研究重点项目(12B180015)
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文摘
利用RT-PCR技术获得大豆的过氧化氢酶基因家族的GmCAT3、GmCAT4、GmCAT5的cDNA片段,进化树分析表明GmCAT3和GmCAT1/2,GmCAT5和豌豆PsCAT、豇豆VrCAT的亲缘关系较近;将3个目的基因克隆到pMD19-T载体上,再连接到pET28a表达载体上,获得重组载体pET28a-GmCAT3、pET28a-GmCAT4和pET28a-GmCAT5,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,在20℃条件下,0.1mmol/L的IPTG诱导12h表达量最佳,诱导的目的蛋白在60kD处以包涵体的形式存在,获得重组蛋白分别占总蛋白的35.7%、44.2%和42.5%。
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关键词
大豆
过氧化氢酶
大肠杆菌
表达
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Keywords
Soybean
Catalase
Escherichia coli
Expression
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
S565.1
[农业科学—作物学]
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