延边白鹅IFN-γ基因的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量：3

1

作者 张颖 刘恩平 +5 位作者 陈海迪 高旭 张立媛 于清洋 鲁承 梁晚枫 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第12期126-129,共4页

为制备抗延边白鹅IFN-γ蛋白的多克隆抗体,以已制备的pMD-IFN-γ质粒为模板,通过PCR扩增到延边白鹅IFN-γ基因,经TA克隆和BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,将目的基因亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达,将经S... 为制备抗延边白鹅IFN-γ蛋白的多克隆抗体,以已制备的pMD-IFN-γ质粒为模板,通过PCR扩增到延边白鹅IFN-γ基因,经TA克隆和BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切,将目的基因亚克隆至pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达,将经SDS-PAGE及Western blot鉴定正确的重组蛋白用GST标签纯化试剂盒纯化,以纯化的重组蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体并进行ELISA检测。结果显示,成功构建了原核表达载体p GEXIFN-γ,表达的重组蛋白以包涵体形式存在,分子质量约为43 ku,制备的小鼠抗IFN-γ多克隆抗体效价为1∶16 000。 展开更多

关键词 延边白鹅 IFN-Γ基因 原核表达 多克隆抗体

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延边黄牛白细胞介素18基因的克隆及序列分析

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作者 张立霞 高旭 +3 位作者 宋建臣 孙平杰 夏晓辉 许应天 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第5期55-59,共5页

本试验旨在扩增延边黄牛白细胞介素18(IL-18)全长cDNA,并对其序列进行进化分析。根据GenBank中已公布的牛IL-18cDNA序列设计1对引物,利用RT-PCR从刀豆蛋白(ConA)和植物分裂素(PHA)双重刺激36h活化的延边黄牛脾淋巴细胞中扩增出牛IL-18全... 本试验旨在扩增延边黄牛白细胞介素18(IL-18)全长cDNA,并对其序列进行进化分析。根据GenBank中已公布的牛IL-18cDNA序列设计1对引物,利用RT-PCR从刀豆蛋白(ConA)和植物分裂素(PHA)双重刺激36h活化的延边黄牛脾淋巴细胞中扩增出牛IL-18全长cDNA,进行PCR、酶切和测序鉴定,并做进化分析及二级结构预测。扩增出延边黄牛IL-18全长cDNA,大小为760bp,其中有两个氨基酸突变。进化分析结果显示,延边黄牛IL-18与牛、山羊、绵羊、马和猪的同源性较高,均大于90%,与同种群牛的同源性最高,而与原鸡的同源性最低,为51.1%。本研究确定了IL-18的种群差异,并预测了二级结构特性,为进一步研究延边黄牛IL-18的基因表达、生物活性及其作为佐剂的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 牛白细胞介素 RT-PCR 进化分析

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圈养延边牛寄生虫感染情况初步调查 被引量：1

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作者 陈锐 姜岩哲 +4 位作者 盛琦 姜珊 韩禹 赵泉惠 梁晚枫 《吉林畜牧兽医》 2023年第7期163-164,共2页

延边黄牛是中国五大地方优良牛之一,是经过长期自然和人工选择而形成的,是中国畜禽基因库中一份及其珍贵的“财宝”。在延边地区,牛是养殖业的重要种类之一,许多农民靠养殖牛为主要经济来源,对促进延边养殖业的发展,农民增收致富有重要... 延边黄牛是中国五大地方优良牛之一,是经过长期自然和人工选择而形成的,是中国畜禽基因库中一份及其珍贵的“财宝”。在延边地区,牛是养殖业的重要种类之一,许多农民靠养殖牛为主要经济来源,对促进延边养殖业的发展,农民增收致富有重要作用。 展开更多

关键词 寄生虫感染 延边牛 延边黄牛 主要经济来源 延边地区 养殖业 人工选择 初步调查

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延边黄牛BVDV一步法RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：1

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作者 陈姗 李文佳 +3 位作者 鲁旭波 高旭 梁晚枫 鲁承 《现代畜牧兽医》 2020年第9期15-17,共3页

为建立延边黄牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的一步法RT-PCR检测方法,根据Gen Bank上已登录的BVDV基因序列,应用Oligo 6.0设计一对特异性引物,建立BVDV的一步法RT-PCR检测方法,并将该方法应用于临床检测。结果显示,该方法对牛传染性鼻气管炎... 为建立延边黄牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的一步法RT-PCR检测方法,根据Gen Bank上已登录的BVDV基因序列,应用Oligo 6.0设计一对特异性引物,建立BVDV的一步法RT-PCR检测方法,并将该方法应用于临床检测。结果显示,该方法对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的基因扩增均为阴性,敏感性为1 ng基因组RNA,具有较好的敏感性、特异性和重复性,可用于延边黄牛BVDV感染的早期诊断和病原体监测。 展开更多

关键词 延边黄牛 牛病毒性腹泻病毒 一步法RT-PCR 检测方法

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显微CT技术对颌骨骨小梁解剖结构的测量及其准确性评价 被引量：4

5

作者 金光春 张晓燕 +5 位作者 姜玲 李祥林 张迪 黎卫星 金熙真 金东春 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期833-837,共5页

目的:应用显微CT(micro-CT)测量颌骨解剖结构,探讨micro-CT测量的准确性。方法:将9具尸体的下颌骨标本分为髁状突组(3个标本,骨小梁结构均匀)和下颌骨体部组(5个标本,骨小梁结构不均匀),图像分析软件建立总共30个有效容(VOI),每组各15... 目的:应用显微CT(micro-CT)测量颌骨解剖结构,探讨micro-CT测量的准确性。方法:将9具尸体的下颌骨标本分为髁状突组(3个标本,骨小梁结构均匀)和下颌骨体部组(5个标本,骨小梁结构不均匀),图像分析软件建立总共30个有效容(VOI),每组各15个。计算每个像元大小的每个参数的平均值和标准差,并用方差分析判断不同参数值之间差异是否有统计学意义。结果:在所有重建像元大小中,下颌骨体部组的结构模型指数(SMI)与18μm像元组比较差异有统计学意义(P<0.05)。髁状突组中重建像元大小为36μm时未发现差异有统计学意义(P>0.05),在所有重建像元大小中,骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)和骨小梁分离度(Tb.Sp)在下颌骨体部组和髁状突组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。其他大部分参数在像元大小为36μm时比较差异均无统计学意义。在下颌骨体部组,所有参数在不同的像元大小下比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:micro-CT的观测均能较准确反映骨小梁解剖结构的变化。 展开更多

关键词 颌骨 显微CT 骨小梁 解剖学

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应用MicroCT骨组织微细解剖学分析 被引量：5

6

作者 张迪 金东春 +5 位作者 周聪 姜玲 张晓燕 黎卫星 金熙真 金光春 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第7期859-860,共2页

取有效的解剖学信息,应用MicroCT测量骨微细解剖结构,探讨MicroCT测量的准确性。应用MicroCT(HMX-225 Actis 4,日本),成人牙列完整的颌骨标本40例,进行上下颌骨的解剖测量,所得数据进行统计学分析MicroCT与组织形态学结果之间的相关性... 取有效的解剖学信息,应用MicroCT测量骨微细解剖结构,探讨MicroCT测量的准确性。应用MicroCT(HMX-225 Actis 4,日本),成人牙列完整的颌骨标本40例,进行上下颌骨的解剖测量,所得数据进行统计学分析MicroCT与组织形态学结果之间的相关性。骨小梁、骨密度等几种Mi-croCT的观测指标,与骨形态学参数测量结果相似。MicroCT与组织形态学观测结果之间具有正相关性。 展开更多

关键词 显微CT 骨小梁 骨密度 微细解剖

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牙种植修复中下颌磨牙区骨皮质厚度的显微电子计算机断层摄影测量

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作者 张晓燕 金东春 +5 位作者 姜玲 张迪 董晨 金光春 金熙真 石红兵 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第5期731-732,共2页

牙种植技术已较广泛地应用于临床,其并发症如下牙槽神经损伤、骨壁侧穿等也越来越多显现,对下颌骨相关解剖结构特点认识不足和植入位置不准确是造成这些并发症的重要因素。牙种植体植入部位的骨厚度、皮质骨的质量、骨密度条件是提高牙... 牙种植技术已较广泛地应用于临床,其并发症如下牙槽神经损伤、骨壁侧穿等也越来越多显现,对下颌骨相关解剖结构特点认识不足和植入位置不准确是造成这些并发症的重要因素。牙种植体植入部位的骨厚度、皮质骨的质量、骨密度条件是提高牙种植术成功率的关键[1-5],因此种植术前掌握种植部位的骨皮质信息有指导意义。Sjdén等[6]应用显微电子计算机断层摄影（micro computerized tomogrphy,MicroCT）分析骨体积、骨小梁分离度、 展开更多

关键词 下颌磨牙区 牙种植 皮质骨厚度 用显微电子计算机断层摄影 测量

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基于NS1基因的2型犬细小病毒PCR检测方法的建立与应用 被引量：2

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作者 赵桂炎 张立媛 +5 位作者 高旭 王艳秋 宋爽 金丽兰 鲁承 许应天 《吉林畜牧兽医》 2015年第11期13-15,共3页

为建立犬细小病毒(CPV-2)的PCR检测方法,并应用于临床实践和NS1基因相关检测。根据Gen Bank中收录CPV-2的NS1基因序列(KM014813),应用Oligo6.0软件设计一对特异引物,扩增目的片段为346bp,通过PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性和符... 为建立犬细小病毒(CPV-2)的PCR检测方法,并应用于临床实践和NS1基因相关检测。根据Gen Bank中收录CPV-2的NS1基因序列(KM014813),应用Oligo6.0软件设计一对特异引物,扩增目的片段为346bp,通过PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性和符合性试验,证实已成功建立了CPV-2-NS1基因的PCR检测方法。利用该方法对35例疑似CPV-2感染病例进行检测,PCR方法检出24例阳性,免疫胶体金检测卡检出16例阳性,提示PCR方法更有优势。 展开更多

关键词 2型犬细小病毒 NS1基因 PCR 检测方法

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鱼腥草对犬细小病毒性肠炎治疗效果的观察 被引量：2

9

作者 蔡晓红 胡大勇 +4 位作者 于晓玲 徐力军 梁晚枫 贾立军 金清洙 《吉林畜牧兽医》 2015年第10期59-61,共3页

为观察鱼腥草注射液对惠有细小病毒性肠炎（Canine parvovirus，CP）犬的治疗效果，本试验对前来延边大学动物医院就诊的100例患有犬细小病毒性肠炎的2～3月龄的金毛犬进行随机分组，并采用四种不同治疗方案进行治疗，即分别使用硫酸庆... 为观察鱼腥草注射液对惠有细小病毒性肠炎（Canine parvovirus，CP）犬的治疗效果，本试验对前来延边大学动物医院就诊的100例患有犬细小病毒性肠炎的2～3月龄的金毛犬进行随机分组，并采用四种不同治疗方案进行治疗，即分别使用硫酸庆大小诺霉素注射液，鱼腥草注射液，硫酸庆大小诺霉素注射液配合犬细小病毒单克隆抗体（CPV—McAb），鱼腥草注射液配合犬细小病毒单克隆抗体并对结果进行对比分析。结果显示：此四种方案的治愈率分别为：68％、76％、84％、92％，本试验通过四种治疗方案的对比为犬细小病毒的治疗提供了可靠依据，具有较好的临床应用推广价值。 展开更多

关键词 犬 细小病毒性肠炎 鱼腥草注射液 治疗

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红曲霉素对禽机体免疫的影响研究报告 被引量：1

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作者 蔡晓红 于海玲 +4 位作者 胡大勇 刘超 梁晚枫 张敏 金清洙 《吉林畜牧兽医》 2015年第12期12-13,共2页

阐明红曲霉素对鸡免疫性能的影响。用鸡进行了30 d喂养试验。在给药1个月后对鸡进行常规指标、血液指标、脏器系数的检测试验。试验结果表明:鸡的常规指标、血液指标以及脏器系数与空白组有差异,实验证明添加少量红曲霉素可以增强鸡的... 阐明红曲霉素对鸡免疫性能的影响。用鸡进行了30 d喂养试验。在给药1个月后对鸡进行常规指标、血液指标、脏器系数的检测试验。试验结果表明:鸡的常规指标、血液指标以及脏器系数与空白组有差异,实验证明添加少量红曲霉素可以增强鸡的免疫能力。 展开更多

关键词 红曲霉素 鸡 免疫器官

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犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用

11

作者 李文佳 陈姗 高旭 《吉林畜牧兽医》 2020年第9期6-8,共3页

为建立犬瘟热病毒(CDV)的一步法RT-PCR检测方法,并将其应用于临床实践检测。本研究根据GenBank上已登录的CDV基因序列,设计一对特异性引物,建立CDV一步法RT-PCR检测方法,并将该方法应用于临床检测。结果显示,该方法具有较好的敏感性、... 为建立犬瘟热病毒(CDV)的一步法RT-PCR检测方法,并将其应用于临床实践检测。本研究根据GenBank上已登录的CDV基因序列,设计一对特异性引物,建立CDV一步法RT-PCR检测方法,并将该方法应用于临床检测。结果显示,该方法具有较好的敏感性、特异性和重复性,可用于CDV感染的早期诊断和病原监测。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 一步法RT-PCR 检测方法

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