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牛瑟氏泰勒虫双拷贝p33表面蛋白基因在原核细胞中的串联表达
被引量:
4
1
作者
杨兴
许应天
+2 位作者
张守发
沈岩
白雪梅
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期647-649,共3页
为串联融合表达牛瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)p33表面蛋白,本研究根据GenBank中登录的T.sergenti p33基因序列(D87198),在去掉信号肽的部分设计两对引物。PCR扩增出两段相同的p33基因(p331、p332),大小均为684bp,并将两个基因片段...
为串联融合表达牛瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)p33表面蛋白,本研究根据GenBank中登录的T.sergenti p33基因序列(D87198),在去掉信号肽的部分设计两对引物。PCR扩增出两段相同的p33基因(p331、p332),大小均为684bp,并将两个基因片段按顺序依次插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建pGEX-p331-p332(2p33)。将pGEX-2p33重组质粒转化E.coli BL21中进行诱导表达。经SDS-PAGE电泳显示,该融合蛋白获得了高效表达,分子量约为80ku,表达产物以包涵体的形式存在。Western blot试验表明,融合蛋白可被T.sergenti阳性血清识别,具有较好的反应原性。该蛋白的串联融合表达为T.sergenti新型疫苗的研究奠定了基础。
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关键词
牛瑟氏泰勒虫
p33蛋白
串联表达
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职称材料
气肿疽梭菌菌体抗原分析
被引量:
5
2
作者
陈莹莹
金鑫
+5 位作者
姜成国
娄安钢
姜丹丹
汪雪烨
邓文学
李香春
《安徽农业科学》
CAS
2012年第17期9267-9269,共3页
[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带...
[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。
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关键词
气肿疽梭菌
菌体抗原
SDS-PAGE
免疫印迹
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职称材料
题名
牛瑟氏泰勒虫双拷贝p33表面蛋白基因在原核细胞中的串联表达
被引量:
4
1
作者
杨兴
许应天
张守发
沈岩
白雪梅
机构
延边大学农学院/预防兽医实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期647-649,共3页
基金
延边大学"211工程"三期重点学科项目
文摘
为串联融合表达牛瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)p33表面蛋白,本研究根据GenBank中登录的T.sergenti p33基因序列(D87198),在去掉信号肽的部分设计两对引物。PCR扩增出两段相同的p33基因(p331、p332),大小均为684bp,并将两个基因片段按顺序依次插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建pGEX-p331-p332(2p33)。将pGEX-2p33重组质粒转化E.coli BL21中进行诱导表达。经SDS-PAGE电泳显示,该融合蛋白获得了高效表达,分子量约为80ku,表达产物以包涵体的形式存在。Western blot试验表明,融合蛋白可被T.sergenti阳性血清识别,具有较好的反应原性。该蛋白的串联融合表达为T.sergenti新型疫苗的研究奠定了基础。
关键词
牛瑟氏泰勒虫
p33蛋白
串联表达
Keywords
Theileria sergenti
p33 gene
tandem expression
分类号
S852.71 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
气肿疽梭菌菌体抗原分析
被引量:
5
2
作者
陈莹莹
金鑫
姜成国
娄安钢
姜丹丹
汪雪烨
邓文学
李香春
机构
延边大学农学院预防兽医实验室
延边朝鲜族自治州畜牧总站
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第17期9267-9269,共3页
基金
吉林省延边州科技计划项目(2008YB501A02)
文摘
[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。
关键词
气肿疽梭菌
菌体抗原
SDS-PAGE
免疫印迹
Keywords
Clostridium chauvoei
Secretory antigen
SDS-PAGE
Immunoblotting
分类号
S852.41 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛瑟氏泰勒虫双拷贝p33表面蛋白基因在原核细胞中的串联表达
杨兴
许应天
张守发
沈岩
白雪梅
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
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职称材料
2
气肿疽梭菌菌体抗原分析
陈莹莹
金鑫
姜成国
娄安钢
姜丹丹
汪雪烨
邓文学
李香春
《安徽农业科学》
CAS
2012
5
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职称材料
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